全新被掩蔽的细胞因子及其应用制造技术

本发明专利技术提供前药、及其制备方法，及在刺激免疫系统、治疗癌症、自身免疫疾病、或感染性疾病中的应用。病中的应用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】et al.,Nature(2007)448(7152):484
‑
87；Nurieva et al.,Nature(2007)448(7152):480
‑
83)。IL
‑
21受体组合物由私有链IL
‑
21Rα及共有链γC(或Rγ)组成。人IL
‑
21以非常高的亲和力(K
D
～70pM；Zhang et al.,Biochem Biophys Res Commun.(2003)300(2):291
‑
6)和IL
‑
21Rα结合，而以相对低的亲和力(K
D
～160μM)与IL
‑
21Rγ结合。
[0009]上述细胞因子、其突变体及其融合体在治疗中的潜能正在被研究开发，其中重组IL
‑
2作为首个获批上市的用于癌症治疗的细胞因子。然而，细胞因子药物及候选药物具有明显的副作用，另外，这些药物在体内的半衰期通常较短，甚至以抗体
‑
细胞因子融合蛋白的形式存在，其原因可能是由于免疫细胞上的细胞因子受体而形成的“PK沉降”。
[0010]因此，有必要进一步研究开发具有更高肿瘤位点选择性，具有改善PK及有效的基于细胞因子的肿瘤治疗方法，以降低副作用。
[0011]专利技术概述
[0012]本专利技术提供一种前药，包括细胞因子部分、掩蔽部分、载体部分，其中所述掩蔽部分和细胞因子部分结合并抑制所述细胞因子的生物学活性；所述载体部分包括可与靶细胞表面表达的抗原结合的抗原结合部分；且所述掩蔽部分不通过可切割的连接物(如通过不可切割肽连接物和所述载体部分非直接连接，或不通过肽连接物和所述载体部分直接连接)和所述载体部分连接。
[0013]在一些实施例中，所述前药可被一种细胞活化，所述细胞表面同时表达抗原及细胞因子受体。在一些实施例中，所述前药在含有上述细胞的病灶处的生物活性相比于在不含上述细胞位点处的生物活性提高至少2倍、5倍或10倍。在一些特定实施例中，所述细胞因子部分的受体包括两个或多个亚基。
[0014]在一些实施例中，所述抗原选自PD
‑
1,PD
‑
L1,CTLA
‑
4,TIGIT,TIM
‑
3,LAG
‑
3,CD25,CD16a,CD16b,NKG2D,NKP44,NKP30,CD19,CD20,CD30,CD38,BCMA,及信号调节蛋白α(SIRPα，命名为CD172a)。
[0015]在一些实施例中，所述细胞因子部分包括IL
‑
2激动剂多肽，IL
‑
7激动剂多肽，IL
‑
9激动剂多肽，IL
‑
15激动剂多肽、IL
‑
21激动剂多肽，IL
‑
1α激动剂多肽，IL
‑
1β激动剂多肽，IL
‑
4激动剂多肽，IL
‑
5激动剂多肽，IL
‑
6激动剂多肽，IL
‑
8激动剂多肽，IL
‑
10激动剂多肽，IL
‑
12激动剂多肽，IL
‑
17激动剂多肽，IL
‑
18激动剂多肽，IL
‑
22激动剂多肽，IL
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23激动剂多肽，IL
‑
31激动剂多肽，IL
‑
33激动剂多肽，IL
‑
36激动剂多肽，干扰素
‑
α激动剂多肽，干扰素γ激动剂多肽，4
‑
1BB配体，OX
‑
40配体或CD
‑
40配体。
[0016]在一些实施例中，所述细胞因子部分包括IL
‑
2激动剂多肽或IL
‑
15激动剂多肽，所述掩蔽部分包括IL
‑
2受体β胞外域(IL
‑
2RβECD)或其功能性片段。在其他实施例中，所述细胞因子部分包括IL
‑
21激动剂多肽，所述掩蔽部分包括抗IL
‑
21抗体的Fab，单链Fv(scFv)，或其单域抗体。在另一些实施例中，所述细胞因子部分包括IL
‑
2激动剂多肽，所述掩蔽部分包括抗IL
‑
2抗体的Fab，scFv，或其单域抗体。在另一些实施例中，所述细胞因子部分包括IL
‑
15激动剂多肽，所述掩蔽部分包括抗IL
‑
