一种紫杉醇脂质体及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种紫杉醇脂质体及其制备方法。本发明专利技术具体公开了一种负载活性物质的脂质体，其包括以人参皂苷为膜材的空白脂质体和活性物质；所述的空白脂质体具有膜，所述的膜包含脂类物质和如式I所示的人参皂苷，其中，所述的活性物质为紫杉醇；所述的如式I所示的人参皂苷为人参皂苷Rg5和/或人参皂苷Rk1。本发明专利技术的紫杉醇脂质体具有对肿瘤细胞的靶向作用、抗多药耐药作用、增效减毒和药物协同作用。

【技术实现步骤摘要】
一种紫杉醇脂质体及其制备方法
本专利技术涉及一种紫杉醇脂质体及其制备方法。
技术介绍
脂质体是一种具有脂质双分子层的囊泡，其已经用于定向药物载体，属于靶向给药系统的一种新剂型。它可以将药物粉末或溶液包埋在直径为微米或纳米级的微粒中，这种微粒类似于生物膜结构的双分子层微小囊泡，具有良好的生物相容性。之所以称其为靶向给药系统，一方面，表面未经修饰的脂质体进入人体后，通常易被网状内皮系统吞噬而激活机体的自身免疫功能，并改变被包封药物的体内分布，使药物主要在肝、脾等组织器官中积蓄，粒径在纳米范围的脂质体由于肿瘤存在的高通透性和滞留效应(即EPR效应)能够有效蓄积于肿瘤部位，上述性质可称为脂质体的被动靶向；另一方面，脂质体表面可经过专门的共价或非共价修饰特殊配体，配体包括抗体、多肽、核酸适配体、糖基及小分子等，通过配体-受体相互作用介导脂质体被特定靶细胞高效摄取，这被称为主动靶向，常被比喻为“生物导弹”。脂质体的靶向递药能力能够提高药物的治疗指数，减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性。脂质体的结构与由表面活性剂构成的胶束不同，后者是由单分子层组成，而脂质体由双分子层组成，可以包裹脂溶性药物或水溶性药物。脂质体的主要成分是磷脂和胆固醇。磷脂为两性物质，其结构中含有磷酸基团和含氨的碱基(均亲水)，及两个较长的疏水烃链链。胆固醇亦属于两亲物质，其结构中亦有疏水与亲水两种基团，但疏水性较亲水性强。其中，磷脂是脂质体的主要成分，磷脂形成脂质体时，有两条疏水链指向内部，亲水基在膜的内外两个表面上，磷脂双层构成一个封闭小室，内部包含水溶液，小室中水溶液被磷脂双层包围而独立，磷脂双层形成囊泡又被水相介质分开。胆固醇增加脂质体膜的稳定性，其它辅料起特殊功能性作用。脂质体主要材料是磷脂和胆固醇，例如南京思科生产的紫杉醇脂质体(商品名为“力扑素”)的主要成份为(除紫杉醇药物以外)：卵磷脂(主成份一)、胆固醇(主成份二)、苏氨酸(氨基酸一般作为抗氧化剂或缓冲剂)和葡萄糖(糖类一般作为冻干赋形剂或冻干保护剂)。脂质体中也可以添加其他辅料，例如添加热敏性辅料制成热敏性脂质体、添加pH敏感物质制成pH敏感脂质体、添加阳离子或阴离子制成阳离子脂质体或阴离子脂质体或添加表面活性剂等，用途不同，添加的辅料也不同。一般情况，脂质体冻干之前主要成份是磷脂(比例一般在50％-95％)和胆固醇(5％-50％左右)；但在进行冻干的操作时，会根据具体情况加入一定量的辅料，不同用途的脂质体，所添加的辅料比例差别比较大，有些在冻干时无需加入辅料，有些在冻干时，辅料加入的量甚至达到50％。另外，目前市场上还有许多改性的磷脂，例如PEG化或氨基酸化的磷脂，该类磷脂中辅料的含量很少。因此，不同用途、不同类型的脂质体，具体组分和含量差别较大，相互之间的借鉴意义不大(注：以上出现的百分比均是指各组分占脂质体原料总质量的百分比)。由于不同类型药物的理化性质差异，如结构、溶解性、稳定性等，其均有相应的制备技术要求，同时在技术、膜材料、中试放大等环节需要不断完善。对于脂质体的质量评价，主要8项指标，脂质体的形态和粒径(含分散性)，包封率，载药量，突释和渗漏率，体外释放度，磷脂氧化程度，有机溶剂残留和体内外功能评价。但总体来说，现在脂质体仍然存在靶向性有待进一步提高，包封率低、稳定性差、制备工艺复杂等缺点。因此，研究一种高效、安全、稳定、靶向性强、均一性好、质量稳定和可靠、制备工艺简便的脂质体一直是脂质体研究的重点和方向。人参皂苷是一种具有特殊双亲性的物质，亲水端带有糖基，亲油端带有长链尾端。人参皂苷具有非常广泛的医药用途，例如人参皂苷F4和Rg6能用于治疗淋巴瘤；人参皂苷Rg3能用于治疗痛经和白癜风；人参皂苷Rh1能用于改善使用地塞米松引起的激素抵抗，提高地塞米松的抗炎疗效；人参皂苷Rb1能用于防治高血压(参见CN201310165926、CN201310165907、CN201210501652、CN201310011400和CN201210486959)。