基于RAA-LF技术的肺炎克雷伯氏菌扩增引物及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种基于RAA‑LF技术的肺炎克雷伯氏菌扩增引物及应用，扩增引物包括如SEQ ID NO.1所示的上游引物和如SEQ ID NO.2所示的下游引物，上游引物及下游引物的5’端分别用荧光素和生物素类化合物标记。试剂盒中含有如上所述的扩增引物对。本发明专利技术将RAA技术与侧流层析试纸条结合，实现了肺炎克雷伯氏菌的准确高效检测。本发明专利技术的扩增引物，特异性强，灵敏度高，可重复性好；检测方法简单、快捷、方便、特异性强且灵敏度高，极具应用前景。

【技术实现步骤摘要】
基于RAA-LF技术的肺炎克雷伯氏菌扩增引物及应用
本专利技术属于分子生物学检测
，涉及一种基于RAA-LF技术的肺炎克雷伯氏菌扩增引物及其应用，特别涉及一种用于快速检测牛源性肺炎克雷伯氏菌的RAA-LF引物、由其制成的试剂盒及其检测方法。
技术介绍
肺炎克雷伯氏菌(Klebsiellapneumoniae)是引起奶牛乳腺炎(BovineMastitis,BM)的一种主要致病菌。由肺炎克雷伯氏菌引起的奶牛乳腺炎会导致牛奶产量和质量的显著下降以及高死亡率，大大缩短了奶牛的使用年限，给畜牧业带来了重大经济损失。此外，发生奶牛乳腺炎的乳汁中残留分泌的毒素，会引起中毒，严重者导致腹泻、肠炎甚至死亡。因此，对该菌的快速、准确、灵敏的检测是指导合理治疗和控制病原菌传播的必要条件。用于检测肺炎克雷伯氏菌的传统技术，包括使用显微镜或全自动细菌检测仪测定及生化检测，虽然其能够完成对肺炎克雷伯氏菌的检测，但其通常需要一周培养菌种，耗时耗力，无法进行快速检测。近年来，本领域技术人员开始将很多分子生物学方法用于肺炎克雷伯氏菌的检测。特别是以PCR为基础(本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于RAA-LF技术的肺炎克雷伯氏菌扩增引物，其特征在于，上游引物和下游引物分别含有如下所示的核苷酸序列：/nF：5’-TGTATTTTCTTTTTAATATTGCCTTTATGCG-3’；/nR：5’-TTGTCACTGAGTAAAACAGAATCAAATATGC-3’。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于RAA-LF技术的肺炎克雷伯氏菌扩增引物，其特征在于，上游引物和下游引物分别含有如下所示的核苷酸序列：
F：5’-TGTATTTTCTTTTTAATATTGCCTTTATGCG-3’；
R：5’-TTGTCACTGAGTAAAACAGAATCAAATATGC-3’。


2.根据权利要求1所述的一种基于RAA-LF技术的肺炎克雷伯氏菌扩增引物，其特征在于，上游引物和下游引物的核苷酸序列为：
F：5’-TGTATTTTCTTTTTAATATTGCCTTTATGCG-3’；
R：5’-TTGTCACTGAGTAAAACAGAATCAAATATGC-3’。


3.根据权利要求1或2所述的一种基于RAA-LF技术的肺炎克雷伯氏菌扩增引物，其特征在于，上游引物与下游引物的5’端分别用荧光素和生物素类化合物标记。


4.根据权利要求3所述的一种基于RAA-LF技术的肺炎克雷伯氏菌扩增引物，其特征在于，所述荧光素为羧基荧光素6-FAM；所述生物素类化合物为Biotin。


5.根据权利要求1所述的一种基于RAA-LF技术的肺炎克雷伯氏菌扩增引物，其特征在于，所述肺炎克雷伯氏菌为牛源性肺炎克雷伯氏菌。


6.一种基于RAA-LF技术的肺炎克雷伯氏菌检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有如权利要求1或2所述的扩增引物对。


7.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙晓红，后来旺，李达容，赵勇，
申请(专利权)人：上海海洋大学，
类型：发明
国别省市：上海;31