MOF在肝癌治疗中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，尤其是涉及MOF在肝癌治疗中的应用。一种肝癌生物标志物，所述标志物是MOF基因/蛋白，所述MOF基因/蛋白在制备检测肝癌的试剂盒中的用途。MOF或MOF小分子激动剂在制备预防或治疗肝癌的药物及药物组合物中的应用。通过实验证明MOF可以抑制肝细胞肝癌生长和侵袭转移，MOF通过乙酰化雌激素受体第266，268，299位赖氨酸来抑制其多泛素化降解，维持雌激素受体蛋白稳定。MOF可以抑制肝细胞肝癌，制备MOF小分子激动剂以达到治疗临床肝细胞肝癌的功能。MOF在癌症发生发展过程中发挥抑制癌症进程的作用，且MOF在绝大多数肝细胞肝癌病人组织中表达都发生下调，针对MOF促进其表达可以有效抑制肝细胞肝癌。本发明专利技术为治疗肝癌提供了新思路、新靶点。

【技术实现步骤摘要】
MOF在肝癌治疗中的应用
本专利技术属于生物医药
，尤其是涉及MOF在肝癌治疗中的应用。
技术介绍
原发性肝癌包括肝细胞肝癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）（占病例的75％-85％）和肝内胆管癌（占病例的10％-15％）和其他罕见类型。每年大约有841,000例新病例，782,000例死亡病例。在世界大部分地区，男性的发病率和死亡率是女性的2到3倍。绝经后妇女肝癌的发生率增加，而雌激素治疗可以抑制这种现象。女性肝癌的预后要好于男性。以上临床结果都提示雌激素通路可能在HCC中发挥保护作用。目前HCC的主要治疗方法包括肝切除，肝移植以及辅助化疗和放疗，但由于频繁复发和肝内转移，其5年生存率仍然很差。目前，仅索拉非尼和Lenvatinib被批准作为一线药物治疗未切除的晚期HCC，但只能产生一定程度的生存获益。因此，需要确定新的治疗靶点以改善当前的HCC治疗。MOF（malesabsentonthefirst），也称为赖氨酸乙酰基转移酶8（KAT8），是MYST（moz-ybf2/sas3-sas2-tip60）家族的成员，在多种物种中具有高度保守的组蛋白乙酰基转移酶（HATs）结构域。除组蛋白乙酰化修饰外，MOF还可乙酰化非组蛋白，例如P53，FASN，LSD1，NoRC和IRF3。在许多原发癌组织中，MOF表达降低，包括肝癌，然而MOF在肝癌进展中的生物学功能及作用机制尚不明确。
技术实现思路
鉴于现有技术存在的问题，本专利技术的目的在于提供MOF在肝癌治疗中的应用。通过实验证明MOF可以抑制肝细胞肝癌生长和侵袭转移，MOF通过乙酰化雌激素受体第266、268、299位赖氨酸来抑制其多泛素化降解，维持雌激素受体蛋白稳定。MOF可以抑制肝细胞肝癌，制备MOF小分子激动剂以达到治疗临床肝细胞肝癌的功能。为了实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案。一种肝癌生物标志物，所述标志物是MOF基因/蛋白。MOF基因/蛋白在制备检测肝癌的试剂盒中的用途。一种用于肝癌检测或肝癌预后的试剂盒，所述试剂盒使用MOF基因/蛋白作为检测靶标。MOF或MOF小分子激动剂在制备预防或治疗肝癌的药物及药物组合物中的应用。所述MOF小分子激动剂选自：以MOF或其转录本为靶序列、且能够促进MOF表达或转录的干扰分子，包括：shRNA、小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸，或能表达或形成所述shRNA、小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸的构建物。所述MOF小分子激动剂为任何药物治疗学上可接受的的剂型。所述MOF小分子激动剂为任何药物治疗学上可接受的的剂量。所述药物组合物包括MOF或MOF小分子激动剂及与MOF或MOF小分子激动剂的其他药类以及药学上可接受的载体和/或辅料。所述shRNA序列如SEQIDNO.1-SEQIDNO.2所示。本专利技术的小分子激动剂可以通过本领域任何已知的方式配制药物组合物来使用。这种组合物包含活性成分，加上一种或多种药物可接受的载体、稀释剂、填充剂、结合剂及其它赋形剂，这依赖于给药方式及所设计的剂量形式。本领域枝术人员已知的治疗惰性的无机或有机的载体包括但不限于乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、植物油、蜡、脂肪、多羟基化合物例如聚乙二醇、水、蔗糖、乙醇、甘油，诸如此类，各种防腐剂、润滑剂、分散剂、矫味剂。保湿剐、抗氧化剂、甜味剂、着色剂、稳定剂、盐、缓冲液诸如此类也可加入其中，这些物质根据需要用于帮助配方的稳定性或有助于提高活性或它的生物有效性或在口服的情况下产生可接受的口感或气味，在这种组合物中可以使用的制剂可是其原始化合物本身的形式，或任选地使用其药物学可接受的盐的形式，本专利技术的小分子激动剂可以单独给药，或以各种组合给药，以及与其它治疗药剂一起结合形式给药。