一种致吐型蜡样芽孢杆菌特异性正反向引物及探针、检测试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术涉及检测技术领域，具体而言，涉及一种致吐型蜡样芽孢杆菌特异性正反向引物及探针、检测试剂盒及其应用。该检测试剂盒包含2套正反向引物及探针、侧流层析试纸条；所述反向引物5'端用生物素进行标记；所述探针5'端用Fluorescein Isothiocyanate(FITC)标记，中间区域C碱基(距5'端至少30bp、距3'端至少15bp)用[THF]进行替换，3'端用C3‑spacer进行末端封闭。本发明专利技术使用RPA‑LFS(The isothermal recombinase polymerase amplification and the lateral flow strip)方法能够在不依赖仪器设备的非实验室环境下，实现实时、实地、即时的快速现场检测，且准确率高。

【技术实现步骤摘要】
一种致吐型蜡样芽孢杆菌特异性正反向引物及探针、检测试剂盒及其应用
本专利技术涉及检测
，尤其涉及一种致吐型蜡样芽孢杆菌特异性正反向引物及探针、检测试剂盒及其应用。
技术介绍
蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus,B.cereus)广义上指蜡样芽孢杆菌属，狭义上指蜡样芽孢杆菌这一特定物种，是一种革兰氏阳性、需氧、杆状、具有内生孢子、且耐干燥、耐高温的食源性致病菌。蜡样芽孢杆菌因其对营养的低需求和对复杂条件的高抗性而广泛分布于各种环境和食品中。经干燥、烹饪、巴氏杀菌等食品处理条件下存活的蜡样芽孢杆菌孢子，在适宜的条件10～60℃的温度下迅速发芽，产生毒素。蜡样芽孢杆菌毒素引起的典型临床症状有两种：腹泻和呕吐。腹泻是由热不稳定的肠毒素引起，肠毒素进入肠道后致使小肠上皮细胞中的腺苷环化酶增高，继而导致环磷酸腺苷的浓度逐渐增高，随后引起肠腔内液体潴留导致腹泻，其症状较轻，未经治疗即可自愈。致吐型蜡样芽孢杆菌(emeticBacilluscereus,emeticB.cereus)能够产生cereulide毒素(由非核糖体多肽合成酶系N本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蜡样芽孢杆菌特异性正反向引物及探针，其特征在于，其正向引物和反向引物分别为gyrB-F、gyrB-R，且序列分别为TACATCGTGAAGGTAAAATCCATTACCAAAAATAC、Biotin-TTATATTGAAGAGAAACCTCAACCTGAATACC，其探针为gyrB-P，且序列为FITC-TTAAAAGTCATTGGTGACACCGATCAAACA[THF]GAGCAATAACTCGAT-/C3-spacer/。/n

【技术特征摘要】
1.一种蜡样芽孢杆菌特异性正反向引物及探针，其特征在于，其正向引物和反向引物分别为gyrB-F、gyrB-R，且序列分别为TACATCGTGAAGGTAAAATCCATTACCAAAAATAC、Biotin-TTATATTGAAGAGAAACCTCAACCTGAATACC，其探针为gyrB-P，且序列为FITC-TTAAAAGTCATTGGTGACACCGATCAAACA[THF]GAGCAATAACTCGAT-/C3-spacer/。


2.一种致吐型蜡样芽孢杆菌特异性正反向引物及探针，其特征在于，其正向引物和反向引物分别为ces-F、ces-R-m，且序列分别为ATAGTGGGAAAATAACGAGAAATGCATTTC、Biotin-GGGAGGATACGCTTATGCCCTACTTACATT，其探针为ces-P-m，且序列为FITC-TCAAAAACAGTTTGAGAACGGGTCATCTAGAG[THF]GATTACACAAGAGAT-C3-spacer/。

【专利技术属性】
技术研发人员：高嵩，董井泉，赵盼盼，王蕾，董宇，杨潇含，王昱，
申请(专利权)人：江苏海洋大学，连云港海恒生化科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32