微流体分离芯片制造技术

微流体分离芯片，涉及医疗技术领域，也涉及微生物技术领域，还涉及印刷技术领域。包括一水平的等径直管状主通道，在主通道的下方布置管状分离通道，所述分离通道的两端具有相同的内横截面积，所述分离通道的中部与主通道的中部连通，形成的直管状连通通道具有相同的内截面，所述连通通道的长度为５００～１００００μｍ，连通通道内竖向高度为５～１０００μｍ。本实用新型专利技术利用层流原理，可以将能动精子从常规精液样品以及用传统精子分离方法难以或不可能进行分离的样品中分离出来。（*该技术在2016年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本技术涉及医疗
，也涉及微生物
，还涉及印刷

技术介绍
约有10％的夫妇有不孕不育方面的问题，其中有30％～40％是由缺少精子或精子不正常引起的。有效的人工选择过程使成功怀孕、生育和健康后代的可能性最大化是很重要的。目前，对于这种与男性相关的不孕不育的最先进的治疗方法就是一种被称内细胞浆内的精子注射的体外受精技术，在这种技术通过直接注射精子而使卵细胞受精，而该技术过程大大减少了存活精子的数量，使卵细胞受精机率大大减少。虽然理论上每个卵母细胞只需要一个精子，但是用目前的技术(如离心沉淀法和游离法处理分离)使找出最有存活力的精子的可行性仍具挑战性，或者在一些情况下仍是不可能的。这样，医生通常是通过手工分离死精子和细胞残骸来找到一个“好精子”(如，最具有能动性和突出结构)，即从数量极少的精子样品中或少量冷冻精液中(如，病人化疗前保存的精液中)分离出存活的精子，这一过程需要数小时才可能完成。因此从不育患者的低浓度精子样本或少量的冷冻精子样本中分离出活性精子具有临床上的极高价值。
技术实现思路
本技术目的在于技术一种方便从不育患者的低浓度精子样本或少量的冷冻精子样本中分离出活性精子的微流体分离芯片。本技术包括一水平的等径直管状主通道，在主通道的下方布置管状分离通道，所述分离通道的两端具有相同的内横截面积，所述分离通道的中-->部与主通道的中部连通，形成的直管状连通通道具有相同的内截面，所述连通通道的长度为500～10000μm，连通通道内竖向高度为5～1000μm。本技术利用层流原理，将被筛选的样本和稀释溶液分别从主通道和分离通道的同侧以各自的速度加入，在连通通道内形成上、下两种介质流。当主通道内具有一定的稳定流速时，无动能的死精、残骸，及能动低的精子则随上层介质流向主通道的另一端运动，而其中的具有动能的高质量活性精子则挣脱上层介质流，向下层介质流运动，同时这些高质量活性精子在下层介质流的流速作用下，向分离通道的另一端运动，实现活性精子的筛选。本技术可以将能动精子从常规精液样品以及用传统精子分离方法难以或不可能进行分离的样品中分离出来。本技术能够将能动精子从用传统的精子分离技术难以处理的微小样品中快速而简单地分离出来。本技术基于能动精子具有积极的动能，可以穿越层状流体中的流线体的能力，实现了将能动精子从非能动精子和其他的细胞残骸中分离开来的目的。整个分离筛选过程不会造成因分离而发生的死精，本技术能满足临床医学中微小精子分离的需要，也为基于精子能动性包括家庭式能动精子在内的能动性测试的生物鉴定打开了方便之门。本技术可应用于广泛的医学领域，还能应用于其它微生物的筛选。本技术主通道的两端分别为样本通道和筛离通道，为了保证主通道内能形成稳定的上层流速，样本通道和筛离通道内的横截面相同，且，样本通道和筛离通道内竖向高度小于连通通道内竖向高度。本技术分离通道的两端分别为溶液通道和筛选通道，同理，为了保证分离通道内能形成稳定的下层流速，溶液通道和筛选通道内的横截面相同，且溶液通道和筛选通道内竖向高度小于连通通道内竖向高度。本技术中，连通通道的内截面为矩形，样本通道、筛离通道、溶液通道和筛选通道的内截面分别为矩形。