一种环瓜氨酸肽双微球偶联物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种环瓜氨酸肽双微球偶联物及其制备方法与应用，所述方法包括将羧基胶乳微球和氨基微球与环瓜氨酸肽连接，形成氨基微球‑环瓜氨酸肽‑羧基微球偶联物。本发明专利技术利用两个粒径接近的微球，先使用羧基微球，再使用氨基微球与CPP抗原进行偶联，以提升检测试剂的灵敏度，同时，可以保持较好的检测线性范围；本发明专利技术方法制备的试剂具有较好的稳定性，且试剂的制备工艺简单。

【技术实现步骤摘要】
一种环瓜氨酸肽双微球偶联物及其制备方法与应用
本专利技术涉及生物
，具体涉及一种环瓜氨酸肽双微球偶联物及其制备方法与应用。
技术介绍
RA是最常见的关节炎症性疾病，发达国家成人的发病率是1～2％，病因不明，可发生在任何年龄，但常见35-55岁女性发病，RA属于慢性疾病，以阶段性发着与缓解交替为特征。抗-CCP抗体被发现可用于类风湿关节炎的早期诊断，并对RA病人的关节侵害和放射学损伤具有一定的预测价值。抗CCP抗体可以在RA病人出现明显的关节损伤之前被检测出。一项前瞻性群组研究显示，在没有出现明显的RA临床症状的抗CCP阳性的病人中，约有93％的病人会发展成RA，表明该抗体有非常好的阳性预期值。目前，测定抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体常用的方法有免疫层析法、ELISA法、化学发光法、胶乳免疫比浊法等。其中，免疫层析法检测速度快，但其准确度和重复性不佳；ELISA法操作繁琐，检测时间长；化学发光法检测的准确度和重复性好，但耗时而且价格昂贵，对设备的要求较高；胶乳免疫比浊法操作简单、使用方便，但现有的免疫比浊法检测试剂盒存在灵敏度和本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种环瓜氨酸肽双微球偶联物的制备方法，其特征在于，所述方法包括将羧基胶乳微球和氨基微球与环瓜氨酸肽连接，形成氨基微球-环瓜氨酸肽-羧基微球偶联物。/n

【技术特征摘要】
1.一种环瓜氨酸肽双微球偶联物的制备方法，其特征在于，所述方法包括将羧基胶乳微球和氨基微球与环瓜氨酸肽连接，形成氨基微球-环瓜氨酸肽-羧基微球偶联物。


2.如权利要求1所述的环瓜氨酸肽双微球偶联物的制备方法，其特征在于，
所述羧基微球与所述环瓜氨酸肽连接过程为：
将活化后的羧基微球与0.05MMOPS缓冲液稀释的环瓜氨酸肽溶液混合均匀，室温搅拌0.5h，得到羧基微球与环瓜氨酸肽偶联物；
其中，所述羧基微球为聚苯乙烯胶乳微球。


3.如权利要求2所述的环瓜氨酸肽双微球偶联物的制备方法，其特征在于，
所述聚苯乙烯胶乳微球的活化方法为：
在20mL0.05MMES缓冲液中加入1mL直径为120nm的10％聚苯乙烯胶乳微球，再加入5mL浓度为1mg/mL碳化二亚胺水溶液，室温搅拌30min，得到活化后的聚苯乙烯胶乳微球。


4.如权利要求2所述的环瓜氨酸肽双微球偶联物的制备方法，其特征在于，
所述羧基微球与环瓜氨酸肽偶联物加入到氨基微球溶液中均匀混合，搅拌，得到含氨基微球-环瓜氨酸肽-羧基微球偶联物的溶液。

【专利技术属性】
技术研发人员：石怀兴，温志国，
申请(专利权)人：海丰生物科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11