通过内化到细胞胞浆中抑制细胞中活化的Ras的抗体及其用途制造技术

根据本发明专利技术的组合了修饰的可变重链区和可变轻链区的肿瘤特异性胞浆内化RAS抑制抗体由于高产率而有利于发展成治疗性药物，并且可以通过肿瘤特异性内化到胞浆中来有效抑制突变体Ras，并且因此可以作为单独药物或与现有药品进行平行治疗来期待有效的抗癌活性。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过内化到细胞胞浆中抑制细胞中活化的Ras的抗体及其用途
本公开文本涉及一种抗体，其以完整免疫球蛋白的形式结合在肿瘤组织中过表达的细胞的表面上的膜蛋白受体并且因此经历胞吞作用，然后由于内体逃逸能力而定位在细胞的细胞质中，并且特异性地结合细胞质中与GTP偶联的活化的Ras(Ras·GTP)以抑制肿瘤突变体Ras的活性；一种制备所述抗体的方法及所述抗体的用途。具体地，本公开文本涉及一种对于Ras·GTP具有高亲和力的重链可变区(VH)，其通过修饰以完整免疫球蛋白的形式渗透到细胞的细胞质中以直接抑制细胞内RasGTP的抗体的重链可变区(VH)来产生；一种包含所述重链可变区的抗体；一种产生所述抗体的方法及所述抗体的用途。本公开文本的抗体包括一种为轻链可变区(VL)赋予肿瘤组织特异性细胞质渗透能力的改进技术。本公开文本涉及一种完整免疫球蛋白型的抗体，其包含经修饰来为所述抗体赋予肿瘤组织特异性细胞质渗透能力的改进的轻链可变区(VL)与具有改善的亲和力的重链可变区(VH)的组合，并且因此渗透到细胞质中并直接抑制细胞内RasGTP。本公开文本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种重链可变区，其特异性地结合通过与Ras结合的GTP活化的Ras(Ras·GTP)，所述重链可变区包含：/n具有由以下式1表示的氨基酸序列的CDR1；/n具有由以下式2表示的氨基酸序列的CDR2；以及/n具有由以下式3表示的氨基酸序列的CDR3，/n[式1]/nD-X

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171116 KR 10-2017-01529981.一种重链可变区，其特异性地结合通过与Ras结合的GTP活化的Ras(Ras·GTP)，所述重链可变区包含：
具有由以下式1表示的氨基酸序列的CDR1；
具有由以下式2表示的氨基酸序列的CDR2；以及
具有由以下式3表示的氨基酸序列的CDR3，
[式1]
D-X11-SMS
其中X11是F或Y，
[式2]
YISRTSHT-X21-X22-YADSVKG
其中X21是T、I或L，并且X22是Y、C、S、L或A，
[式3]
G-F-X31-X32-X33-Y
其中X31是K、F、R或N，X32是M或L，并且X33是D或N。


2.根据权利要求1所述的重链可变区，其中
具有由以下式1表示的氨基酸序列的CDR1；
具有由以下式2表示的氨基酸序列的CDR2；以及
具有由以下式3表示的氨基酸序列的CDR3，
[式1]
D-X11-SMS
其中X11是F或Y，
[式2]
YISRTSHT-X21-X22-YADSVKG
其中X21-X22是TY、IY、TC、TS、IS、LC、LL或IA，
[式3]
G-F-X31-X32-X33-Y
其中X31-X32-X33是KMD、RMD、FMN、RLD或NLD。


3.根据权利要求1所述的重链可变区，其中所述重链可变区的CDR1序列选自由SEQIDNO:2至4表示的氨基酸序列，所述重链可变区的CDR2序列选自由SEQIDNO:5和SEQIDNO:10至16表示的氨基酸序列，并且所述重链可变区的CDR3序列选自由SEQIDNO:6至9和SEQIDNO:17至18表示的氨基酸序列。


4.根据权利要求1所述的重链可变区，其中所述重链可变区选自：
i)包含SEQIDNO:2的CDR1、SEQIDNO:5的CDR2和SEQIDNO:7的CDR3的重链可变区；
ii)包含SEQIDNO:3的CDR1、SEQIDNO:5的CDR2和SEQIDNO:7的CDR3的重链可变区；
iii)包含SEQIDNO:4的CDR1、SEQIDNO:5的CDR2和SEQIDNO:8的CDR3的重链可变区；
iv)包含SEQIDNO:3的CDR1、SEQIDNO:5的CDR2和SEQIDNO:9的CDR3的重链可变区；
v)包含SEQIDNO:3的CDR1、SEQIDNO:5的CDR2和SEQIDNO:8的CDR3的重链可变区；
vi)包含SEQIDNO:3的CDR1、SEQIDNO:10的CDR2和SEQIDNO:7的CDR3的重链可变区；
vii)包含SEQIDNO:3的CDR1、SEQIDNO:11的CDR2和SEQIDNO:7的CDR3的重链可变区；
viii)包含SEQIDNO:3的CDR1、SEQIDNO:12的CDR2和SEQIDNO:7的CDR3的重链可变区；
ix)包含SEQIDNO:3的CDR1、SEQIDNO:13的CDR2和SEQIDNO:7的CDR3的重链可变区；
x)包含SEQIDNO:3的CDR1、SEQIDNO:14的CDR2和SEQIDNO:17的CDR3的重链可变区；
xi)包含SEQIDNO:3的CDR1、SEQIDNO:15的CDR2和SEQIDNO:18的CDR3的重链可变区；以及
xii)包含SEQIDNO:3的CDR1、SEQIDNO:16的CDR2和SEQIDNO:7的CDR3的重链可变区。


5.根据权利要求1所述的重链可变区，其中所述重链可变区选自由SEQIDNO:20至32表示的氨基酸序列。


6.一种完整免疫球蛋白抗体，其包含根据权利要求1至5中任一项所述的重链可变区。


7.根据权利要求6所述的完整免疫球蛋白抗体，其中所述抗体具有细胞质渗透能力。


8.根据权利要求6所述的完整免疫球蛋白抗体，其中所述抗体的轻链可变区选自由SEQIDNO:34至43表示的氨基酸序列。


9.根据权利要求6所述的完整免疫球蛋白抗体，其中所述抗体的轻链可变区或重链可变区与靶向EpCAM(上皮细胞粘附分子)、整合素αvβ3或整合素αvβ5的肽融合。


10.根据权利要求9所述的完整免疫球蛋白抗体，其中所述轻链可变区或所述重链可变区选自由SEQIDNO:44至63表示的氨基酸序列。


11.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：金容星，崔东起，辛承敏，朴成旭，
申请(专利权)人：奥隆制药，
类型：发明
国别省市：韩国;KR