矩形的各通道是进一步确保层流的形-->成，确保高能动精子能从上层介质流向下层介质流运动。为了方便将样本、稀释溶液、两个分离收集器连接在本技术的端部，在样本通道、溶液通道、筛离通道和筛选通道的外端分别设置接头。为了更适合对精子的分离筛选，本技术中的样本通道、溶液通道、筛离通道和筛选通道内竖向高度分别为5～1000μm。附图说明图1为本技术的结构示意图。具体实施方式如图1所示，偏直管状主通道1的两端分别是样本通道1-1和筛离通道1-2，主通道1水平布置。在样本通道1-1的外端连接接头3，在筛离通道1-2的外端连接接头4。在主通道1的下方布置折成桥形的偏管状分离通道2，分离通道2的两端为溶液通道2-1和筛选通道2-2。在溶液通道2-1的外端连接接头5，在筛选通道2-2的外端连接接头6。分离通道2的中部与主通道1的中部连通，形成的直管状连通通道的内截面呈矩形。连通通道的长度可以为500～10000μm，连通通道内竖向高度可以为5～1000μm。样本通道1-1、溶液通道2-1、筛离通道1-2和筛选通道2-2内竖向高度分别可以为5～1000μm。本例中：样本通道1-1的管内高度H1为50μm，长度L1为500μm。筛离通道1-2的管内高度H2为50μm，长度L2为500μm。溶液通道2-1的管内高度H3为150μm，长度L3为2000μm。筛选通道2-2的管内高度H4为150μm，长度L4为2000μm。-->连通通道的管内高度H为200μm，长度L为7000μm。制作本技术的方法可以采用软平板印刷技术或激光光刻技术，将通道封在由玻璃覆盖的幻灯片上。应用事例：1、分别采集精液样品、备制1％的BSA溶液、精子染色剂PI。2、连接：将60μL的BSA溶液加入溶液稀释池，将溶液稀释池通过接头5与溶液通道2-1的下端密封连接。将50μL的洗过的精液样品与适量精子染色剂PI混合后，加入收集瓶通过接头3与样本通道1-1密封连接。将2μL的BSA溶液加入一个分离收集器，并将该分离收集器通过接头4密封连接在筛离通道1-2的外端。将另一个分离收集器通过接头6密封连接在筛选通道2-2的下端。3、分离：在溶液稀释池内采用正压力设备，或在与筛选通道2-2连接的分离收集器内采用负压设备，使主通道1内具有一定的稳定的流速压力。在样本通道1-1的外端采用正压力设备，或在筛离通道1-2外端采用负压设备，使分离通道2内具有一定的稳定的流速压力。通过相衬的显微镜可观察到部分活性精子从样本通道1-1，经连通通道游向筛选通道2-2。通过以上方法就可在与分离通道2连接的分离收集器内收集到活性、高动能精子。-->本文档来自技高网...

【技术保护点】
微流体分离芯片，其特征在于包括一水平的等径直管状主通道，在主通道的下方布置管状分离通道，所述分离通道的两端具有相同的内横截面积，所述分离通道的中部与主通道的中部连通，形成的直管状连通通道具有相同的内截面，所述连通通道的长度为５００～１００００μｍ，连通通道内竖向高度为５～１０００μｍ。

【技术特征摘要】
1、微流体分离芯片，其特征在于包括一水平的等径直管状主通道，在主通道的下方布置管状分离通道，所述分离通道的两端具有相同的内横截面积，所述分离通道的中部与主通道的中部连通，形成的直管状连通通道具有相同的内截面，所述连通通道的长度为500～10000μm，连通通道内竖向高度为5～1000μm。2、根据权利要求1所述微流体分离芯片，其特征在于主通道的两端分别为样本通道和筛离通道，样本通道和筛离通道内的横截面相同，且样本通道和筛离通道内竖向高度小于连通通道内竖向高度。3、根据权利要求2所述微流体分离芯片，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：阚延静，郭锡熔，窦修平，杨啸群，周传亮，彭宇竹，
申请(专利权)人：窦修平，
类型：实用新型
国别省市：32[中国|江苏]