一种治疗宫颈癌的药物及其制备制造技术

本发明专利技术公开了一种治疗宫颈癌的药物，其包含平菇多糖硒苷‑Ⅲ；其为平菇菌粉中提取、纯化得到。研究发现，平菇多糖硒苷‑Ⅲ对宫颈癌细胞有强烈抑制作用，同时不损伤正常细胞。因而所述的平菇多糖硒苷‑Ⅲ可作为一种宫颈癌治疗或辅助治疗的药物或辅助药物，具备广阔的应用空间和社会价值。

A drug for treating cervical cancer and its preparation

【技术实现步骤摘要】
一种治疗宫颈癌的药物及其制备
本专利技术涉及一种治疗宫颈癌的潜在药物，尤其涉及一种高硒含量的多糖硒苷-Ⅲ。技术背景宫颈癌是一种上皮性恶性肿瘤，已成为女性恶性肿瘤中发病率第二高的恶性肿瘤。我国单是2015年一年间，新发现宫颈癌病人便将近十万人，超过三万人死于宫颈癌，且发病率呈上升趋势，严重危害着女性的健康和影响着女性的生活质量。目前宫颈癌的主要治疗手段是手术、化疗和放疗。化疗作为相对保守的治疗手段，是手术治疗、放疗后的协同治疗手段，且对中晚期常是基本治疗手段。如顺铂、紫杉醇等化疗药物表现出强大的癌细胞抑制作用，但同时对正常组织细胞也有不容忽视的杀伤作用，寻求副作用更低的治疗药物或是辅助治疗物质有着明显市场和社会意义。
技术实现思路
为实现治疗或辅助治疗宫颈癌，本专利技术的第一目的在于提供一种能高灵敏性抑制宫颈癌细胞生长、对正常细胞无损伤作用的治疗宫颈癌的药物。本专利技术第二目的在于，提供了一种菇多糖硒苷-Ⅲ在制备治疗宫颈癌的药物中的应用。现有技术披露了一些平菇多糖硒苷的提取方式以及在抗氧化方面的作用，但现有技术中很少涉及平菇多糖硒苷在抗肿瘤方面的作用。事实上，本专利技术研究发现，从平菇中提取的平菇粗多糖(多种活性成分的混合物)基本不具备抗癌活性。然而，在获知平菇粗多糖不具备抗癌活性的研究背景下，行业内没有动机从其中筛查出抗癌成分，然而，本专利技术人仍通过深入研究，意外地发现，从所述的平菇粗多糖分离得到的平菇多糖硒苷-Ⅲ出人意料地具有良好的抗癌活性，甚至还对正常细胞具有良好的促代谢，促修复增殖功效，故提供以下技术方案：一种治疗宫颈癌的药物，其包含平菇多糖硒苷-Ⅲ；所述的平菇多糖硒苷-Ⅲ为修饰有有机硒的杂多糖化合物(多糖化合物)；该杂多糖化合物为包含葡萄糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、木糖、氨基葡萄糖、岩藻糖、阿拉伯糖、核糖和鼠李糖中的糖单元(单糖)通过糖苷键连接得到；水解后的杂多糖化合物中，葡萄糖含量超过80％，半乳糖、甘露糖、葡萄糖醛酸含量为超过1％；半乳糖醛酸、木糖、氨基葡萄糖、岩藻糖、阿拉伯糖、核糖和鼠李糖各自含量不高于1％；优选地，水解后的杂多糖化合物中，葡萄糖含量为82～84％，半乳糖含量为3～5％、甘露糖含量为2.5～3.5％、葡萄糖醛酸含量为1～2％；半乳糖醛酸、木糖、氨基葡萄糖、岩藻糖、阿拉伯糖、核糖和鼠李糖各自含量低于1％。本专利技术所述的抗宫颈癌细胞活性物质是从平菇粗多糖(各成分的混合物)中分离得到的成分，其水解后的单糖包含葡萄糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、木糖、氨基葡萄糖、岩藻糖、阿拉伯糖、核糖和鼠李糖。本专利技术研究发现，所述的平菇多糖硒苷-Ⅲ具有优异的抗癌活性，不仅如此，不但不会损伤正常细胞，还能够促进正常细胞的新陈代谢，改善正常细胞的修复和增殖。对于大部分已上市的抗癌药物而言，在治疗的过程中其在抑杀癌细胞的同时，对正常细胞也会造成一定的伤害。然而，本专利技术人通过对平菇多糖硒苷-Ⅲ的深入研究，发现平菇多糖硒苷-Ⅲ对卵巢癌细胞具有较强的抑杀效果，对正常细胞却没有明显损伤，反而促进正常细胞的新陈代谢，有利于正常细胞的修复和增殖生长，避免在治疗过程中带来的毒副作用。经过单糖组分分析显示，所述的平菇多糖硒苷-Ⅲ水解后的葡萄糖含量超过80％，半乳糖、甘露糖、葡萄糖醛酸含量超过1％，而该单糖组成与现有的平菇来源的多糖或多糖衍生物均有明显差别，表明所述的平菇多糖硒苷-Ⅲ是新获取的物质。作为优选，所述的平菇多糖硒苷-Ⅲ抗癌活性成分，分子量为13000～18000。