抗GPC3抗体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及免疫学及肿瘤学领域，具体而言涉及抗GPC3的抗体或其抗原结合片段，编码它们的核酸分子，制备它们的方法。本发明专利技术的抗GPC3抗体或其抗原结合片段对GPC3阳性肿瘤细胞具有提高的特异性和亲和力。因此，本发明专利技术进一步涉及包含所述抗体或其抗原结合片段的免疫缀合物，其展示出在癌症部位近红外荧光成像和光热治疗的能力。本发明专利技术的抗体及免疫缀合物可用于许多目的，例如作为肝癌诊断的显像试剂、肝癌手术中的手术导航试剂和肝癌光热治疗试剂等，在肝癌靶向治疗及诊断领域展现出巨大潜力。

【技术实现步骤摘要】
抗GPC3抗体及其用途
本专利技术涉及免疫学及肿瘤学领域，具体而言涉及抗GPC3的抗体或其抗原结合片段以及包含其的免疫缀合物。本专利技术还涉及这些抗体及免疫缀合物用于预防和/或治疗肿瘤(例如表达GPC3的肿瘤)、检测和/或示踪肿瘤(例如表达GPC3的肿瘤)的用途。
技术介绍
恶性肿瘤已经成为当今世界最严重的公共卫生问题，而肝癌一直是患病人数最多、致死率最高的恶性肿瘤之一。传统的诊断和筛查肝癌手段主要是影像学检查和血清标志物检测，但由于肝癌的基因组不稳定及高度异质性导致其一直缺乏有效的早期诊断方法，以至于大多数患者被确诊时已经是肝癌晚期。肝癌早期治疗多采用手术治疗，晚期肿瘤多采取放化疗、免疫治疗等的综合性治疗，近期疗效虽有所提高，但远期疗效仍不理想，因此，寻找治疗肝癌更加有效的新策略已成为当前的研究热点。GPC3(Glypican-3)属于硫酸乙酰肝素(HS)蛋白聚糖家族中的磷脂酰肌醇蛋白聚糖家族。该蛋白聚糖家族有GPC1-6共六种亚型，都有以下相似之处，包括通过糖基磷脂酰肌醇(Glycosylphosphatidylinositol,G本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.能够特异性结合GPC3的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含：/n(a)包含下述3个互补决定区(CDR)的重链可变区(VH)：/n(i)VH CDR1，其由下述序列组成：SEQ ID NO:6，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列，/n(ii)VH CDR2，其由下述序列组成：SEQ ID NO:8，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列，和/n(iii)VH CDR3，其由下述序列组成：SEQ ID NO:10，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置...

【技术特征摘要】
20190614 CN 20191051313081.能够特异性结合GPC3的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含：
(a)包含下述3个互补决定区(CDR)的重链可变区(VH)：
(i)VHCDR1，其由下述序列组成：SEQIDNO:6，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列，
(ii)VHCDR2，其由下述序列组成：SEQIDNO:8，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列，和
(iii)VHCDR3，其由下述序列组成：SEQIDNO:10，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列；
和/或
(b)包含下述3个互补决定区(CDR)的轻链可变区(VL)：
(iv)VLCDR1，其由下述序列组成：SEQIDNO:13，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列，
(v)VLCDR2，其由下述序列组成：SEQIDNO:15，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列，和
(vi)VLCDR3，其由下述序列组成：SEQIDNO:17，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列；
优选地，(i)-(vi)任一项中所述的置换为保守置换；
优选地，所述抗体或其抗原结合片段包含：
(1)包含如下3个CDR的重链可变区(VH)：序列为SEQIDNO：6的VHCDR1，序列为SEQIDNO：8的VHCDR2，序列为SEQIDNO：10的VHCDR3；和/或，
(2)包含如下3个CDR的重链可变区(VL)：序列为SEQIDNO：13的VLCDR1，序列为SEQIDNO：15的VLCDR2，序列为SEQIDNO：17的VLCDR3。


2.能够特异性结合GPC3的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含：
(a)如SEQIDNO:3所示的重链可变区(VH)中含有的3个CDR；
和/或，
(b)如SEQIDNO:4所示的轻链可变区(VL)中含有的3个CDR；
优选地，所述重链可变区(VH)中含有的3个CDR和/或所述轻链可变区(VL)中含有的3个CDR由Kabat、Chothia或IMGT编号系统定义。


3.权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段包含：
(a)重链可变区(VH)，其包含选自下列的氨基酸序列：
(i)SEQIDNO：3所示的序列；
(ii)与SEQIDNO：3所示的序列相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个，3个，4个或5个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列；或
(iii)与SEQIDNO：3所示的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列；
和
(b)轻链可变区(VL)，其包含选自下列的氨基酸序列：
(iv)SEQIDNO：4所示的序列；
(v)与SEQIDNO：4所示的序列相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个，3个，4个或5个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列；或
(vi)与SEQIDNO：4所示的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列；
优选地，(ii)或(v)中所述的置换是保守置换；
优选地，所述抗体或其抗原结合片段包含：具有如SEQIDNO:3所示的序列的VH和具有如SEQIDNO:4所示的序列的VL。


4.权利要求1-3任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗原结合片段选自scFv、di-scFv、(scFv)2、Fab、Fab’、(Fab’)2、Fv、或二硫键稳定的Fv(dsFv)；和/或，所述抗体为鼠源抗体、嵌合抗体、人源化抗体、双特异性抗体或多特异性抗体。


5.权利要求1-4任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体为IgG抗体(例如，IgG1、IgG2、IgG3或IgG4抗体)。


6.免疫缀合物，其包含权利要求1-5任一项所述的抗体或其抗原结合片段以及连接于所述抗体或其抗原结合片段的另外的活性剂；
优选地，所述另外的活性剂选自可检测标记，例如近红外荧光染料(如吲哚菁绿)或放射性核素；优选地，所述另外的活性剂是吲哚菁绿；
优选地，所述另外的活性剂选自治疗剂，例如细胞毒剂、抗癌剂或光热治疗试剂；优选地，所述另外的活性剂是细胞毒剂或抗癌剂，例如索拉非尼；优选地，所述另外的活性剂是光热治疗试剂，例如近红外荧光染料，如吲哚菁绿。


7.嵌合抗原受体(CAR)，其包含权利要求1-5任一项所述的抗体或其抗原结合片段；
优选地，所述抗体或其抗原结合片段是单链抗体(例如，scFv、di-scFv或(scFv)2；优选地，所述抗体或其抗原结合片段是s...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗文新，胡耀凯，刘雪，陈思远，向新楚，唐济贤，夏宁邵，
申请(专利权)人：厦门大学，养生堂有限公司，
类型：发明
国别省市：福建;35