一种富含产己酸菌营养液及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种富含产己酸菌营养液及其制备方法和应用，通过先活化后富集的两段式发酵，实现了在短时间内制备富含己酸菌和高产己酸的多菌种复合菌液，为改善白酒品质提供了一种新策略。将上述富含产己酸菌液用于人工窖泥老熟，可以减少老窖泥的使用量或代替老窖泥，实现新窖泥中产己酸菌在短期内大量富集，同时丰富其它有益菌(如梭菌)的组成，说明该方法能够保持窖泥群落中功能菌群的物种和代谢途径的多样性，增加这一人工富集群落在实际应用中的群落结构的稳定性。将上述富含产己酸菌液用于白酒酿造，可以提高白酒中酸类和酯类物质含量，尤其是己酸和己酸乙酯，显著改善白酒的风味品质，特别是有助于提高新窖池的优级酒产率。

【技术实现步骤摘要】
一种富含产己酸菌营养液及其制备方法和应用
本专利技术属于酿酒生产
，具体涉及一种富含产己酸菌营养液及其制备方法和应用，尤其适用于泸型酒生产。
技术介绍
浓香型白酒，又称泸型酒，泥窖生香发酵是其典型的酿造方式。窖泥为酿酒微生物提供了特殊的栖息环境，在经过多年连续多轮次的白酒酿造后窖泥呈现出“自然老熟”，其中的微生物经长期生产驯化形成了独特而稳定的群落结构，它们的代谢产物赋予了泸型酒特有的风味，因而业界素有“酒好全凭窖池老”的说法。窖泥微生物以细菌为主，随着窖龄的增长和品质的提高，以产己酸菌属为代表的梭菌类群丰度显著增加，它们是优质老窖泥的代表性微生物，亦是窖泥中的主要产己酸功能菌。己酸及其衍生物己酸乙酯是泸型酒的代表性风味物质，因而，为快速提高新窖泥菌群中的产己酸菌群丰度，保障新窖池的产酒品质，人工窖泥培养过程中通常会接种优质老窖泥来提供窖泥老熟所需的微生物，但由于优质窖泥(尤其是老窖龄窖泥)的稀缺性，以及近年来我国泸型酒产业规模的扩大，有限的优质窖泥接种量无法满足生产需求，限制了泸型酒产业的稳步发展。
技术实现思路
针对上述泸型酒生产中亟待解决的难题，在通过分子微生态手段明确优质老窖泥的特征功能菌群及其底物偏好性基础上，本专利技术提供一种富含产己酸菌营养液及其制备方法和应用，开发并建立了一种产己酸菌快速定向富集的连续补料驯化方法，实现了在短时间内制备富含产己酸菌的营养液，为改善泸型酒品质提供了一种新策略。作为本专利技术的第一个方面，提供一种富含产己酸菌营养液的制备方法，包括以下步骤：(1)活化培养基配置：每1L培养基中含有葡萄糖5.0-10.0g,CaCl2·2H2O0.05-0.10g,NH4Cl0.10-1.0g,MgSO4·7H2O0.10-1.0g,K2HPO4·3H2O0.10-1.5g,NaCl0.10-0.8g,FeSO4·7H2O0.002-0.08g,胰蛋白胨1.0-5.0g,黄水10-50mL；(2)接种：将配置的活化培养基放入发酵罐中，并按5％-15％重量比接种窖泥；(3)活化培养：发酵罐中通入氮气以去除氧气，密封发酵罐以维持厌氧环境，出气管道置入水中保持发酵罐内外气体压强平衡，全混式搅拌培养对窖泥中的微生物进行活化，发酵温度控制在25℃-37℃，连续补加活化培养基，培养5-10天后得到活化窖泥种子菌液；(4)富集培养基配置：每1L培养基中含有乳酸钠和乙酸钠5.0-10.0g,CaCl2·2H2O0.05-0.10g,NH4Cl0.10-1.0g,MgSO4·7H2O0.10-1.0g,K2HPO4·3H2O0.10-1.5g,NaCl0.10-0.8g,FeSO4·7H2O0.002-0.08g,胰蛋白胨1.0-5.0g,微量元素溶液0.1-0.5g；(5)接种：将配置的富集培养基放入发酵罐中，并按5％-15％重量比接种步骤(3)中培养得到的活化窖泥种子菌液；(6)富集培养：发酵罐中通入氮气以去除氧气，密封发酵罐以维持厌氧环境，出气管道置入水中保持发酵罐内外气体压强平衡，全混式搅拌培养对窖泥中的微生物进行富集，发酵温度控制在25℃-37℃，连续补加富集培养基，培养10-15天后得到富含产己酸菌营养液；优选地，步骤(2)中接种的窖泥是低质量窖泥或新窖窖泥；需要说明的是，低质量窖泥或新窖窖泥是指所含菌群组成为己酸菌(包括产己酸菌属、梭菌属等微生物)的丰度占比低于5％；优选地，步骤(3)中以稀释率为0.02-0.2/天的速度连续补加同量的活化培养基；优选的，步骤(4)中乳酸钠和乙酸钠的比例为1:0-0:1；优选地，步骤(6)中以稀释率为0.02-0.2/天的速度连续补加同量的富集培养基；作为本专利技术的第二个方面，提供一种富含产己酸菌营养液，是由上述方法所制得的。作为本专利技术的第三个方面，提供一种上述富含产己酸菌营养液在窖泥中的应用，按照0.4-1.0L/m3均匀喷洒到白酒酿造窖池内，用于养护窖泥。还可以将富含产己酸菌营养液离心后，将沉淀部分按照5％-20％的重量比例添加至人工窖泥中，用于优化窖泥。本专利技术的有益效果：1.将上述富含产己酸菌液用于人工窖泥老熟，可以减少老窖泥的使用量或代替老窖泥，在短期内(10-15天)实现低质量窖泥中己酸菌丰度占比提高至20％以上，同时丰富其它有益菌(如丁酸菌)的组成，说明该方法能够保持窖泥群落中功能菌群的物种和代谢途径的多样性，增加这一人工富集群落在实际应用中的群落结构的稳定性。2.将上述富含产己酸菌营养液用于白酒酿造，可以提高白酒中酸类和酯类物质含量，尤其是己酸和己酸乙酯，显著改善白酒的风味品质，特别是有助于提高新窖池的优级酒产率。具体实施方式下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。以下结合具体实施例对本专利技术作进一步说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限制本专利技术。实施例1(1)活化培养基配置：1L培养基中含有葡萄糖5.0g,CaCl2·2H2O0.05g,NH4Cl0.40g,MgSO4·7H2O0.40g,K2HPO4·3H2O0.50g,NaCl0.40g,FeSO4·7H2O0.002g,胰蛋白胨1.0g,黄水15mL；(2)接种：将配置的活化培养基放入发酵罐中，并按15％重量比接种新窖窖泥；(3)活化培养：发酵罐中通入氮气以去除氧气，密封发酵罐以维持厌氧环境，出气管道置入水中保持发酵罐内外气体压强平衡，全混式搅拌培养对窖泥中的微生物进行活化，发酵温度控制在25℃，以稀释率为0.02/天的速度连续补加同量的活化培养基，培养5天后得到活化窖泥种子菌液；(4)富集培养基配置：每1L培养基中含有乳酸钠和乙酸钠5.0g,乳酸钠：乙酸钠的比例为1:0，CaCl2·2H2O0.05g,NH4Cl0.40g,MgSO4·7H2O0.40g,K2HPO4·3H2O0.50g,NaCl0.40g,FeSO4·7H2O0.002g,胰蛋白胨1.0g,微量元素溶液0.1g；(5)接种：将配置的富集培养基放入发酵罐中，并按15％重量比接种步骤(3)中培养得到的活化窖泥种子菌液；(6)富集培养：发酵罐中通入氮气以去除氧气，密封发酵罐以维持厌氧环境，出气管道置入水中保持发酵罐内外气体压强平衡，全混式搅拌培养对窖泥中的微生物进行富集，发酵温度控制在37℃，以稀释率为0.1/天的速度连续补加同量的富集培养基，培养10天后得到富含产己酸菌营养液；(7)将制备的富含产己酸菌营养液按照0.4L/m3均匀喷洒到白酒酿造窖池内，按照浓香型白酒生产工艺进行酿造，并对比喷洒营养液前后酒的风味和主要物质含量；(8)将富含产己酸菌营养液离心后，将沉淀本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种富含产己酸菌营养液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)活化培养基配置：每1L培养基中含有葡萄糖5.0-10.0g,CaCl

