【技术实现步骤摘要】
一种同时提取DNA和RNA的试剂盒及其使用方法
本专利技术涉及基因工程领域,具体涉及一种同时提取DNA和RNA的试剂盒及其使用方法。
技术介绍
DNA和RNA统称为核酸,核酸是分子生物学研究与应用中最基本的研究检测对象,如何获得高质量的核酸已成为重要且基本的实验技术。目前的技术路线都是针对单独提取DNA或RNA的,如果要同时提取DNA与RNA就必须要把实验材料一分为二来进行。目前用于核酸提取的技术主要包括:酚氯仿萃取法、硅胶柱分离法、盐析法和磁珠法。这些技术基本上都只能提取DNA或RNA,不能使用同一份样品同时提取到DNA和RNA。用于提取RNA的经典方法TRIzol法目前是同时提取DNA与RNA最常用的方法。所谓TRIzol法,即“胍-酚-氯仿”法,是把胍盐与苯酚配成单一溶液,细胞裂解后游离出核酸,再加入氯仿提取,经离心后水相与有机相分离,RNA存在于水相中,DNA存在于有机相中,进而到达同时提取DNA和RNA的效果。这种方法操作复杂,而且苯酚、氯仿等都是有毒的有机溶剂,既不环保也无法实现高通量自动化提取。 ...
【技术保护点】
1.一种同时提取DNA和RNA的试剂盒,其特征在于,包括以下试剂:细胞裂解液、核酸结合液、核酸吸附材料、洗脱液A、去蛋白漂洗液、去盐分漂洗液和洗脱液B。/n
【技术特征摘要】
1.一种同时提取DNA和RNA的试剂盒,其特征在于,包括以下试剂:细胞裂解液、核酸结合液、核酸吸附材料、洗脱液A、去蛋白漂洗液、去盐分漂洗液和洗脱液B。
2.根据权利要求1所述试剂盒,其特征在于,所述细胞裂解液包含以下成分:表面活性剂1~20%(v/v)、蛋白变性剂1~5mol/L、核酸酶抑制剂0.1~1mol/L、pH稳定剂0.1~1mol/L。
3.根据权利要求2所述试剂盒,其特征在于,所述表面活性剂为十二烷基肌氨酸钠、十二烷基苯磺酸钠、十六烷基三甲基溴化铵、曲拉通X-100、吐温20中的至少一种;
所述蛋白变性剂为盐酸胍、异硫氰酸胍或尿素中的至少一种;
所述核酸酶抑制剂为乙二胺四乙酸、乙二醇-双-(2-氨基乙醚)四乙酸、巯基乙醇、TCEP或者二硫苏糖醇中的至少一种;
所述的pH稳定剂为三羟甲基氨基甲烷、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、3-吗啉丙磺酸、N-三(羟甲基)甲基甘氨酸中的至少一种。
4.根据权利要求1所述试剂盒,其特征在于,所述核酸结合液为含胍盐的溶液、醇溶液中的至少一种;所述含胍盐的溶液中胍盐的浓度为0.1~8mol/L,所属醇溶液中醇的体积百分比为40~80%。
5.根据权利要求4所述试剂盒,其特征在于,所述胍盐为盐酸胍、异硫氰酸胍中的至少一种,所述胍盐的浓度为1~4mol/L;
所述醇溶液中的醇为乙醇、聚乙二醇或异丙醇,所述醇溶液中醇的体积百分比为40~60%。
6.根据权利要求1所述试剂盒,其特征在于,所述核酸吸附材料为硅质纯化柱或二氧化硅四氧化三铁纳米磁珠。
7.根据权利要求1所述试剂盒,其特征在于,所述洗脱液A为含氯化物...
【专利技术属性】
技术研发人员:卢秀劲,王小芳,
申请(专利权)人:广州捷倍斯生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:广东;44
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