NRK在肺癌治疗和预后诊断中的医药用途制造技术

本发明专利技术公开了NRK在肺癌治疗和预后诊断中的医药用途。具体是NRK在制备诊断肺癌预后的产品中的应用，在制备治疗肺癌的药品中的应用；以及NRK中和抗体在制备诊断肺癌的产品中的应用，在制备治疗肺癌的药品中的应用。本发明专利技术利用RNA‑seq和综合生物信息学方法对来自LUADⅠ、Ⅱ、Ⅲ期组织的CAFs和NFs进行分析，发现NRK在肺癌肿瘤相关成纤维细胞中特异表达，它可作为肺癌的临床诊断生物标记物，将能提供一个更好的诊断预后指标；LUAD相关CAFs中NRK显著升高，可将NRK作为LUAD联合治疗的靶点。

【技术实现步骤摘要】
NRK在肺癌治疗和预后诊断中的医药用途
本专利技术涉及生物医药
，具体而言，涉及NRK在肺癌治疗和预后诊断中的医药用途。
技术介绍
肺癌是世界范围内癌症死亡的主要原因。肺癌分为小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)，其中NSCLC占所有肺癌的85％。NSCLC主要分为腺癌(LUAD)、鳞状细胞癌(LUSC)和大细胞癌，LUAD是NSCLC的主要亚型，约占NSCLC的50％。尽管手术、化疗、靶向治疗和免疫治疗等临床治疗方法的迅速发展已经显著改善了包括LUAD在内的肺癌患者的预后，但由于耐药或反应不良，这些患者的预后仍然很差，5年平均生存率仅为15％。此外，大多数LUAD患者被诊断为晚期转移，随后迅速复发，这也限制了患者生存率。因此，迫切需要为LUAD治疗寻找新的治疗靶点和准确地预测患者预后，从而改善患者的预后。尽管癌症药物开发传统上侧重于以癌症为中心，但最近重点已转向肿瘤微环境(TME)以寻求新的治疗和预防策略，因为TME可能会促使肿瘤复发和治疗耐药。在TME的所有基质细胞群中，肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)是最丰富的，并且与癌症的发生和发展密切相关。有研究发现，CAFs可通过细胞间通讯调节癌细胞和其他基质细胞的生物学特性，通过释放细胞因子或趋化因子，重塑细胞外基质(ECM)或基底膜，调节信号通路和抗肿瘤免疫反应。因此，靶向CAFs可能通过重塑TME，减少免疫抑制发生而非直接杀伤癌细胞提供克服癌症的一条有效途径。事实上，多项临床前研究表明，CAFs可以被选为癌症治疗的新兴靶点，包括抗肿瘤免疫疗法。例如，含有FAP-α基因的重组腺病毒载体感染的树突状细胞可以诱导保护性抗肿瘤免疫，并延长免疫小鼠的总生存时间，提示FAP-α有可能成为靶向CAF和开发免疫原性肿瘤疫苗的潜在靶点。除了CAFs的直接消耗之外，维生素D和维生素A对CAFs的重编程，将促肿瘤CAFs的激活状态重置为静止状态，这在胰腺导管腺癌和结肠癌被关注。此外，CAFs分泌的成纤维细胞生长因子9(FGF9)促进了LUAD细胞的生长，在体内抑制成纤维细胞生长因子受体(FGFRs)导致肿瘤大小和数量显著减少，尽管还不足以完全消除肿瘤，但这为联合策略治疗肺癌提供了证据。值得注意的是，除了癌细胞外，靶向CAFs可能会增强抗肿瘤效果。例如，将奥沙利铂与小分子二肽基肽酶抑制剂PT-100(通过靶向成纤维细胞激活蛋白(FAP)来抑制CAFs相结合，可以改善化疗反应，减少免疫促肿瘤细胞的招募和小鼠结肠癌异种移植模型中的血管生成。然而，CAFs是一个异质的细胞群体，在实体恶性肿瘤中既起到肿瘤支持作用，又起到肿瘤抑制作用，这被认为是开发新的CAF靶向诊断和治疗的主要障碍。NRK(NIK相关激酶)是由x染色体中的NRK基因编码的蛋白激酶，属于生发中心激酶(GCK)亚家族，参与13种激活MAPK级联。其首先从小鼠中克隆NRK，并在小鼠胚胎发生过程中在骨骼肌中初步发现。这与大多数成纤维细胞的胚胎起源是一致的。NRK也有可能在人脑中表达。NRK(也称为NESK)是促进cofilin(一种必需的肌动蛋白调节蛋白)磷酸化和诱导肌动蛋白聚合的关键。此外，据报道，它通过调节AKT磷酸化来调节滋养层细胞的增殖和胎盘的发育。而且，NRK是银屑病患者真皮间充质干细胞(DMSCs)的高表达基因之一，调节外周血源性单核细胞(PBMCs)向DMSCs的迁移。最近研究发现，NRK在人血管中有很强的表达，并与基质金属蛋白酶(MMPs)和趋化因子(如MMP8、MMP12、CCL8、CXCL9)的诱导有关，表明NRK可能是动脉粥样硬化中的抗炎因子。