15抗体的Fab，scFv，或其单域抗体。在另一些实施例中，所述细胞因子部分包括IL
‑
15激动剂多肽，所述掩蔽部分包括IL
‑
15受体α的Sushi域(IL
‑
15RαSushi域)。
[0017]在一些实施例中，所述细胞因子部分包括具有SEQ ID NO:1序列的IL
‑
21激动剂多肽，或与其具有至少90％同源性的氨基酸序列。在其他实施例中，所述细胞因子部分包括具
有SEQ ID NO:6或62序列的IL
‑
2激动剂多肽，或与其具有至少95％同源性的氨基酸序列。在其他实施例中，所述细胞因子部分包括具有SEQ ID NO:7序列的IL
‑
15激动剂多肽，或与其具有至少95％同源性的氨基酸序列。
[0018]在一些实施例中，所述掩蔽部分包括所述细胞因子受体的胞外域(ECD)。在特定实施例中，所述细胞因子包括IL
‑
7激动剂多肽，所述掩蔽部分包括IL
‑
7受体α的胞外域(IL
‑
7RαECD)或其功能类似物。在特定实施例中，所述细胞因子部分为IL
‑
21激动剂多肽，所述掩蔽部分包括IL
‑
21受体α的胞外域(IL
‑
21RαECD)或其功能类似物。在特定实施例中，所述掩蔽部分包括IL
‑
21RαECD或其功能类似物，其氨基酸序列选自SEQ ID NO:12,13及63
‑
73或与其具有至少90％(如至少95％)同源性的氨基酸序列。在一些实施例中，所述掩蔽部分包括IL
‑
2RβECD或其功能类似物，包括SEQ ID NO:11或与其具有至少95％同源性的氨基酸序列。
[0019]在一些实施例中，所述掩蔽部分包括可与细胞因子部分结合并抑制或干扰所述细胞因子与其受体相互作用的scFv。在特定实施例中，所述掩蔽部分为可与人IL
‑
21结合的scFv，其包括氨基酸序列SEQ ID NO:20或21。在特定实施例中，所述掩蔽部分包括可与IL
‑
2结合的scFv，并通过与IL
‑
2结合抑制IL
‑
2与I本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种前药，包括细胞因子部分、掩蔽部分和载体部分，其中，a)掩蔽部分和细胞因子部分结合并抑制所述细胞因子的生物学活性；b)载体部分包括抗原结合部分，其中抗原结合部分和靶细胞表面表达的抗原结合；以及c)掩蔽部分通过不可切割肽连接物或不通过肽连接物直接或间接地和载体部分连接。2.根据权利要求1所述的前药，其特征在于，所述前药被细胞活化，其中所述细胞表面同时表达抗原和细胞因子部分的受体，优选的是，所述前药的生物学活性在含有所述细胞的病灶位点相较于其在不含有所述细胞的位点的活性增加至少2,5或10倍。3.根据权利要求1或2所述的前药，其特征在于，其中细胞因子部分的受体包括两个或多个亚基。4.根据前述任一项权利要求所述的前药，其特征在于，所述抗原选自PD
‑
1,PD
‑
L1,CTLA
‑
4,TIGIT,TIM
‑
3,LAG
‑
3,CD25,CD16a,CD16b,NKG2D,NKP44,NKP30,CD19,CD20,CD30,CD38,BCMA和信号调节蛋白α(SIRPα)。5.根据前述任一项权利要求所述的前药，其特征在于，细胞因子部分包括IL
‑
2激动剂多肽，IL
‑
7激动剂多肽，IL
‑
9激动剂多肽，IL
‑
15激动剂多肽，IL
‑
21激动剂多肽，IL
‑
1α激动剂多肽，IL
‑
1β激动剂多肽，IL
‑
4激动剂多肽，IL
‑
5激动剂多肽，IL
‑
6激动剂多肽，IL
‑
8激动剂多肽，IL
‑
10激动剂多肽，IL
‑
12激动剂多肽，IL
‑
17激动剂多肽，IL
‑
18激动剂多肽，IL
‑
22激动剂多肽，IL
‑
23激动剂多肽，IL
‑
31激动剂多肽，IL
‑
33激动剂多肽，IL
‑
36激动剂多肽，干扰素α激动剂多肽，干扰素γ激动剂多肽，4
‑
1BB配体，OX
‑
40配体或CD
‑
40配体。6.根据前述任一项权利要求所述的前药，其特征在于，掩蔽部分包括细胞因子受体ECD，或特异性结合细胞因子的抗原结合域。7.根据前述任一项权利要求所述的前药，其特征在于，i)细胞因子部分包括IL
‑
