一种新型抗体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术在这里描述和提供了针对Claudin18.2的新型抗体。本发明专利技术还描述和提供了所述抗体的药物组合物及其用于治疗癌症的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】一种新型抗体及其制备方法和应用交叉引用的申请本申请要求2018年7月18日提交的美国临时申请号62/700,174和2019年1月15日提交的美国临时申请号62/792,798的权益，其每一篇通过引用整体并入本文。
技术介绍
如下包含了可能对理解本专利技术有用的信息。这不是承认文中提供的任何信息都是现有技术，或与现有描述或声称的专利技术有关，或明确或隐含表明被引用的任何出版物或文档是现有技术。最近显示每年全球范围内有接近100万胃癌新增病例。2012年全球胃癌的死亡率已经超过了700,000(http://globocan.iarc.fr/old/FactSheets/cancers/stomach-new.asp)。根据美国癌症协会统计，2018年美国大约有26400人被确诊为胃癌，预计死亡人数为10800人。在亚洲胃癌的发生率占总人口的百分比更高，其中占2012年全球范围内报道的胃癌病例的约40％或将近400000例发生在中国。2012年在中国有325000人死于胃癌。这些人口统计数据清晰的表明胃癌有限的治疗方案是严重不满足医疗状况的，其中存在治疗方法不充分的问题，因此亟需新的治疗化合物和方法。多数国家通常将5-氟尿嘧啶与铂化合物联合用药作为治疗胃癌的一线治疗。然而，在中国通常采用紫杉醇和铂化合物联合用药来治疗胃癌，其声称疗效更好。抗体是一类相对较新的靶向治疗化合物，其在各种癌症的治疗上已有广泛应用。抗体靶向治疗相对于多种传统的非抗体类型的肿瘤治疗具有更高特异性和更低的副作用的潜能。一般来说，抗体靶向治疗的潜在靶点需要分辨正常和肿瘤细胞中的表达。不足为奇，细胞表面蛋白是抗体靶向目标发展具有潜能的区域，其可能会在肿瘤细胞上暴露出来。Claudin18.2最近被发现作为抗体的靶点来治疗胃癌和食道癌(JHematolOncol.2017(1):105)。同时它也是胰腺癌开发抗体药物的靶点。Claudin18.2属于Claudin蛋白家族，这一蛋白家族至少有24个近似相关的跨膜蛋白(forreview,seeOubanA,AhmedAA.:“Claudinsinhumancancer:areview”,HistolHistopathol.2010Jan；25(1):83-90)。Claudins是密封蛋白，它可以调节细胞旁路离子通道。某些密封蛋白成员在恶性肿瘤中存在差异表达。对于Claudin18.2而言，它是在短期分化的胃上皮细胞专一性表达的高选择性胃家族抗原，其对抗体药物具有有限的可及性(SahinUetal:“Claudin18splicevariant2isapan-cancertargetsuitablefortherapeuticantibodydevelopment.”ClinCancerRes2008,14:7624–34；andTureciOetal.“Claudin-18genestructure,regulation,andexpressionisevolutionaryconservedinmammal.”Gene2011,481:83–92)。Claudin18.2在恶性转移过程中是持续存在的，因此经常显示在人胃癌细胞表面(etall:“Claudin18.2isatargetforIMAB362antibodyinpancreaticneoplasms.”Int.J.Cancer:134,731–739,2014)。近期美国专利8,168,427披露了一种抗Claudin18.2抗体IMAB362。2016年公开的第2期临床研究中(https://meetinglibrary.asco.org/record/122651/abstract)，晚期或复发性胃癌和胃食管交界癌的患者应用IMBA362结合标准化疗的治疗同仅接受标准EOX(Epirubicin,OxaliplatinandCapecitabine)治疗的患者相比，被证实病程发展风险降低53％，死亡率降低49％。然而，抗体IMAb362对靶点Claudin18.2的亲和力显示相对较弱，因此所需剂量相对较高。另外，临床开发阶段的抗体是嵌合分子，在重复给药后会有免疫原性风险的可能。目前亟需一种结合Claudin18.2的新型抗体，其具有更高的效力、较低的剂量/花费，并且/或者具有较低的免疫原性风险。
技术实现思路
本专利技术在这里描述和声明的有很多特征，包括了很多实施例，但不局限于在简要概述中陈述、描述或参考的内容。本专利技术描述或声明的内容不限于，概述中由特性或由实施例限定的内容，所包括的内容是仅仅是为了说明而并非进行限制。本专利技术描述和提供的是结合Claudin18.2的新型抗体。本专利技术也进一步描述了根据本专利技术的抗体包括但不限于如下特征：ⅰ)对Claudin18.2具有相对较高的亲和力，ⅱ)人或人源化抗体，ⅲ)增强的抗体药物结合能力，ⅳ)增强的与免疫治疗联用，ⅴ)增强的ADCC功能，ⅵ)增强的疗效。一方面，本专利技术提供了结合人CLDN18.2蛋白的抗体，所述抗体选自由以下组成的组的序列组成：(1)抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:47所示的重链CDR1，如氨基酸序列SEQIDNO:48所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:49所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:50所示的轻链CDR1，如氨基酸序列SEQIDNO:51所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:52所示的轻链CDR3；(2)抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:53所示的重链CDR1，如氨基酸序列SEQIDNO:54所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:55所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:56所示的轻链CDR1，如氨基酸序列SEQIDNO:57所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:58所示的轻链CDR3；(3)抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:59所示的重链CDR1，如氨基酸序列SEQIDNO:60所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:61所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:62所示的轻链CDR1，如氨基酸序列SEQIDNO:63所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:64所示的轻链CDR3；(4)抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:65所示的重链CDR1，如氨基酸序列SEQIDNO:66所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:67所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:68所示的轻链CDR1，如氨基酸序列SEQIDNO:69所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:70所示的轻链CDR3；(5)抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种与人CLDN18.2蛋白结合的抗体，其特征在于，所述抗体选自:/na.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQ IDNO:47所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:48所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQID NO:49所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQ ID NO:50所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:51所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQ ID NO:52所示的轻链CDR3；/nb.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQ IDNO:53所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:54所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQID NO:55所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQ ID NO:56所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:57所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQ ID NO:58所示的轻链CDR3；/nc.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQ IDNO:59所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:60所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQID NO:61所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQ ID NO:62所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:63所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQ ID NO:64所示的轻链CDR3；/nd.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQ IDNO:65所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:66所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQID NO:67所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQ ID NO:68所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:69所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQ ID NO:70所示的轻链CDR3；/ne.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQ IDNO:71所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:72所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQID NO:73所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQ ID NO:74所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:75所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQ ID NO:76所示的轻链CDR3；/nf.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQ IDNO:77所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:78所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQID NO:79所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQ ID NO:80所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:81所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQ ID NO:82所示的轻链CDR3；/ng.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQ IDNO:83所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:84所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQID NO:85所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQ ID NO:86所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:87所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQ ID NO:88所示的轻链CDR3；/nh.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQ IDNO:89所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:90所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQID NO:91所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQ ID NO:92所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:93所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQ ID NO:94所示的轻链CDR3；/ni.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQ IDNO:95所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:96所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQID NO:97所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQ ID NO:98所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:99所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQ ID NO:100所示的轻链CDR3；/nj.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQ IDNO:101所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQ ID NO:102所示的重链CDR2，和如氨基...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180718 US 62/700,174;20190115 US 62/792,7981.一种与人CLDN18.2蛋白结合的抗体，其特征在于，所述抗体选自:
