干扰素前药制造技术

本发明专利技术提供干扰素前药和其制备方法及其在刺激免疫系统或治疗癌症或感染性疾病中的应用

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】干扰素前药、制备方法及应用
[0001]相关申请交叉引用
[0002]本申请要求于
2021
年1月
14
日提交的美国临时申请第
63/137,370
号的优先权，优先权申请的内容以全文引用的方式并入本文中
。
[0003]序列表
[0004]本申请含有已经以
ASCII
格式电子提交的序列表，并且特此以全文引用的方式并入
。
创建于
2022
年1月
13
日的所述
ASCII
副本名称为
025471_WO014_SL.txt
且大小为
397,253
字节
。

技术介绍

[0005]干扰素
(IFN)
调控多种免疫功能，包括在病毒感染时调控及活化免疫反应
。
根据不同干扰素所传递信号的受体不同，干扰素可分为多个类型
。I
型干扰素和细胞表面上受体复合物结合，所述受体复合物也即由
IFNAR1
链和
IFNAR2
链构成的
IFN
‑
α
/
β
受体
(IFNAR)(Weerd et al.The Journal of Biological Chemistry(2007)282(28):20053
–
7)。II
型干扰素
(
人干扰素
γ
，
IFN
γ
)
由细胞毒性
T
细胞和辅助型
T
细胞分泌
、
释放，并与由
IFNGR1
链和
IFNGR2
链构成的
IFN
γ
受体
(IFNGR)
结合
(Parkin and Cohen.Immunology(2001)357(9270):1777
‑
89)。
[0006]干扰素
‑
γ
(IFN
γ
)
和干扰素
‑
α
(IFN
α
)
在调控免疫系统中起着重要作用
。
他们已在临床研究中被证实可用于治疗癌症
。
例如，
IFN
γ
被证实可用于治疗卵巢癌
(Marth etal.,Int.J.Gynecol.(Cancer)(2006)16:1522
–
1528)。
在二期临床研究中，高达
0.1mg
的剂量被证明是有效的，然而，当剂量降低时，出现多种明显的副作用
。IFN
α
‑
2b
已被批准为一种治疗性蛋白，以单一疗法或者与其他抗肿瘤药物联合使用，可以治疗多种癌症，然而其应用中存在类似感冒的并发症限制了其临床应用
(Kirwood.,Semin Oncol(2002)29(3Suppl 7):18
‑
26)。
[0007]因此有必要开发一种基于
IFN
γ
和
IFN
α
的且具有更强的肿瘤位点特异性，更少的副作用，和
/
或增强的治疗效率的肿瘤治疗方法
。
本公开涉及到的所有文献
、
专利
、
专利申请在此均全文被引用
。
[0008]专利技术概述
[0009]本专利技术提供一种前药，包括人干扰素
(IFN)
激动剂多肽，掩蔽部分和载体部分，其中所述掩蔽部分包括可以与人干扰素激动剂多肽结合并抑制所述人干扰素激动剂多肽生物学活性的抗体的抗原结合片段，所述人干扰素激动剂多肽为干扰素
α
(IFN
α
)
且与所述载体部分融合，所述掩蔽部分与所述人干扰素激动剂多肽或所述载体部分融合，以上所述融合可选择地通过肽连接物而融合
。
[0010]一方面，本专利技术提供一种前药，包括人干扰素
(IFN)
激动剂多肽，掩蔽部分和载体部分，其中所述掩蔽部分与人干扰素激动剂多肽结合并抑制所述人干扰素激动剂多肽的生物学活性，所述人干扰素激动剂多肽与所述载体部分融合，且所述掩蔽部分与人干扰素激动剂多肽或所述载体部分融合，以上所述融合可选择地通过肽连接物而融合
。
[0011]在一些实施例中，所述
IFN
α
为
IFN
α
‑
2a
，
IFN
α
‑
2b
，或其类似物
。
在一些实施例中，所
述
IFN
为
IFN
α
‑
2a
，
IFN
α
‑
2b
，
IFN
γ
，或其类似物
。
[0012]在特定实施例中，所述
IFN
α
‑
2a
包括选自
SEQ ID NO:65
或与
SEQ ID NO:65
具有至少
95
％同源性的氨基酸序列
。
[0013]在特定实施例中，所述
IFN
γ
包括选自