CN201210151597.0公开了一种人参皂苷Rg3脂质体及制备方法，采用脂质体包封药物人参皂苷Rg3，得到了人参皂苷Rg3脂质体，并显著提高药物人参皂苷Rg3的可吸收度和生物利用度，同时增强了对肿瘤组织的靶向性，提高了药效。现有技术中还没有任何关于人参皂苷可以作为脂质体膜材料，同时又可以作为靶向材料和药物等，用于制备空白脂质体并包载药物等其他成分的报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是为了克服现有的脂质体包封率低、稳定性差、制备工艺复杂以及靶向性有待进一步提高等缺陷，而提供了一种紫杉醇脂质体及其制备方法。本专利技术的空白脂质体具有高效、安全、稳定、靶向性强、均一性好、质量稳定和可靠、制备工艺简便等优点，并可用于包封药物、化妆品中的活性物质或具有保健作用的物质，形成负载活性物质的脂质体。当本专利技术的空白脂质体包封的活性物质为抗肿瘤药物时，所得的负载活性物质的脂质体具有对肿瘤细胞的靶向作用、抗多药耐药作用、增效减毒和药物协同作用。具体地，与传统的脂质体相比，各项指标更加优秀，尤其是在成药性、靶向性、抗多药耐药、增效减毒、药物协同作用等方面。一种以人参皂苷为膜材的空白脂质体，其中所述的空白脂质体具有膜，所述的膜包含脂类物质和如式I所示的人参皂苷；其中，R1和R2独立地为氢、羟基或R5，但R1和R2不同时为氢；R3为R4为氢、羟基或R5；所述的R5为R6、R7或R8：R6为下述基团中的任一种：-O-Glc、-O-Rha、-O-Lyx、-O-Xyl、-O-Ara(p)、-O-Ara(f)、-O-Glc(2→1)Glc(数字表示碳位，→表示连接关系，下同)、-O-Glc(6→1)Glc、-O-Glc(2→1)Rha、-O-Glc(2→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Rha、-O-Glc(2→1)Ara(p)、-O-Glc(6→1)Ara(p)、-O-Glc(2→1)Ara(f)、-O-Glc(6→1)Ara(f)、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Glc、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Xyl、-O-Glc(2→1)Glc(4→1)Xyl、-O-Glc(2→1)Lyx、-O-Glc(6→1)Lyx、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Rha、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Lyx、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Ara(f)、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Ara(p)、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Glc、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Rha、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Xyl、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Lyx、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Ara(f)、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Ara(p)、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Glc、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Rha、-O-Glc(6→1)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种负载活性物质的脂质体，其特征在于，其包括以人参皂苷为膜材的空白脂质体和活性物质；所述的空白脂质体具有膜，所述的膜包含脂类物质和如式I所示的人参皂苷：/n

【技术特征摘要】
20150819 CN 20151050940481.一种负载活性物质的脂质体，其特征在于，其包括以人参皂苷为膜材的空白脂质体和活性物质；所述的空白脂质体具有膜，所述的膜包含脂类物质和如式I所示的人参皂苷：



