一种计算AIV在MDCK-sus细胞中细胞单位均产毒量的方法技术

本发明专利技术属于微生物工程技术领域，具体涉及一种计算AIV在MDCK‑sus细胞中细胞单位均产毒量的方法，包括如下步骤：步骤1：感染流感病毒时活细胞的密度CDI和MOI；步骤2：获取第i次取样后剩余的流感病毒液的体积V

A method for calculating the average cell unit production of AIV in MDCK sus cells

The invention belongs to the technical field of microbial engineering, and specifically relates to a method for calculating the average cell unit toxin production of AIV in MDCK \uffe3 sus cells, including the following steps: Step 1: the density of living cells CDI and MOI when infected with influenza virus; step 2: obtaining the volume V of influenza virus liquid remaining after the i-th sampling

【技术实现步骤摘要】
一种计算AIV在MDCK-sus细胞中细胞单位均产毒量的方法
本专利技术属于微生物工程
，具体涉及一种计算AIV在MDCK-sus细胞中细胞单位均产毒量的方法。
技术介绍
目前，家禽年出栏量和产值在逐年上升，但禽流感的持续爆发严重危害了养禽业，不仅造成了巨大的经济损失，还引起了多起公共卫生事件，接种禽流感疫苗是最有效的防控手段，因此必须提高禽流感疫苗技术水平。传统禽流感疫苗通过鸡胚培养生产，效率低、成本高、品质不稳定。国外流感细胞苗主要采用MDCK、Vero等细胞载体贴壁生产；国内多家单位也开展了禽流感细胞苗的研究，但由于微载体工艺扩大困难、细胞密度和病毒滴度较低等的因素制约了其产业化进程。而细胞悬浮培养是大规模培养动物细胞生产生物制品的核心技术，是生物制药行业发展的必然趋势，该技术完全克服了以往技术的弊端。全悬浮无血清MDCK细胞培养H9N2亚型禽流感病毒是旨在克服鸡胚或贴壁细胞生产禽流感病毒缺点基础之上建立的一种先进的培养方式，即能节约成本、省时省力、又能扩大培养，生产高质量、高滴度的禽流感病毒。<br>目前对于细胞单本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种计算AIV在MDCK-sus细胞中细胞单位均产毒量的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n步骤1：感染流感病毒时活细胞的密度CDI、感染复数MOI；/n步骤2：获取第i次取样后剩余的流感病毒液的体积V

【技术特征摘要】
1.一种计算AIV在MDCK-sus细胞中细胞单位均产毒量的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：感染流感病毒时活细胞的密度CDI、感染复数MOI；
步骤2：获取第i次取样后剩余的流感病毒液的体积Vi，i时刻流感病毒血凝滴度值ɑHAi；
步骤3：获取检测流感病毒血凝滴度时鸡红细胞密度RBC；
步骤4：根据步骤1-3所获得的数据得到细胞单位均产毒量VPC，其计算公式如下式1；



其中，Vi为第i次取样后剩余体积，MOI为感染复数，N为取样次数，VW为在第一次取样之前的工作体积。


2.根据权利要求1所述的计算AIV在MDCK-sus细胞中细胞单位均产毒量的方法，其特征在于，所述方法具体为：取MDCK-sus细胞扩繁传代；取扩繁传代之后的MDCK-sus细胞悬液，接种于MDCK细胞无血清培养基中，进行全悬浮无血清培养并扩繁传代；当MDCK-sus细胞密度达到对数生长期密度时，分瓶培养；在接种H9N2亚型禽流感病毒前测算活细胞的密度CDI；接种H9N2亚型禽流感病毒，同时加入TPCK-胰...

【专利技术属性】
技术研发人员：方倪冉，郑航辉，李淋雨，闫圆圆，董楠，杨小云，
申请(专利权)人：华农肇庆生物产业技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44