SEQ ID NO:5,6
和7，或与
SEQ ID NO:5,6
或7具有至少
90
％同源性的氨基酸序列
。
在特定实施例中，所述
IFN
α
‑
2b
包括选自
SEQ ID NO:66
或与
SEQ ID NO:66
具有至少
95
％同源性的氨基酸序列
。
[0014]在一些实施例中，所述
IFN
激动剂多肽通过不可切割肽连接物与所述载体部分融合，且所述掩蔽部分通过可切割肽连接物或不可切割肽连接物与所述载体部分融合
。
在其他实施例中，所述
IFN
激动剂多肽通过不可切割肽连接物或可切割肽连接物与所述载体融合，且所述掩蔽部分通过不可切割肽连接物与所述载体融合
。
[0015]在一些实施例中，所述载体部分包括抗体
Fc
结构域，所述
Fc
结构域包括具有
knob
突变的第一
Fc
多肽链，和具有
hole
突变的第二
Fc
多肽链；其中所述
IFN
激动剂多肽通过可切割肽连接物与所述第一
Fc
多肽链本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
前药，包括人干扰素
(IFN)
激动剂多肽，掩蔽部分和载体部分，其中，所述掩蔽部分包括抗体的抗原结合片段，其可以和人干扰素激动剂多肽结合并抑制所述人干扰素激动剂多肽的生物学活性，所述人干扰素激动剂多肽为干扰素
α
(IFN
α
)
且与所述载体部分融合，以及，所述掩蔽部分可选择地通过肽连接物与所述人干扰素激动剂多肽或所述载体部分融合
。2.
前药，包括人干扰素
(IFN)
激动剂多肽，掩蔽部分和载体部分，其中，所述掩蔽部分与人干扰素激动剂多肽结合并抑制所述人干扰素激动剂多肽的生物学活性，所述人干扰素激动剂多肽与所述载体部分融合，且所述掩蔽部分可选择地通过肽连接物与所述人干扰素激动剂多肽或所述载体部分融合
。3.
根据权利要求1所述的前药，其特征在于，所述
IFN
α
为
IFN
α
‑
2a
，
IFN
α
‑
2b
，或其类似物
。4.
根据权利要求2所述的前药，其特征在于，所述
IFN
为
IFN
α
‑
2a
，
IFN
α
‑
2b
，
IFN
γ
，或其类似物
。5.
根据权利要求4所述的前药，其特征在于，所述
IFN
γ
包括选自
SEQ ID NO:5,6
和7或与
SEQ ID NO:5,6
或7具有至少
90
％同源性的氨基酸序列
。6.
根据权利要求1‑4任一项所述的前药，其特征在于，所述
IFN
α
‑
2a
包括选自
SEQ ID NO:65
或与
SEQ ID NO:65
具有至少
95
％同源性的氨基酸序列
。7.
根据权利要求1‑4任一项所述的前药，其特征在于，所述
IFN
α
‑
2b
包括选自
SEQ ID NO:66
或与
SEQ ID NO:66
具有至少
95
％同源性的氨基酸序列
。8.
根据权利要求1‑7任一项所述的前药，其特征在于，所述
IFN
激动剂多肽通过不可切割肽连接物与所述载体融合，且所述掩蔽部分通过可切割肽连接物或不可切割肽连接物与所述载体融合
。9.
根据权利要求1‑7任一项所述的前药，其特征在于，所述
IFN
激动剂多肽通过不可切割肽连接物或可切割连接物与所述载体融合，且所述掩蔽部分通过不可切割肽连接物与所述载体融合
。10.
根据权利要求1‑7任一项所述的前药，其特征在于，所述载体包括抗体
Fc
结构域，所述
Fc
结构域的第一
Fc
多肽链包含
knob
突变，第二
Fc
多肽链包含
hole
突变；其中，所述
IFN
激动剂多肽通过可切割肽连接物与所述第一
Fc
多肽链融合，所述掩蔽部分通过不可切割肽连接物与所述第二
Fc
多肽链融合
。11.
根据权利要求1‑7任一项所述的权利要求，其特征在于，所述载体部分为抗体
Fc
结构域或为包含
knobs
‑
into
‑
holes
突变的抗体，其中所述人
IFN
激动剂多肽和其掩蔽部分分别与抗体
Fc
结构域的不同多肽链或与抗体不同重链融合
。12.
根据权利要求1‑7所述的前药，其特征在于，所述载体为抗体，所述前药包括两条通过不可切割肽连接物分别与抗体两条重链的
C
末端融合的
IFN
激动剂多肽，以及两个通过可切割肽连接物分别与两条
IFN
激动剂多肽融合的掩蔽部分
。13.
