一种用于检测鼠痘病毒的RPA试剂盒、引物、探针及方法技术

本发明专利技术属生物技术领域，具体涉及一种用于检测鼠痘病毒核酸的RPA试剂盒、引物、探针及方法。本发明专利技术的试剂盒包括RPA反应体系，所述的RPA反应体系包括RPA引物探针混合液，所述RPA引物探针混合液包括一引物对和探针，所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，所述探针如SEQ ID NO.3+FAM‑dt+THF+BHQ1‑dt+SEQ ID NO.4+C3所示。本发明专利技术的试剂盒可用于检测鼠痘病毒，反应时间短、检测速度快，且灵敏度和特异性高。

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测鼠痘病毒的RPA试剂盒、引物、探针及方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种用于检测鼠痘病毒核酸的RPA试剂盒、引物、探针及方法。
技术介绍
资料公开了由鼠痘病毒(Ectromeliavirus，EV)引起的小鼠鼠痘(Mousepox)是一种高度接触性、毁灭性的烈性传染病，该病在世界各地的实验鼠群广泛流行，死亡率达96.6％。该疾患其临床以四肢、头和尾肿胀、坏死甚至脚趾脱落为特征，是危害小鼠最为严重的病毒病之一。英国Marchal等于1929年首先在英国实验鼠群中发现本病患，并于次年首次报道；我国汤飞凡1951年首次报道北京中央生物制品研究所发生鼠痘疫情；吴惠英等(1986)、徐蓓等(1989)对全国各地鼠群进行血清学流行病学调查，证实鼠痘在我国鼠群中呈散发性流行。目前本病患广泛存在于世界各国，尤以英德美法最为严重，在我国至今仍时有发生。研究显示，本病多呈爆发性流行，致死率高，常造成全群淘汰，严重影响实验动物的生产繁育，对动物实验的顺利进行和科研数据的准确性和可重复性造成极其严重的影响。研究显示，在自然条件下，鼠痘病毒可感染各本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测鼠痘病毒核酸的试剂盒，其包括RPA反应体系，其特征在于，所述的RPA反应体系包括RPA引物探针混合液，所述RPA引物探针混合液包括一引物对和探针，所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，所述探针如SEQ ID NO.3+FAM-dt+THF+BHQ1-dt+SEQ ID NO.4+C3所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于检测鼠痘病毒核酸的试剂盒，其包括RPA反应体系，其特征在于，所述的RPA反应体系包括RPA引物探针混合液，所述RPA引物探针混合液包括一引物对和探针，所述引物对的核苷酸序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示，所述探针如SEQIDNO.3+FAM-dt+THF+BHQ1-dt+SEQIDNO.4+C3所示。


2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的RPA反应体系的引物的浓度均为5～20μM，较佳地为10μM；所述探针的浓度为5～10μM，较佳地为10μM。


3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述的RPA反应体系还包括核心反应液、反应缓冲液、Exo反应液、探针酶混合物、醋酸镁和dNTP；较佳地：所述醋酸镁的浓度为260～300μM，优选280μM；
和/或，所述dNTP的浓度为20～220μM，优选200μM。


4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述的引物探针混合液由所述引物对和所述探针组成，所述引物对中各引物的量为2.1μL、浓度为10μM，所述探针的量为0.6μL、浓度为10μM；所述核心反应液的量为2.5μL，所述反应缓冲液的量为25μL，所述探针酶混合物的量为5μL，以及所述Exo反应液的量为1μL；所述醋酸镁的量为2.5μL、浓度为280μM；所述dNTP的量为7.2μL、浓度为11mM；较佳地：所述的核心反应液为20倍核心反应液；
和/或，所述的反应缓冲液为2倍反应缓冲液；
和/或，所述的探针酶混合物为10倍探针酶...

【专利技术属性】
技术研发人员：熊炜，薛俊欣，魏晓锋，林颖峥，李健，
申请(专利权)人：上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心，上海实验动物研究中心，
类型：发明
国别省市：上海;31