一对同分异构体、其制备方法及应用技术

本发明专利技术公开一对同分异构体、其制备方法及其应用，该对同分异构体的化学结构如式（I）和（II）所示：

【技术实现步骤摘要】
一对同分异构体、其制备方法及应用
本专利技术属于医药化工，生物检测领域。具体涉及一对同分异构体、其制备方法及应用。
技术介绍
脂滴的核心是由中性脂肪组成，主要包括甘油三酯和胆固醇酯，核心外有一层单层磷脂分子及各种蛋白包裹。其中的磷脂分子主要是磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺，其次为磷脂酰肌醇。脂滴与其它细胞器相互作用，可能在脂类代谢与存储、膜转运、蛋白降解，以及信号传导过程中起着重要的作用。另外，研究还表明，多种代谢性疾病，如肥胖、脂肪肝、心血管疾病及糖尿病、中性脂贮存性疾病有关。商品化的脂滴荧光探针如尼罗红和Bodipy等，对脂滴的识别特异性不强、斯托克斯位移小、光稳定性差、有背景噪声等缺点。为克服以上缺点，因此，设计一种制备简单，灵敏度高、选择性高、响应速度快的脂滴探针对脂滴在生物体内的分布以及功能研究具有重要的意义。黏度也可以称为粘度，是指流体对流动所表现的阻力。当流体(气体或液体)流动时，一部分在另一部分上面流动时，就受到阻力，这是流体的内摩擦力。要使流体流动就需在流体流动方向上加一切线力以对抗阻力作用。传统的黏度探针应用于材料后荧光强度低、稳定性差、荧光寿命短等缺点，因此开发出一种高灵敏度、高稳定性、响应速度快、荧光寿命长的黏度探针对黏度检测具有一定的意义。乙酰胆碱酯酶（简写为AChE），是生物神经传导中的一种关键性酶，主要存在于胆碱能神经细胞的突触间隙中，该酶能降解神经递质乙酰胆碱，终止乙酰胆碱对突触后膜的兴奋作用，保证神经信号在生物体内的正常传递。阿尔茨海默症俗称老年痴呆，是一种在老人群体中十分常见的疾病，目前临床上的治疗药物主要是AChE抑制剂，如多奈哌齐，卡巴拉汀，加兰他敏等，这些药物能够制AChE对乙酰胆碱的水解，提高患者脑内神经递质乙酰胆碱的水平，因此可以改善患者的记忆认知功能。哺乳动物中还存在另外一种胆碱酯酶，与AChE结构十分相似，称为丁酰胆碱酯酶（简写为BChE），能够水解丁酰胆碱，但它主要存在于外周系统。许多文献报道的化合物对AChE和BChE的抑制作用没有选择性，因此会对外周系统产生毒副作用。开发新的选择性抑制AChE的化合物对阿尔兹海默症的治疗具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术首要目的是提供一对同分异构体，具有脂滴定位、黏度检测或抑制乙酰胆碱酯酶的活性。本专利技术的另一目的是提供一种上述同分异构体的制备方法。本专利技术目的之三是提供上述同分异构体在脂滴检测、黏度、抑制乙酰胆碱酯酶活性中的应用。基于上述目的，本专利技术通过以下技术方案实现：一对可检测脂滴、检测黏度、抑制乙酰胆碱酯酶的同分异构体，所述同分异构体的化学结构如式（I）（II）所示：（I）（II）。所述的同分异构体的制备方法，包括以下制备步骤：将（E）-2-（2-（（Z）-1,3,3-三甲基吲哚-2-亚乙基）亚乙基）呋喃[2,3-b]喹啉-3,4（2H，9H）-二酮、硫酸二乙酯、无水碳酸盐及有机溶剂混合，加热反应后，过滤得滤液，滤饼用氯仿洗涤，合并溶液蒸干，加入冰水，氯仿萃取，有机相干燥，浓缩有机相，用柱层析分离后，即可得到所述的同分异构体，无水碳酸盐为无水碳酸钾或无水碳酸钠。所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、二氯甲烷、三氯甲烷、乙腈、丙酮、乙酸乙酯或N,N-二甲基甲酰胺。所述的（E）-2-（2-（（Z）-1,3,3-三甲基吲哚-2-亚乙基）亚乙基）呋喃[2,3-b]喹啉-3,4（2H，9H）-二酮、硫酸二乙酯、无水碳酸盐摩尔比为1:（1~2）:（1~3）。同分异构体（I）柱层析时采用石油醚/乙酸乙酯=2:1（体积比）进行洗脱，同分异构体（II）用CHCl3:MeOH=200:1（体积比）进行洗脱，先洗脱同分异构体（I），再洗脱同分异构体（II）。上述的加热温度为40℃~80℃。所述的式（I）所示的化合物在制备用于生物细胞内脂滴检测的探针中的应用，所述细胞为SH-SY5Y或Hela细胞。式（II）所示的化合物在制备黏度检测剂中的应用，黏度是指甘油-水体系中的黏度。式（II）所示的化合物在高分子材料中作为荧光探针的应用，优选地，高分子材料为环氧树脂。式（II）所示的化合物在制备乙酰胆碱酯酶抑制剂中的应用。本专利技术的制备方法及产物具有如下优点：1.本专利技术的反应步骤简单、只需一步便可得到两个化合物，且后处理方法简便，产率高。2.本专利技术的同分异构体（I）能够进入细胞并用于脂滴检测，响应迅速，背景干扰少。3.本专利技术的同分异构体（II）不能进入细胞，可用于溶液的黏度检测，灵敏度高、荧光性质稳定。制备成高分子材料后，在365nm下连续照射72小时荧光强度损失小于5%。4.本专利技术的同分异构体（II）对AChE抑制活性是市售药物卡巴拉汀的27倍，且对AChE的抑制选择性远高于BChE。附图说明图1是本专利技术同分异构体（I）和（II）的合成路线；图2是本专利技术所述的同分异构体（I）的1HNMR图；图3是本专利技术所述的同分异构体（I）的13CNMR图；图4是本专利技术所述的同分异构体（II）的1HNMR图；图5是本专利技术所述的同分异构体（II）的13CNMR图；图6实施例1所得同分异构体（I）对SH-SY5Y和Hela细胞内脂滴的荧光响应图像，商用染料尼罗红作为对比；图7是实施例1所得同分异构体（II）的在不同比例的水-甘油体系中的荧光光谱图；图8是实施例1所得同分异构体（II）的对水-甘油体系中甘油比例响应的荧光变化倍数图；图9是实施例1所得同分异构体（II）应用于水晶滴胶（环氧树脂）后经365nm紫外灯连续照射72小时后的荧光变化图；图10是实施例1所得同分异构体（II）应用于水晶滴胶（环氧树脂）后经365nm紫外灯连续照射72小时后，最大荧光发射波长（521nm）强度的变化图；图11是实施例1所得同分异构体（II）在小鼠水迷宫实验中，小鼠找到平台的平均时间，卡巴拉汀作为对照药。具体实施方式下面结合实施例及附图对本专利技术作进一步的描述，但本专利技术的实施方式不限于此。核磁谱图采用美国BrukerAV-300型核磁共振仪测定，氘代DMSO作溶剂，荧光光谱采用美国Agilent公司荧光分光光度计，紫外光谱采用北京莱伯泰科仪器有限公司UV9100A紫外分光光度计。其他参数参照常规仪器设置即可。实施例1同分异构体（I）和（II），如图1所示，其合成步骤如下：将（E）-2-（2-（（Z）-1,3,3-三甲基吲哚-2-亚乙基）亚乙基）呋喃[2,3-b]喹啉-3,4（2H，9H）-二酮（384mg，1.0mmol）和无水K2CO3（207mg,1.5mmol）加入到30mL的无水DMF中，搅拌下用恒压滴液漏斗滴加含有硫酸二乙酯（231mg，1.5mmol）的DMF溶液10mL。滴加完毕，升温至60℃搅拌反应30分钟。反应完成，过滤得滤液，滤饼用氯仿洗涤三次，每次10mL。合并溶液并蒸干，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一对同分异构体，其特征在于，所述同分异构体的化学结构如式（I）和（II）所示：/n