除上述功能外，NRK与三阴性乳腺癌(TNBC)患者的生存呈正相关。怀孕期间NRK缺乏导致小鼠乳腺癌的触发。然而，NRK在其他组织或细胞、其底物中的表达以及调节其激酶活性和调节信号级联的机制尚未阐明。目前，也尚未发现NRK在肺癌治疗和预后诊断中的相关医药用途。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供NRK在肺癌治疗和预后诊断中的医药用途。一方面，本专利技术提供了NRK在制备诊断肺癌预后的产品中的应用。具体的，所述产品以NRK作为诊断标记物。更具体的，所述NRK的高表达预示肺腺癌患者预后不良。具体的，所述产品为实时荧光定量PCR检测试剂盒或诊断试纸。更具体的，所述实时荧光定量PCR检测试剂盒中含有检测用引物，其具体序列为：正向引物，5′-CAGCAGGTTCGGTCACTGATGTAG-3′；反向引物，5′-CAGCAGGTTCGGTCACTGATGTAG-3′。另一方面，本专利技术还提供了NRK在制备治疗肺癌的药品中的应用。具体的，所述药品以NRK作为治疗靶标。另一方面，本专利技术还提供了NRK中和抗体在制备诊断肺癌的产品中的应用。具体的，所述产品是诊断试纸或试剂盒，所述产品的诊断样品是肺分泌物或肺组织。具体的，所述产品以NRK中和抗体作为诊断标记物。另一方面，本专利技术还提供了NRK中和抗体在制备治疗肺癌的药品中的应用。本专利技术利用RNA-seq和综合生物信息学方法对来自LUADⅠ、Ⅱ、Ⅲ期组织的CAFs和NFs进行分析，发现NRK在肺癌肿瘤相关成纤维细胞中特异表达，它可作为肺癌的临床诊断生物标记物，将能提供一个更好的诊断预后指标；LUAD相关CAFs中NRK显著升高，可将NRK作为LUAD联合治疗的靶点。附图说明图1是CAFs和NFs的形态图。图2是CAFs、NFs和A549的表达。图3是IF实验和WB实验中CAFs、NFs和A549的表达。图4是CAFs和NFs的转录分析图。图5是DEGs火山图，其中红点(上方浅色灰点)代表650个上调基因，蓝点(下方深色黑点)代表1499个下调基因。图6是log2(Fc)热图。图7-图12是基因本体论(GO)分析，其中图7-图9分别为上调的DEGs的BP(生物学过程)、MF(分子功能)和CC(细胞成分)，图10-图12分别为下调的DEGs的BP、MF和CC。图13是上调DEGs的KEGG分析。图14是下调DEGs的KEGG分析。图15是RNA-Seq数据、LncRNA微阵列和ArrayExpress的公共数据集(E-MTAB-6149和E-MTAB-6653)中获得的重叠DEG，其中|Fc|>2、P值<0.05。图16是十个重叠DEGs基因的柱形图。图17是NRK在CAFs、NFs、BEAS-2B、A549和H1299中的表达水平。图18是NRK蛋白在CAFs、NFs、BEAS-2B、A549和H1299的WesternBlot表达结果。图19是NRK在CAF的胞核和胞浆、NFs的胞核和胞浆、BEAS-2B的胞核和胞浆、A549的胞核和胞浆和H1299的胞核和胞浆中的表达。图20是NRK表达热图。图21是NRK总生存图。具体实施方式为了能够更清楚地理解本发本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.NRK在制备诊断肺癌预后的产品中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.NRK在制备诊断肺癌预后的产品中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述产品以NRK作为诊断标记物。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述NRK的高表达预示肺腺癌患者预后不良。


4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述产品为实时荧光定量PCR检测试剂盒或诊断试纸。


5.NRK在制备治疗肺癌的药品中的应用。


...

【专利技术属性】
技术研发人员：阳洁，韦彤彤，宋锦静，莫孝成，黎骊，莫小香，沈小菊，陈罡，黄志广，
申请(专利权)人：广西医科大学，
类型：发明
国别省市：广西;45