一种TGF-β受体融合蛋白药物组合物及其用途制造技术

本公开公开了一种TGF‑β受体融合蛋白药物组合物及其用途。具体而言，该药物组合物包含在枸橼酸钠缓冲液中的TGF‑β受体融合蛋白，所述的TGF‑β受体融合蛋白包含PD‑L1抗体靶向部分和TGF‑βRII胞外区。除此之外，该药物组合物还可含有糖和非离子型表面活性剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】一种TGF-β受体融合蛋白药物组合物及其用途本申请要求2018年11月09日提交的专利申请201811328326.1的优先权，其通过引用整体并入此处。
本公开属于药物制剂领域，具体涉及一种包含PD-L1抗体/TGF-βRII胞外区融合蛋白的药物组合物，以及其作为药物的用途。
技术介绍
这里的陈述仅提供与本公开有关的背景信息，而不必然地构成现有技术。在肿瘤治疗中，人们早已认识到化疗所带来的高毒性，以及化疗可导致耐药性癌细胞产生。即使是使用靶向性的治疗手段，来针对过度表达或过度激活的与肿瘤生存生长相关的蛋白，仍会有癌细胞通过变异来减少或逃脱对靶向性治疗所针对通路的依赖，并利用其它的通路继续生存。肿瘤免疫治疗近年来备受关注，是肿瘤治疗领域的焦点，较难产生耐药性是该疗法的突出优势。肿瘤免疫治疗主要通过免疫学原理和方法，提高肿瘤细胞的免疫原性和对效应细胞杀伤的敏感性，激发和增强机体抗肿瘤免疫应答。肿瘤免疫治疗将免疫细胞和效应分子输注宿主体内，两者协同机体免疫系统杀伤肿瘤、抑制肿瘤生长。程序性死亡受体1(programmeddeath1,PD-1)为CD28超家族成员。PD-1表达于活化的T细胞、B细胞及髓系细胞。PD-1有两个配体，即程序性死亡配体-1(programmeddeathligand1,PD-L1)和PD-L2。PD-L1与T细胞上的受体PD-1相互作用，在免疫应答的负调控方面发挥着重要作用。在许多人类肿瘤组织中均可检测到PD-L1蛋白的表达。肿瘤部位的微环境可诱导肿瘤细胞上的PD-L1的表达，表达的PD-L1有利于肿瘤的发生和生长，诱导抗肿瘤T细胞的凋亡。PD-1/PD-L1通路抑制剂可以阻断PD-1与PD-L1的结合，阻断负向调控信号，使T细胞恢复活性，从而增强免疫应答，因此，以PD-1/PD-L1为靶点的免疫调节对肿瘤抑制有重要的意义。转化生长因子-β(transforminggrowthfactor-β,TGF-β)属于调节细胞生长和分化的TGF-β超家族。TGF-β通过异源四聚体受体复合物传递信号，这个受体复合物是由两个I型和两个II型的跨膜丝氨酸/苏氨酸激酶受体组成。TGF-β是一种多功能的细胞因子，以细胞或背景依赖的方式发挥肿瘤抑制或肿瘤促进的作用。TGF-β的肿瘤抑制作用源于其诱导多个基因表达的能力。当肿瘤发展过程中引入突变或表观遗传修饰时，癌细胞逐渐耐受TGF-β的抑制作用，最终导致肿瘤的发展。研究发现阻断TGF-β信号传导通路能够减少肿瘤的转移。运用截短的Smad2/3显负性突变体抑制乳腺肿瘤细胞系的TGF-β信号通路，结果发现肿瘤细胞的转移能力被抑制。结肠癌的微卫星不稳定性研究发现，TGF-βRII无活性的突变，使转移减少，增加了患者术后的存活率。但总体而言，在临床治疗中单独施用TGF-β信号通路的抑制剂，其效果微弱，可能是因为TGF-β主要在肿瘤细胞内异常性高表达，而单独的TGF-β信号通路的抑制剂很难集中靶向肿瘤，而导致药效不高或抑制剂的生物利用度不高。因此，在肿瘤微环境中靶向并中和TGF-β基础上，抑制PD-1/PD-L1通路可以使T细胞恢复活性，增强免疫应答，更有效地提高抑制肿瘤发生和发展的效果。本申请人在先的PCT申请PCT/CN2016/104320(公开号WO2017084495)提供了一种PD-L1抗体。目前已有抗体/TGF-β受体融合蛋白公开，如WO2006074451A2、WO2009152610A1、WO2011109789A2、WO2013164694A1、WO2014164427A1、WO2015077540A2、WO9309228A1、WO9409815A1、WO2015077540A2、WO2015118175A2等。其中，默克公开一种PD-L1/TGF-β双功能融合蛋白BintrafuspAlfa(WO2015118175，也称M7824、FP17022)，目前BintrafuspAlfa已经在胃癌、肺癌、食管癌、NSCLC、胆道癌等肿瘤疾病中开展临床。但是，现有技术中的抗体药物其分子量大，结构复杂，容易降解、聚合或发生不希望发生的化学修饰等而变得不稳定。为了使抗体适合于给药，并且在储存及随后使用过程中能保持稳定性，发挥更好的效果，抗体药物的稳定制剂研究显得尤为重要。