【技术特征摘要】
1.一对同分异构体，其特征在于，所述同分异构体的化学结构如式（I）和（II）所示：




（I）（II）。


2.权利要求1所述的同分异构体的制备方法，其特征在于，包括以下制备步骤：将（E）-2-（2-（（Z）-1,3,3-三甲基吲哚-2-亚乙基）亚乙基）呋喃[2,3-b]喹啉-3,4（2H，9H）-二酮、硫酸二乙酯、无水碳酸盐及有机溶剂混合，加热搅拌反应后，浓缩有机相，经分离提纯即可得式（I）和（II）所述化合物，所述无水碳酸盐为无水碳酸钾或无水碳酸钠。


3.根据权利要求2所述的同分异构体的制备方法，其特征在于，所述的有机溶剂选自甲醇、乙醇、二氯甲烷、三氯甲烷、乙腈、丙酮、乙酸乙酯或N,N-二甲基甲酰胺，所述的（E）-2-（2-（（Z）-1,3,3-三甲基吲哚-2-亚乙基）亚乙基）呋喃[2,3-b]喹啉-3,4（2H，9H）-二酮、硫酸二乙酯、无水碳酸盐摩尔比为1:（1~2）:（1~3...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗稳，李景华，黄抗，龚慧媛，赵永梅，
申请(专利权)人：河南大学，
类型：发明
国别省市：河南;41