一种小鼠蛲虫虫卵的DNA提取方法技术

本发明专利技术公开了一种小鼠蛲虫虫卵的DNA提取方法，涉及寄生虫检测技术领域。其包括如下步骤：将反复冻融后的小鼠蛲虫虫卵用消化酶进行消化，再使用有机溶剂抽提获得DNA。发明专利技术人创造性的提供了一种直接裂解小鼠蛲虫虫卵的DNA提取方法，无需消耗活体鼠，节约了动物成本，且操作简单，无需解剖等操作，只需收集小鼠蛲虫虫卵，直接反复冻融后，利用温度差裂解蛲虫虫卵较厚的卵壳，然后用消化酶进行消化，消化酶的主要作用是酶解膜蛋白以及与蛲虫核酸结合的组蛋白，使蛲虫的DNA游离在溶液中，便于后续用有机溶剂抽提获得高质量的DNA。

【技术实现步骤摘要】
一种小鼠蛲虫虫卵的DNA提取方法
本专利技术涉及寄生虫检测
，具体而言，涉及一种小鼠蛲虫虫卵的DNA提取方法。
技术介绍
小鼠蛲虫为小鼠常见肠道寄生虫，属于蠕虫一种，GB14922.1-2001《实验动物寄生虫学等级及监测》将全部蠕虫列为实验小鼠必检项目，蛲虫也在其列。实验小鼠感染蛲虫，不仅对小鼠自身健康状况、科学实验产生干扰，同时可能对实验人员的人身健康造成威胁，因此在实验动物的饲养和实验过程中，检测蛲虫感染异常重要。目前，小鼠蛲虫检测方法主要有以下方法：(1)GB/T18448.6-2001《实验动物蠕虫检测方法》中列举了粪便检测(饱和盐水漂浮法、沉淀集卵法)、透明胶纸粘取、解剖检测、直接涂片等方法，王彦平等(1996)利用以上几种方法进行检测，结果显示单纯利用透明胶纸粘取检出率为31.5％-40％，进而配合采用粪便检测的方法，检出率提高至60％，再配合解剖检测，检出率提高至90％，表明以上几种检测方法单独的检出率差异较大，配合使用可能得到较高的检出率，但其操作复杂程度和耗时将增加，且消耗的活体鼠较多，不适合大批量的样品检测。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种小鼠蛲虫虫卵的DNA提取方法，其特征在于，其包括如下步骤：将反复冻融后的小鼠蛲虫虫卵用消化酶进行消化，再使用有机溶剂抽提获得DNA。/n

【技术特征摘要】
1.一种小鼠蛲虫虫卵的DNA提取方法，其特征在于，其包括如下步骤：将反复冻融后的小鼠蛲虫虫卵用消化酶进行消化，再使用有机溶剂抽提获得DNA。


2.根据权利要求1所述的小鼠蛲虫虫卵的DNA提取方法，其特征在于，所述反复冻融是指：将小鼠蛲虫虫卵置于液氮中冷冻，取出后置于50-65℃下热浴，重复冷冻和热浴步骤4-50次。


3.根据权利要求2所述的小鼠蛲虫虫卵的DNA提取方法，其特征在于，所述冷冻的时间为10-600s；优选地，所述热浴时间为10-600s。


4.根据权利要求3所述的小鼠蛲虫虫卵的DNA提取方法，其特征在于，所述热浴为恒温浴；优选地，所述恒温浴为恒温水浴或恒温金属浴。


5.根据权利要求1所述的小鼠蛲虫虫卵的DNA提取方法，其特征在于，所述消化酶为丝氨酸蛋白酶；优选地，所述丝氨酸蛋白酶选自糜蛋白酶、胰蛋白酶、弹性蛋白酶或蛋白酶K；
优选地，每个待消化样本中添加浓度为8-10mg/ml蛋白酶K的添加量为5-10ul/样；优选地，在消化酶消化时加入Ta...

【专利技术属性】
技术研发人员：常瑶，陈晓峰，杨莉莉，杨慧欣，赵静，
申请(专利权)人：江苏集萃药康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32