一种人工合成的抗虫蛋白mCry1Ia2及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种人工合成的抗虫蛋白mCry1Ia2。本发明专利技术还公开了所述蛋白的核酸分子，以及所述核酸分子的重组载体、宿主细胞或重组菌。还公开了所述蛋白以及所述核酸分子及其重组载体、宿主细胞或重组菌等在调控植物抗虫性、杀虫或提高转基因植物抗虫性和制备杀虫剂或防虫害制剂中的应用。体外实验证明改造合成的Bt基因产毒蛋白对玉米螟更高的杀虫活性，且对Cry1Ab、Cry1F、Cry1Ie毒蛋白抗性玉米螟种群有显著的杀虫效果。本发明专利技术利用组成型启动子构建了新的植物表达载体，抗虫基因mCry1Ia2能够在单子叶植物中稳定高效表达，进而用于生产抗虫转基因植物。

【技术实现步骤摘要】
一种人工合成的抗虫蛋白mCry1Ia2及其制备方法和应用
本专利技术涉及基因工程和生物防治领域，具体地说，涉及一种人工合成的抗虫蛋白mCry1Ia2及其制备方法和应用。
技术介绍
Bt基因编码杀虫晶体蛋白，来自苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)，其广泛存在于水、土壤、沙漠、树叶、昆虫尸体中，是现今产量最大、使用最广的生物杀虫剂。它在形成孢子时可以形成杀虫晶体蛋白(insecticidalcrystalprotein，ICP)，又称δ-内毒素，可以对鳞翅目和鞘翅目等农业害虫产生特异性的杀虫活性。其作用过程包括昆虫体吞食原毒素、原毒素酶解与活化、毒素穿过围食膜、毒素与特定受体结合、毒素分子嵌入表皮细胞膜、形成离子通道、中肠细胞的离子失衡后细胞裂解。在过去的几十年里，已确定数十种苏云金芽孢杆菌菌系及130多种它们编码的杀虫晶体蛋白。Whiteley和Schnepf于1985年发表了从苏云金芽孢杆菌中克隆得到的cry基因核苷酸序列。随着不断发现新的Bt菌株以及Bt基因的克隆，Bt家族的成员不断增多，根据数据库(www.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人工合成的抗虫蛋白mCry1Ia2，是如下(a)-(d)中任一种蛋白质：/n(a)其氨基酸序列包括序列表中序列2所示的氨基酸序列；/n(b)其氨基酸序列由序列表中序列2所示的氨基酸残基组成；/n(c)将(a)或(b)的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有抗虫功能的由(a)或(b)衍生的蛋白质；/n(d)与(a)或(b)限定的蛋白质至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且具有抗虫功能的蛋白。/n

【技术特征摘要】
20200116 CN 20201004685531.一种人工合成的抗虫蛋白mCry1Ia2，是如下(a)-(d)中任一种蛋白质：
(a)其氨基酸序列包括序列表中序列2所示的氨基酸序列；
(b)其氨基酸序列由序列表中序列2所示的氨基酸残基组成；
(c)将(a)或(b)的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有抗虫功能的由(a)或(b)衍生的蛋白质；
(d)与(a)或(b)限定的蛋白质至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且具有抗虫功能的蛋白。


2.编码权利要求1所述蛋白的核酸分子。


3.根据权利要求2所述的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子为如下1)-4)中任一所述核酸分子：
1)编码区包括序列表中序列1所示的核酸分子；
2)编码区由序列表中序列1所示的核酸分子组成；
3)与1)或2)限定的核酸序列杂交且编码具有抗虫功能蛋白质的核酸分子；
4)与1)或2)限定的核酸序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且编码具有抗虫功能蛋白质的核酸分子。


4.根据权利要求2所述的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子是通过将密码子优化后的Cry1Ab的第一、第二功能结构域1392bp和Cry1F的第三功能结构域453bp和Cry1Ie一个长2157bp...

【专利技术属性】
技术研发人员：于壮，岳莉莉，
申请(专利权)人：黑龙江大鹏农业有限公司，于壮，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23