【技术特征摘要】
1.一种富含产己酸菌营养液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)活化培养基配置：每1L培养基中含有葡萄糖5.0-10.0g,CaCl2·2H2O0.05-0.10g,NH4Cl0.10-1.0g,MgSO4·7H2O0.10-1.0g,K2HPO4·3H2O0.10-1.5g,NaCl0.10-0.8g,FeSO4·7H2O0.002-0.08g,胰蛋白胨1.0-5.0g,黄水10-50mL；
(2)接种：将配置的活化培养基放入发酵罐中，并按5％-15％重量比接种窖泥；
(3)活化培养：发酵罐中通入氮气以去除氧气，密封发酵罐以维持厌氧环境，出气管道置入水中保持发酵罐内外气体压强平衡，全混式搅拌培养对窖泥中的微生物进行活化，发酵温度控制在25℃-37℃，连续补加活化培养基，培养5-10天后得到活化窖泥种子菌液；
(4)富集培养基配置：每1L培养基中含有乳酸钠和乙酸钠5.0-10.0g,CaCl2·2H2O0.05-0.10g,NH4Cl0.10-1.0g,MgSO4·7H2O0.10-1.0g,K2HPO4·3H2O0.10-1.5g,NaCl0.10-0.8g,FeSO4·7H2O0.002-0.08g,胰蛋白胨1.0-5.0g,微量元素溶液0.1-0.5g；
(5)接种：将配置的富集培养基放入发酵罐中，并按5％-15％重量比接种步骤(3)中培养得到的活化窖泥种子菌液；
(6)富集培养：发酵罐中通入氮气以去除氧气，密封发酵罐...

【专利技术属性】
技术研发人员：许正宏，柴丽娟，钟小忠，陆震鸣，张晓娟，史劲松，钱玮，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32