根据权利要求1‑
11
任一项所述的前药，其特征在于，所述肽连接物为可切割肽连接
物，所述肽连接物包括以下物质的底物序列：尿激酶型纤溶酶原激活剂
(uPA)、
膜型基质金属蛋白酶
(MT1
‑
MMP)、
基质金属蛋白酶
2(MMP2)、MMP9、
蛋白裂解酶
、
豆荚蛋白
、
纤溶酶
、TMPRSS
‑
3/4、
组织蛋白酶
,
胱天蛋白酶
,
人嗜中性粒细胞弹性蛋白酶
,
β
‑
分泌酶
,
或
PSA
，或
(i)uPA
和
MMP2
二者，
(ii)uPA
和
MMP9
二者，或
(iii)
蛋白裂解酶
,MMP2
以及
MMP9。14.
根据权利要求8‑
13
任一项所述的前药，其特征在于，所述可切割肽连接物包括选自
SEQ ID NOs:26
‑
45
的氨基酸序列
。15.
根据权利要求8‑
13
任一项所述的前药，其特征在于，所述不可切割肽连接物包括选自
SEQ ID NOs:122
‑
125
的氨基酸序列
。16.
根据权利要求8‑
13
任一项所述的前药，其特征在于，所述可切割肽连接物可被位于肿瘤位点或其周围微环境中的一个或多个蛋白酶切割，且所述切割使所述前药在肿瘤位点或其周围微环境中活化
。17.
根据前述任一项权利要求所述的前药，其特征在于，所述掩蔽部分抑制所述
IFN
激动剂多肽和
IFN
受体的结合
。18.
根据前述任一项权利要求所述的前药，其特征在于，所述掩蔽部分包括单链抗体
(scFv)
，所述单链抗体包括具有如
SEQ ID NO:1
所示氨基酸序列的重链可变区和具有如
SEQ ID NO:2
所示氨基酸序列的轻链可变区，或具有如
SEQ ID NO:3
所示氨基酸序列的重链可变区和如
SEQ ID NO:4
所示氨基酸序列的轻链可变区
。19.
根据权利要求2或4‑
18
任一项所述的前药，其特征在于，所述掩蔽部分选自干扰素
γ
受体1胞外结构域
(IFNGR1
‑
ECD)
或其功能类似物，或可结合
IFN
γ
的抗体或其结合片段
。20.
根据权利要求
19
所述的前药，其特征在于，所述掩蔽部分包括
IFNGR1
‑
ECD
或其功能类似物，并且所述
IFNGR1
‑
ECD
可选择地包括选自
SEQ ID NOs:8
和9的氨基酸序列
。21.
根据前述任一项权利要求所述的前药，其特征在于，所述载体部分为抗体
Fc
结构域，抗体，或抗体的抗原结合片段
。22.
根据前述任一项权利要求所述的前药，其特征在于，所述载体部分包括抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段与肿瘤细胞，肿瘤微环境中的细胞，癌细胞或免疫细胞表面表达的抗原结合
。23.
根据权利要求
21
所述的前药，其特征在于，所述免疫细胞选自
NK
细胞，
T
细胞，
B
细胞和巨噬细胞
。24.
根据权利要求
21
‑
23
任一项所述的前药，其特征在于，所述载体部分包括的抗体或其抗原结合片段可与如下述抗原结合：
PD
‑
1、LAG
‑
3、TIGIT、SIRP
α
、ILT2、CD206、NKD2G、CTLA
‑
4、CD8、NKG2A、CD16a、CD38、BCMA、
细胞表面糖蛋白
CD2
亚型
1(CS1)、PD
‑
L1、CD47、CMET、EGFR、ROR1、TROP
‑
2、HER2、CLDN18.2
和
VEGFR2。25.
根据权利要求
21
‑
23
任一项所述的前药，其特征在于，所述载体部分包括可与
PD
‑1结合的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体的轻链可变区含有
SEQ ID NO:10
氨基酸序列，重链可变区含有
SEQ ID NO:11
氨基酸序列；或轻链可变区含有
SEQ IDNO:12
氨基酸序列，重链可变区含有
SEQ ID NO:13
氨基酸序列
。26.
根据权利要求
21
‑
23
任一项所述的前药，其特征在于，所述载体部分包括抗体或抗原结合片段，包括：
i)
具有
SEQ ID NO:97
或与
SEQ ...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕越峰，
申请(专利权)人：奥美药业有限公司，
类型：发明
国别省市：