一种用于检测猴免疫缺陷病毒的RPA试剂盒、引物、探针及方法技术

技术编号:26162413 阅读:69 留言:0更新日期:2020-10-31 12:52
本发明专利技术属生物技术领域,具体涉及一种用于检测猴免疫缺陷病毒核酸的RPA试剂盒、引物、探针及方法。所述的试剂盒包括RPA反应体系,所述的RPA反应体系包括RPA引物探针混合液,所述RPA引物探针混合液包括一引物对和探针,所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示,所述探针如SEQ ID NO.3+FAM‑dt+THF+BHQ1‑dt+SEQ ID NO.4+C3所示。本发明专利技术的试剂盒可用于检测猴免疫缺陷病毒,反应时间短、检测速度快,且灵敏度和特异性高。

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测猴免疫缺陷病毒的RPA试剂盒、引物、探针及方法
本专利技术属于生物
,具体涉及一种用于检测猴免疫缺陷病毒核酸的RPA试剂盒、引物、探针及方法。
技术介绍
现有技术公开了猴免疫缺陷病毒(Simianimmunodeficiencyvirus,SIV)又名猴艾滋病病毒,是一种外源性逆转录病毒,它是猴获得性免疫缺陷综合征(Simianaquiredimmunedeficiencysyndrome,SAIDS)的致病原。SIV于1985年首次从饲养的猕猴体内分离到SIV,随后SIV病毒株从非洲猴和亚洲恒河猴体内分离出来。由于SIV与人类免疫缺陷病毒(humanimmunodeficiencyvirus,HIV)基因同源性高,其形态、理化特性、分子生物学特性和致病机制均与HIV十分相似,部分SIV病毒株接种亚洲恒河猴,会使其感染并很快产生类似AIDS症状,因此,用SIV感染亚洲恒河猴作为模型并被推荐替代HIV-1/黑猩猩模型。有研究显示,HIV-2在非洲病人中分离出来,该病毒亦可感染猴类和狒狒,但产不致病。由于S本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测猴免疫缺陷病毒核酸的试剂盒,其包括RPA反应体系,其特征在于,所述的RPA反应体系包括RPA引物探针混合液,/n所述RPA引物探针混合液包括一引物对和探针,/n所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示,/n所述探针如SEQ ID NO.3+FAM-dt+THF+BHQ1-dt+SEQ ID NO.4+C3所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于检测猴免疫缺陷病毒核酸的试剂盒,其包括RPA反应体系,其特征在于,所述的RPA反应体系包括RPA引物探针混合液,
所述RPA引物探针混合液包括一引物对和探针,
所述引物对的核苷酸序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示,
所述探针如SEQIDNO.3+FAM-dt+THF+BHQ1-dt+SEQIDNO.4+C3所示。


2.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述的RPA反应体系的引物的浓度均为5~20μM,较佳地为10μM;所述探针的浓度为5~10μM,较佳地为10μM。


3.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述的RPA反应体系还包括RT反应液、核心反应液、反应缓冲液、Exo反应液、探针酶混合物、醋酸镁和dNTP;较佳地:所述醋酸镁的浓度为260~300μM,优选280μM;
和/或,
所述dNTP的浓度为20~220μM,优选200μM。


4.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述的引物探针混合液由所述引物对和所述探针组成,所述引物对中各引物的量为2.1μL、浓度为10μM,所述探针的量为0.6μL、浓度为10μM;所述核心反应液的量为2.5μL,所述RT反应液的量为1μL,所述反应缓冲液的量为25μL,所述探针酶混合物的量为5μL,以及所述Exo反应液的量为1μL;所述醋酸镁的量为2.5μL、浓度为280μM;所述dNTP的量为7.2μL、浓度为11mM;
较佳地:所述的核心反应液为20倍核心反应液;
和/或,所述的反应缓冲液为2倍反应缓冲液;
和/或,所述的探针酶混合物为10倍探针酶混合...

【专利技术属性】
技术研发人员:薛俊欣郑江陈鸿军熊炜李健
申请(专利权)人:上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心
类型:发明
国别省市:上海;31

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