其中，所述的活性物质为紫杉醇；
所述的如式I所示的人参皂苷为人参皂苷Rg5和/或人参皂苷Rk1。


2.根据权利要求1所述的负载活性物质的脂质体，其特征在于，所述的空白脂质体中的脂类物质为磷脂，所述的磷脂和所述的如式I所示的人参皂苷的质量比为0.5:1-100:1，较佳地为0.5:1-20:1，更佳地为0.5:1-2:1。


3.根据权利要求2所述的负载活性物质的脂质体，其特征在于，所述的膜进一步包含胆固醇；所述的磷脂和所述的如式I所示的人参皂苷的质量比为1:0.01-1:3，较佳地为1：0.05-1:0.9，更佳地为1:0.1-1:0.9；所述的如式I所示的人参皂苷与所述的胆固醇的质量比为0.1:1-100:1，较佳地为0.5:1-50:1，更佳地为0.5:1-10:1。


4.根据权利要求3所述的负载活性物质的脂质体，其特征在于，所述的如式I所示的人参皂苷在膜中的含量为0.01％～80％，较佳地为10％-80％，更佳地为10％-40％，最佳地为20％-40％；所述的磷脂在膜中的含量为5％-99.9％；较佳地为10％-70％，更佳地为30％-70％，最佳地为30％-60％；所述的胆固醇在膜中的含量为0％-50％，较佳地为0.5％-50％，更佳地为5％-40％，最佳地为5％-30％以上百分比均是指各组分的质量占所述的膜的总质量的百分比。


5.根据权利要求1-4任一项所述的负载活性物质的脂质体，其特征在于，所述的空白脂质体中还进一步包含抗氧化剂、冻干保护剂和“大豆油和/或油酸钠”中的一种或多种，其中，所述的抗氧化剂的含量优选小于等于25％，较佳地为0.001％-15％，更佳地为0.01％-10％，最佳地为0.01％-5％；所述的冻干保护剂的含量优选小于等于80％，较佳地为0.5％-60％，更佳地为5％-60％，最佳地为30％-60％；所述的大豆油和/或油酸钠的含量较佳地为1％-90％，更佳地为15％-80％，最佳地为20％-70％；以上百分比是指所述的抗氧化剂、所述的冻干保护剂或所述的大豆油和/或油酸钠的质量占所述空白脂质体总质量的百分比。


6.根据权利要求5所述的负载活性物质的脂质体，其特征在于，
所述的磷脂为天然磷脂、半合成磷脂和全合成磷脂中的一种或多种；所述的天然磷脂较佳地为天然卵磷脂、大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂和脑磷脂中的一种或多种，更佳地为蛋黄卵磷脂；所述的半合成或全合成磷脂较佳地为磷脂酰胆碱类的磷脂和/或PEG修饰的磷脂；其中，所述的磷脂酰胆碱类的磷脂较佳地为氢化大豆卵磷脂和/或二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱；所述的PEG修饰的磷脂较佳地为二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇；
和/或，所述的抗氧化剂为抗坏血酸、维生素E、维生素C和丙二醇中的一种或多种；
和/或，所述的冻干保护剂为糖、多元醇、氨基酸和缓冲剂中的一种或多种；其中，所述的糖较佳地为单糖、双糖和多糖中的一种或多种；所述的单糖较佳地为葡萄糖、甘露醇、木糖醇和山梨醇中的一种或多种，更佳地为葡萄糖；所述的双糖较佳地为蔗糖、乳糖、半乳糖和麦芽糖中的一种或多种；所述的多糖较佳地为海藻糖。


7.一种如权利要求1-6任一项所述的负载活性物质的脂质体的制备方法，其特征在于，
当所述的脂质体中包含冻干保护剂，所述的负载活性物质的脂质体的制备方法为方法A：
方法A包括下列步骤：
(1)有机溶剂中，将脂类物质、如式I所示的人参皂苷和所述的活性物质混合，可选地加入胆固醇、脂溶性抗氧化剂、大豆油和/或油酸钠、脂溶性表面活性剂、脂溶性热敏性辅...

【专利技术属性】
技术研发人员：李翀，王亚华，詹华杏，
申请(专利权)人：上海本素医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31