技术实现思路
本公开提供一种更利于生产和给药，性能更稳定的包含PD-L1/TGF-βRII融合蛋白的药物组合物，其包含：-TGF-β受体融合蛋白，以及-缓冲液，所述缓冲液选自组氨酸盐缓冲液、琥珀酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液和枸橼酸盐缓冲液。在一些实施方案中，所述缓冲液为枸橼酸盐缓冲液。在一些实施方案中，所述的组氨酸盐缓冲液选自组氨酸-盐酸缓冲液，所述的琥珀酸盐缓冲液选自琥珀酸-琥珀酸钠缓冲液，所述枸橼酸盐缓冲液选自枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液；在一些实施方案中，所述缓冲液选自枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液。在可选的实施方案中，前述药物组合物中所述TGF-β受体融合蛋白浓度为大约0.5mg/ml至大约100mg/ml，优选为大约30mg/ml至大约70mg/ml。在一些实施方案中，药物组合物中所述TGF-β受体融合蛋白浓度为0.5mg/ml至100mg/ml，优选为30mg/ml至70mg/ml。TGF-β受体融合蛋白浓度非限制性实施例包括：大约30mg/ml、大约35mg/ml、大约40mg/ml、大约45mg/ml、大约50mg/ml、大约55mg/ml、大约60mg/ml、大约65mg/ml、大约70mg/ml，优选大约50mg/ml；在一些实施方案中，药物组合物中所述TGF-β受体融合蛋白浓度为30mg/ml、35mg/ml、40mg/ml、45mg/ml、50mg/ml、55mg/ml、60mg/ml、65mg/ml、70mg/ml，更优选50mg/ml。在可选的实施方案中，前述药物组合物中所述缓冲液的pH值为大约5.0到大约7.5，优选为大约6.0至大约6.5，还可选为约6.0、约6.1、约6.2、约63、约6.4、约6.5，更优选为大约6.2；在一些实施方案中，所述缓冲液的pH值为5.0至7.5或6.0至6.5，优选为6.0、6.1、6.2、63、6.4或6.5，更优选为6.2。在可选的实施方案中，缓冲液的浓度为约5mM至约30mM，优选为大约5mM至大约20mM，非限制性实施例包括5mM、6mM、7mM、8mM、9mM、10mM、12mM、14mM、16mM、18mM、20mM，更优选为10mM。在一些实施方案中，缓冲液的浓度为5mM至30mM，优选为5mM至20mM，在一些实施方案中，缓冲液的浓度为约10mM、约12mM、约14mM、约16mM、约18mM、约20mM，更优选为约10mM。在可选的实施方案中，前述药物组合物还包含糖。本公开的“糖”包含常规组合物(CH2O)n或其衍生物，包括单糖、二糖、三糖、多糖、糖醇、还原性糖、非还原性糖等等。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种药物组合物，其包含：/nTGF-β受体融合蛋白，以及/n缓冲液；/n其中，所述缓冲液选自：组氨酸盐缓冲液、琥珀酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181109 CN 2018113283261一种药物组合物，其包含：
TGF-β受体融合蛋白，以及
缓冲液；
其中，所述缓冲液选自：组氨酸盐缓冲液、琥珀酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液。