7激动剂多肽，且掩蔽部分包括IL
‑
7受体α胞外域(IL
‑
7RαECD)或其功能类似物；ii)细胞因子部分包括IL
‑
21激动剂多肽，且掩蔽部分包括IL
‑
21受体αECD(IL
‑
21RαECD)或其功能类似物；iii)细胞因子部分包括IL
‑
2激动剂多肽或IL
‑
15激动剂多肽，且掩蔽部分包括IL
‑
2受体βECD(IL
‑
2RβECD)或其功能类似物；iv)细胞因子部分包括IL
‑
21激动剂多肽，且掩蔽部分包括抗IL
‑
21的Fab、单链Fv(scFv)、或单域抗体；v)细胞因子部分包括IL
‑
2激动剂多肽，且掩蔽部分包括抗IL
‑
2的Fab、scFv、或单域抗体；vi)细胞因子部分包括IL
‑
15激动剂多肽，且掩蔽部分包括抗IL
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15的Fab、scFv、或单域抗体；或者vii)细胞因子部分包括IL
‑
15激动剂多肽，且掩蔽部分包括IL
‑
15受体α的sushi域(IL
‑
15Rαsushi域)。8.根据权利要求5
‑
7任一项所述的前药，其特征在于，细胞因子部分包括IL
‑
2激动剂多肽，所述IL
‑
2激动剂多肽包括SEQ ID NO:6或62，或与其具有至少95％同源性的氨基酸序列。
9.根据权利要求5
‑
7任一项所述的前药，其特征在于，细胞因子部分包括IL
‑
15激动剂多肽，所述IL
‑
15激动剂多肽包括SEQ ID NO:7，或与其具有至少95％同源性的氨基酸序列。10.根据权利要求5
‑
9任一项所述的前药，其特征在于，细胞因子部分包括IL
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2或IL
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15激动剂多肽，且掩蔽部分包括IL
‑
2RβECD或其功能类似物，优选地是，所述IL
‑
2RβECD包括SEQ ID NO:11或与其具有至少95％同源性的氨基酸序列。11.根据权利要求5
‑
9任一项所述的前药，其特征在于，细胞因子部分包括IL
‑
2激动剂多肽，且掩蔽部分包括抗IL
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2的scFv；可选地，所述抗IL
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2的scFv抑制或干扰IL
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2细胞因子部分与IL
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2Rα、IL
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2Rβ和IL
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2Rγ中一个或多个的相互作用；可选地，所述scFv包括抗体4E12B2D10、抗IL
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2scFv1或抗IL
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2scFv2的HCDR1
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3和LCDR1
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3，或重链和轻链的可变区；或包括SEQ...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕越峰，于春晓，卢建丰，刘丽勤，
申请(专利权)人：奥美药业有限公司，
类型：发明
国别省市：