一种α-L-岩藻糖苷酶的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种α‑L‑岩藻糖苷酶的制备方法。其特征为如下(a)或(b)或(c)或(d)：(a)其氨基酸序列为SEQ ID NO：1所示，且具有α‑L‑岩藻糖苷酶的活性(EC 3.2.1.51)；(b)其氨基酸序列与(a)有70％及以上的同源性；(c)其核酸序列为SEQ ID NO：2或编码的氨基酸序列为(a)的核酸序列；(d)其核酸序列编码的氨基酸序列与(a)有70％及以上的同源性。本发明专利技术采用大肠杆菌表达系统，经过表达条件和纯化条件的优化，以最短的生产周期，获得低成本、高纯度、高产量、高稳定性和重复性的活性α‑L‑岩藻糖苷酶，具有非常广阔的市场应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种α-L-岩藻糖苷酶的制备方法
本专利技术涉及分子生物学、生物化学、基因工程领域，具体涉及一种α-L-岩藻糖苷酶的制备方法。
技术介绍
生物体内的很多蛋白质和脂类都有糖基化修饰，这些用作修饰的寡聚糖不仅参与调控被修饰的蛋白质和脂类的结构稳定性，而且参与调控细胞内的各项功能和细胞间的相互作用。糖苷水解酶(EC3.2.1)是一类能够水解糖苷键的酶，能够对这些寡聚糖进行剪切和修饰，从而改变它们的调控作用。根据底物特异性不同，糖苷水解酶可分为195种(EC3.2.1.1-EC3.2.1.195)。α-L-岩藻糖苷酶已经从很多微生物、植物、软体动物以及哺乳动物中提取出来。根据功能不同，可分为α-L-岩藻糖苷水解酶(EC3.2.1.51)和α-L-岩藻糖基转移酶[α-(1→2)(EC3.2.1.63)，α-(1→3,4)(EC3.2.1.111)，α-(1→6)(EC3.2.1.127)]。根据氨基酸序列相似性不同，在碳水化合物-活性酶(Carbohydrate-ActiveEnzymes,CAZy)数据库中，可分为GH29和GH95两个家族。A本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有活性的α-L-岩藻糖苷酶(EC 3.2.1.51)，其特征为如下(a)或(b)或(c)或(d)：/n(a)其氨基酸序列为SEQ ID NO：1所示，且具有α-L-岩藻糖苷酶的活性(EC 3.2.1.51)；/n(b)其氨基酸序列与(a)有70％及以上的同源性；/n(c)其核酸序列为SEQ ID NO：2或编码的氨基酸序列为(a)的核酸序列；/n(d)其核酸序列编码的氨基酸序列与(a)有70％及以上的同源性。/n

【技术特征摘要】
1.一种具有活性的α-L-岩藻糖苷酶(EC3.2.1.51)，其特征为如下(a)或(b)或(c)或(d)：
(a)其氨基酸序列为SEQIDNO：1所示，且具有α-L-岩藻糖苷酶的活性(EC3.2.1.51)；
(b)其氨基酸序列与(a)有70％及以上的同源性；
(c)其核酸序列为SEQIDNO：2或编码的氨基酸序列为(a)的核酸序列；
(d)其核酸序列编码的氨基酸序列与(a)有70％及以上的同源性。


2.用于蛋白表达的pET系列载体，其特征在于含有权利要求1所述的基因核酸序列或表达的蛋白产物含有权利要求1所述的氨基酸序列。


3.用于蛋白表达的大肠杆菌菌株，包括但不限于BL21(DE3)、BL21(DE3)pLysS、Rosetta(DE3)、RosettagamiB、JM109，其特征在于含有权利要求2所述的载体。


4.用于蛋白表达的大肠杆菌菌株，包括但不限于BL21(DE3)、BL21(DE3)pLysS、Rosetta(DE3)、Roset...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘迎，朱成伟，侯爽，
申请(专利权)人：海丰生物科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11