根据权利要求1所述的药物组合物，其中：
所述的组氨酸盐缓冲液是组氨酸-盐酸缓冲液，
所述的琥珀酸盐缓冲液是琥珀酸-琥珀酸钠缓冲液，
所述枸橼酸盐缓冲液是枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液；
优选地，所述缓冲液是枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液。


根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中所述缓冲液的浓度为大约5mM至大约30mM，优选为大约5mM至大约20mM，最优选为大约10mM。


根据权利要求1至3任一项所述的药物组合物，其中所述TGF-β受体融合蛋白的浓度为大约0.5mg/ml至大约100mg/ml，优选为大约30mg/ml至大约70mg/ml，最优选为大约50mg/ml。


根据权利要求1至4任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物的pH为大约5.0至大约7.5，优选为大约6.0至大约6.5，最优选为大约6.2。


根据权利要求1至5任一项所述的药物组合物，其中：
所述药物组合物还包含糖，
优选地，所述糖选自：海藻糖和蔗糖，
最优选地，所述糖为蔗糖。


根据权利要求6所述的药物组合物，其中所述糖的浓度为大约50mg/ml至大约100mg/ml，优选为大约60mg/ml至大约90mg/ml，最优选为大约80mg/ml。


根据权利要求1至7任一项所述的药物组合物，其中：
所述药物组合物还包含表面活性剂，
优选，所述表面活性剂为聚山梨醇酯，
更优选，所述表面活性剂为聚山梨醇酯80。


根据权利要求8所述的药物组合物，其中所述表面活性剂的浓度为大约0.1mg/ml至大约0.8mg/ml，优选为大约0.4mg/ml至大约0.8mg/ml，更优选为大约0.4mg/ml。


根据权利要求1至9任一项所述的药物组合物，其包含：



优选，所述药物组合物的pH为大约5.0至大约7.5；
更优选，所述药物组合物的pH为大约6.0至大约6.5；
优选地，所述药物组合物包含：



优选地，所述药物组合物的pH为大约6.0至大约6.5；
更优选地，所述药物组合物包含：



优选地，所述药物组合物的pH为约6.2。


根据权利要求1至10任一项所述的药物组合物，其中所述的TGF-β受体融合蛋白如通式(I)所示：
Ab-L-TGF-βRIIECD(I)
其中TGF-βRIIECD为TGF-βRII胞外区的截短形式；
Ab为PD-L1抗体或其抗原结合片段；
L为连接序列。


根据权利要求11所述的药物组合物，其中所述的连接序列为(G
4S)
xG，其中x为3、4、5或6，优选x为4。



根据权利要求11或12所述的药物组合物，其中，所述TGF-βRII胞外区的截短形式是TGF-βRII胞外结构域序列在氨基端连续缺失至多26个氨基酸残基；优选TGF-βRII胞外结构域序列在氨基端连续缺失14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25或26个氨基酸残基；
更优选地，所述TGF-βRIIECD的序列如SEQIDNO：14、15、16或17所示；优选如SEQIDNO：15所示。


根据权利要求11至13任一项所述的药物组合物，其中所述的PD-L1抗体或其抗原结合片段包含：
(A)分别如SEQIDNO:1、SEQIDNO:2和SEQIDNO:3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和
分别如SEQIDNO:4、SEQIDNO:5...

【专利技术属性】
技术研发人员：田晨敏，李皓，刘洵，
申请(专利权)人：江苏恒瑞医药股份有限公司，上海恒瑞医药有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32