超级细菌耐药基因NDM-1的RPA检测引物组、试剂盒和方法技术

本发明专利技术公开了超级细菌耐药基因NDM‑1的RPA检测引物组、试剂盒和方法。涉及分子生物学技术领域。包括1对引物和1个探针，并提供了检测试剂盒和非诊断治疗的检测方法和引物组的应用。本发明专利技术仅需具备温控功能的荧光检测仪器，可在39℃条件下对NDM‑1进行快速、实时、灵敏、准确、便捷的检测。

【技术实现步骤摘要】
超级细菌耐药基因NDM-1的RPA检测引物组、试剂盒和方法
本专利技术涉及分子生物学
，更具体的说是涉及超级细菌耐药基因NDM-1的RPA检测引物组、试剂盒和方法。
技术介绍
新德里金属-β-内酰胺酶(NewDelhimetallo-β-lactamase-1，NDM-1)不是一种细菌，而是编码金属-β-内酰胺酶的一种基因，因首先在印度首都新德里出现而命名。NDM-1基因长度约800bp，位于1个长度约140000bp的质粒上，可在不同菌株间扩散。NDM-1具有超强的水解作用，几乎能抵抗目前所有抗生素，对人类的健康构成威胁，给临床治疗带来巨大挑战。对于携带NDM-1基因的超级细菌的实验室诊断主要是常规PCR、Sanger测序、荧光定量PCR和LAMP等方法。这些技术有的耗时耗力，有的灵敏度低，有的需要借助于大型精密仪器。重组酶聚合酶扩增(RecombinasePolymeraseAmplification，RPA)，被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶：能结合单链核酸的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种超级细菌耐药基因NDM-1的RPA检测引物组，其特征在于，包括1对引物和1个探针，引物和探针如下：/nNDM-1-F1：5’-CCGCCAGCTCGCACCGAATGTCTGGCAGCACACTT-3’，SEQ ID NO 1；/nNDM-1-R2：5’-GCGACCGGCAGGTTGATCTCCTGCTTGATCCAGT-3’，SEQ ID NO 2；/n探针NDM-1-probe：5’-TCGTCAGGGATGGCGGCCGCGTGCTGGTGGTCATACCGCCTGGACCGAT-3’，SEQ ID NO 3；/n其中，离5’端碱基数31bp的胸腺嘧啶T由FAM荧光基团标记；离...

【技术特征摘要】
1.一种超级细菌耐药基因NDM-1的RPA检测引物组，其特征在于，包括1对引物和1个探针，引物和探针如下：
NDM-1-F1：5’-CCGCCAGCTCGCACCGAATGTCTGGCAGCACACTT-3’，SEQIDNO1；
NDM-1-R2：5’-GCGACCGGCAGGTTGATCTCCTGCTTGATCCAGT-3’，SEQIDNO2；
探针NDM-1-probe：5’-TCGTCAGGGATGGCGGCCGCGTGCTGGTGGTCATACCGCCTGGACCGAT-3’，SEQIDNO3；
其中，离5’端碱基数31bp的胸腺嘧啶T由FAM荧光基团标记；离5’端碱基数32bp的C和33bp的A之间插入四氢呋喃分子；离3’端碱基数16bp的T由荧光淬灭基团BHQ标记。


2.一种基于权利要求1所述引物组的检测试剂盒，其特征在于，包括：冻干粉、去离子水、聚乙二醇、10μmol/L的NDM-1-F1、10μmol/L的NDM-1-R...

【专利技术属性】
技术研发人员：李有志，刘少宁，李宝华，魏茂莲，李志远，
申请(专利权)人：山东省兽药质量检验所山东省畜产品质量检测中心，
类型：发明
国别省市：山东;37