本专利技术所述的平菇多糖硒苷-Ⅲ分子量经过GPC测量，其具有较窄的分布宽度，表明提取的平菇多糖硒苷纯度高、质量均一可控(如图2所示)，这为平菇多糖硒苷-Ⅲ在宫颈癌治疗或辅助治疗的临床前研究及临床应用提供更为有利的条件。优选地，所述的有机硒通过Se＝O和Se-C-O修饰在所述的多糖化合物中。优选地，所述的平菇多糖硒苷-Ⅲ硒含量大于25μg/g(每克平菇多糖硒苷-Ⅲ的硒含量大于25μg)；所述的硒以Se＝O和Se-C-O的形式与多糖结合。所述的平菇多糖硒苷-Ⅲ有很高的硒含量，经测定达到25μg/g以上(通过荧光光度计测定，如图5所示)，有助于改善宫颈癌的治疗或辅助效果。本专利技术还提供了所述的平菇多糖硒苷-Ⅲ获得步骤，为将粗多糖经纤维素交换柱进行分离处理，分离过程包括依次进行的蒸馏水洗脱、0.05～0.15mol/L的氯化钠溶液洗脱、0.25～0.35mol/L的氯化钠溶液洗脱和0.45～0.55mol/L的氯化钠溶液洗脱过程；收集0.25～0.35mol/L的氯化钠溶液的洗脱液为目标洗脱液，并进行脱盐、浓缩处理，葡聚糖凝胶色谱柱纯化，即得。本专利技术所述的制备方法，通过所述的特殊的洗脱机制，可以出人意料地获得纯的平菇多糖硒苷-Ⅲ。进一步实验证明，平菇多糖硒苷-Ⅲ是一种具有优异抗癌活性，且利于正常细胞新陈代谢增殖的抗癌活性成分。作为优选，所述的粗多糖由富硒平菇粉经醇水溶液脱脂、水提、醇沉、脱蛋白得到。作为优选，富硒平菇粉为在包含亚硒酸钠基料中种植得到的平菇的干燥粉料。其可采用现有方法获得，例如，采用在现有平菇粉培育的基质中添加亚硒酸钠基料，从而获得富硒平菇。所述的醇水溶液脱脂过程的条件为：醇-水溶液为乙醇水溶液，且乙醇的体积含量为75～85％；回流脱脂；醇水溶液脱脂后进行固液分离，将沉淀在水中分散提取；所述的水提的温度为80～90℃；水提获得提取液，经浓缩后再加入乙醇中，进行醇沉，固液分离得到醇沉物；将醇沉物进行脱蛋白处理，即得粗多糖。所述的纤维素交换柱为DEAE-52纤维素离子交换柱。优选地，采用透析手段对目标洗脱液进行脱盐处理。作为优选，目标洗脱液脱盐后，再选用G-100葡聚糖柱进一步纯化。本专利技术所述的治疗宫颈癌的药物，为能特异性使宫颈癌Hela细胞凋亡的药物。所述的对宫颈癌细胞有明显抑制作用是以宫颈癌Hela细胞株为研究细胞，以CCK-8法测试得对宫颈癌Hela细胞株有超过40％的抑制效果；本专利技术所用的是典型宫颈癌细胞Hela细胞系作为模型研究，对Hela细胞超过40％的抑制作用且对正常细胞无抑制作用，这强烈表明了平菇多糖硒苷-Ⅲ具有应用于宫颈癌治疗或辅助治疗的潜能。CCK-8法由于测试时间更短、不需应用DMSO溶出等原因，其测试结果较MTT等其他方法有更强的可靠性。所述的治疗宫颈癌的药物，为能特异性使宫颈癌Hela细胞凋亡，且不影响甚至利于正常宫颈细胞增殖的治疗宫颈癌的药物。本专利技术还研究了该药物对正常细胞的作用，结果发现，其并不会促使正常细胞凋亡，甚至还有助于促进正常细胞代谢增殖。本专利技术所述的治疗宫颈癌的药物，还包含药学上可接受的辅料。进一步优选，所述的治疗宫颈癌的药物，可以为药学上可接受的任意治疗宫颈癌的药物剂型；例如口服制剂或注射制剂。口服制剂或外用制剂常用的赋形剂或辅料包括但不仅限于填充剂、稀释剂、润滑剂、分散剂、湿润剂、粘合剂、调节剂、增溶剂、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种治疗宫颈癌的药物，其特征在于，其包含平菇多糖硒苷-Ⅲ；/n平菇多糖硒苷-Ⅲ为修饰有有机硒的杂多糖化合物；该杂多糖化合物为包含葡萄糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、木糖、氨基葡萄糖、岩藻糖、阿拉伯糖、核糖和鼠李糖中的糖单元通过糖苷键连接得到；/n水解后的杂多糖化合物中，葡萄糖含量超过80％，半乳糖、甘露糖、葡萄糖醛酸含量超过1％；半乳糖醛酸、木糖、氨基葡萄糖、岩藻糖、阿拉伯糖、核糖和鼠李糖各自含量不高于1％；/n优选地，水解后的杂多糖化合物中，葡萄糖含量为82～84％，半乳糖含量为3～5％、甘露糖含量为2.5～3.5％、葡萄糖醛酸含量为1～2％；半乳糖醛酸、木糖、氨基葡萄糖、岩藻糖、阿拉伯糖、核糖和鼠李糖各自含量不高于1％。/n