如此配制的组合物根据需要可选择本领域技术人员已知的任何适当的方式把激动剂进行给药。使用药物组合物时，是将安全有效量的本专利技术的抑制剂施用于人，其中口服安全有效量通常至少约100微克/千克体重。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。本专利技术的药物可根据需要制备成各种剂型。包括但不限于，经皮、粘膜、鼻、口颊、舌下或经口使用的片剂、溶液剂、颗粒剂、贴剂、膏剂、胶囊剂、气雾剂或栓剂。本专利技术的药物的施用途径不受限制，只要它能发挥期望的治疗效果或预防效果即可，包括但不限于静脉内，腹膜内，动脉内，口服，肌肉内，皮下的。在某些情况下，可以系统地给药。在某些情况下是局部地给药。本专利技术的药物的剂量不受限制，只要获得期望的治疗效果或者预防效果即可，可以依据症状、性别、年龄等来恰当的确定。本专利技术的治疗药物或预防药物的剂量可以使用例如对疾病的治疗效果或者预防效果作为指标来确定。与现有技术比，本专利技术有益效果如下。本专利技术首次发现MOF可以抑制肝细胞肝癌生长和侵袭转移，MOF通过乙酰化雌激素受体第266，268，299位赖氨酸来抑制其多泛素化降解，维持雌激素受体蛋白稳定。MOF在癌症发生发展过程中发挥抑制癌症进程的作用，且MOF在绝大多数肝细胞肝癌病人组织中表达都发生下调，针对MOF促进其表达可以有效抑制肝细胞肝癌。本专利技术为治疗肝癌提供了新思路、新靶点。附图说明图1是MOF的shRNA序列。图2是利用已构建好的MOF稳定敲低HCCLM3，HUH7细胞进行细胞存活实验结果，敲低MOF，HCC细胞存活能力变强。图3是利用已构建好的MOF稳定敲低HUH7细胞进行侵袭和迁移实验结果，敲低MOF，HCC细胞侵袭和迁移增多。图4是荷瘤小鼠实验结果，敲低MOF，肿瘤生长加快。具体实施方式下面结合附图和实施例对本专利技术作进一步详细的说明。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如教科书和实验指南中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件，为本领域普通技术人员熟知或易于获知，以下实施例仅为本专利技术的优选实施例，并不限制本专利技术，对于本领域的技术人员来说，本专利技术可以有各种更改和变化，凡在本专利技术的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。实施例1、激动剂的制备。根据MOF转录本或者氨基酸序列，设计MOF小分子激动剂。2、MOF及激动剂应用。（1）利用针对MOF的shRNA慢病毒载体感染肝细胞肝癌细胞系HCCLM3和HUH7，shRNA序列如图1所示。（2）如图2所示，利用已构建好的MOF稳定敲低HCCLM3，HUH7细胞进行细胞存活实验，结果显示MOF敲低细胞株生长明显变快。具体方法如：克隆形成实验，将2×103个细胞接种在6孔板中，加入10％去激素血清培养基，用E2或无水乙醇诱导培养一周以上，在形成明显的克隆点后，用4%多聚甲醛固定并用考马斯亮兰染料染色。生长曲线实验，将2×103个细胞铺在96孔板中，用E2或无水乙醇刺激，按规定时间在490nm本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肝癌生物标志物，其特征在于，所述标志物是MOF基因/蛋白。/n

【技术特征摘要】
1.一种肝癌生物标志物，其特征在于，所述标志物是MOF基因/蛋白。


2.MOF基因/蛋白在制备检测肝癌的试剂盒中的用途。


3.一种用于肝癌检测或肝癌预后的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒使用MOF基因/蛋白作为检测靶标。


4.MOF或MOF小分子激动剂在制备预防或治疗肝癌的药物及药物组合物中的应用。


5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述MOF小分子激动剂选自：以MOF或其转录本为靶序列、且能够促进MOF表达或转录的干扰分子，包括：shRNA、小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸，或能表达或形成所述shRN...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵越，王春玉，尉姗，王胜利，邹仁龙，孙洪邈，林琳，曾凯，
申请(专利权)人：中国医科大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21