a.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:47所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:48所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:49所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:50所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:51所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:52所示的轻链CDR3；
b.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:53所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:54所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:55所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:56所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:57所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:58所示的轻链CDR3；
c.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:59所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:60所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:61所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:62所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:63所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:64所示的轻链CDR3；
d.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:65所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:66所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:67所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:68所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:69所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:70所示的轻链CDR3；
e.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:71所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:72所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:73所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:74所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:75所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:76所示的轻链CDR3；
f.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:77所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:78所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:79所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:80所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:81所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:82所示的轻链CDR3；
g.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:83所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:84所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:85所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:86所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:87所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:88所示的轻链CDR3；
h.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:89所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:90所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:91所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:92所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:93所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:94所示的轻链CDR3；
i.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:95所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:96所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:97所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:98所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:99所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:100所示的轻链CDR3；
j.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:101所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:102所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:103所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:104所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:105所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:106所示的轻链CDR3；
k.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:107所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:108所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:109所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:110所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:111所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:112所示的轻链CDR3；
l.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:113所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:114所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:115或198所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:116所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:117所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:118所示的轻链CDR3；
m.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:113所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:114所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:198所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:116所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:117所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:118所示的轻链CDR3；
n.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:119所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:120所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:121所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:122所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:123所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:124所示的轻链CDR3；
o.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:125所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:126所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:127所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:128所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:129所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:130所示的轻链CDR3；
p.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:131所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:132所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:133所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:134所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:135所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:136所示的轻链CDR3；
q.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:137所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:138所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:139所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:140所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:141所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:142所示的轻链CDR3；
r.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:143所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:144所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:145所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:146所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:147所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:148所示的轻链CDR3；
s.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:149所示的重链CDR1，、如氨基酸序列SEQIDNO:150所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:151所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:152所示的轻链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:153所示的轻链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:154所示的轻链CDR3；
t.抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:155所示的重链CDR1、如氨基酸序列SEQIDNO:156所示的重链CDR2，和如氨基酸序列SEQIDNO:157所示的重链CDR3，所述轻链可变区包含如氨基酸序列SEQIDNO:15...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕越峰，卢建丰，K·肖恩贝克，李路，刘磊，张世文，杨岚，
申请(专利权)人：奥美药业有限公司，江苏奥赛康药业有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US