【技术特征摘要】
20191111 CN 20191109577991.一种治疗宫颈癌的药物，其特征在于，其包含平菇多糖硒苷-Ⅲ；
平菇多糖硒苷-Ⅲ为修饰有有机硒的杂多糖化合物；该杂多糖化合物为包含葡萄糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、木糖、氨基葡萄糖、岩藻糖、阿拉伯糖、核糖和鼠李糖中的糖单元通过糖苷键连接得到；
水解后的杂多糖化合物中，葡萄糖含量超过80％，半乳糖、甘露糖、葡萄糖醛酸含量超过1％；半乳糖醛酸、木糖、氨基葡萄糖、岩藻糖、阿拉伯糖、核糖和鼠李糖各自含量不高于1％；
优选地，水解后的杂多糖化合物中，葡萄糖含量为82～84％，半乳糖含量为3～5％、甘露糖含量为2.5～3.5％、葡萄糖醛酸含量为1～2％；半乳糖醛酸、木糖、氨基葡萄糖、岩藻糖、阿拉伯糖、核糖和鼠李糖各自含量不高于1％。


2.如权利要求1所述的治疗宫颈癌的药物，其特征在于，所述的平菇多糖硒苷-Ⅲ的分子量为13000～18000；
优选地，所述的有机硒通过Se＝O和Se-C-O修饰在所述的多糖化合物中。
优选地，硒含量大于25μg/g。


3.如权利要求1或2所述的治疗宫颈癌的药物，其特征在于，所述的平菇多糖硒苷-Ⅲ获得步骤为：将粗多糖经纤维素交换柱进行分离处理，分离过程包括依次进行的蒸馏水洗脱、0.05...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟世安，张卓敏，邓志伟，张云山，刘慧，邓丙之，沈剑，杨华君，
申请(专利权)人：湖南万臻生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43