一种生物样品核酸保护液及应用制造技术

本发明专利技术涉及一种生物样品核酸保护液及应用，属于核酸保存技术领域。本发明专利技术的生物样品核酸保护液，包括以下成分：核酸酶抑制剂、表面活性剂、渗透剂、螯合剂及还原剂。本发明专利技术的生物样品核酸保护液能够迅速抑制细胞内与外部环境中可能存在的核酸酶活性，防止生物样品中的核酸降解，起到高效地实现保护生物样品核酸的作用，同时其胍盐含量低，避免了因市保面上胍盐紧缺影响病毒采样护液生产的问题。盐紧缺影响病毒采样护液生产的问题。盐紧缺影响病毒采样护液生产的问题。

【技术实现步骤摘要】
一种生物样品核酸保护液及应用


[0001]本专利技术属于核酸保存
，具体涉及一种生物样品核酸保护液及应用。

技术介绍

[0002]核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，根据化学组成不同，核酸可分为核糖核酸(简称RNA)和脱氧核糖核酸(简称DNA)。核酸在生物体内是能够稳定存在的，但是立体后由于核酸酶的释放，很容易引起核酸降解。
[0003]随着现代医学技术的进步，分子疾病诊断应用的越来越多，核酸作为分子疾病诊断的标靶，提取以及保存的需求也越来越大。因此保证临床样品，如痰液、口腔拭子或鼻腔拭子等的核酸样品的稳定尤为关键。
[0004]目前比较常用的方法是使用高浓度的超离序盐，如异硫氰酸胍、尿素等作为核酸酶的稳定剂。而胍盐作为有毒化学品，特别是盐酸胍与异硫氰酸胍，生产的厂家较少。像2020年的新冠肺炎疫情的突然爆发，就会导致市面上异硫氰酸胍严重紧缺，严重影响病毒采样保护液的生产，因此，专利技术一种不含胍盐或含胍盐量低的生物样品核酸保护液显得十分必要。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于克服现有技术存在的不足而提供一种含胍盐量低、高效保护核酸稳定的生物样品核酸保护液及应用。
[0006]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：
[0007]一种生物样品核酸保护液，包含以下成分：核酸酶抑制剂0.1-5mol/L、表面活性剂0.1-10g/L、渗透剂10～500g/L、螯合剂1～100g/L、还原剂1～100g/L；
[0008]其中所述核酸酶抑制剂为尿素或异硫氰酸胍中的至少一种。
[0009]上述成分中，核酸酶抑制剂可以使核酸酶等蛋白质变性失活，进而抑制酶降解生物样品中的核酸，起到保护生物样品核酸的作用；表面活性剂主要起到裂解细胞的作用，细胞裂解后可让核酸酶与核酸酶抑制剂快速结合，产生作用。渗透剂可辅助表面活性剂，使其可快速渗透到细胞内部，从而加快细胞裂解速度；还原剂而起到快速抑制核酸酶活性的作用。
[0010]优选的，所述核酸酶抑制剂为尿素或异硫氰酸胍中的至少一种。
[0011]尿素能非常有效地使蛋白质变性，尤其能非常有效地破坏非共价键结合的蛋白质。异硫氰酸胍用于变性裂解细胞，并使DNA酶和RNA酶失活。
[0012]优选的，所述核酸酶抑制剂中尿素的浓度为1～5mol/L；所述核酸酶抑制剂中异硫氰酸胍的浓度为0.1～2mol/L。
[0013]更优选的，所述核酸酶抑制剂中尿素的浓度为3～5mol/L；所述核酸酶抑制剂中异硫氰酸胍的浓度为0.1～0.8mol/L。
[0014]该优选比例经过专利技术人大量研究和实验总结得出，在尽量减少胍盐含量的同时，
抑制核酸酶活性，保证生物样品中核酸的稳定性。
[0015]优选的，所述生物样品核酸保护液，包含以下重量份成分：包含以下成分：核酸酶抑制剂0.1-5mol/L、表面活性剂0.5-5g/L、渗透剂30～150g/L、螯合剂1～ 40g/L、还原剂1～40g/L。
[0016]优选的，所述表面活性剂为十二烷基肌氨酸钠、3-磺丙基十四烷基二甲基甜菜碱或曲拉通X-100中的至少一种。
[0017]优选的，所述渗透剂为硫酸铵、氯化铵或硫酸铝铵中的至少一种。
[0018]优选的，所述螯合剂为柠檬酸钠、乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸二钾中的至少一种。
[0019]螯合剂可以配合核酸酶抑制剂的作用，抑制核酸酶的活性，从而在减少使用胍盐的同时保护核酸的稳定性。
[0020]优选的，所述还原剂为二硫苏糖醇、巯基乙醇或三膦盐酸盐中的至少一种。
[0021]该系列还原剂能够破迅速坏蛋白质的二硫键，从而进一步快速抑制核酸酶的活性。
[0022]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为:
[0023](1)本专利技术的生物样品核酸保护液中含有少量或不含胍盐，既减少了保护液的毒性，也避免了因市面上胍盐产量少影响生产的问题。
[0024](2)本专利技术的生物样品核酸保护液通过各成分的协同作用，能够迅速抑制细胞内与外部环境中可能存在的核酸酶活性，防止生物样品中的核酸降解，可以稳定保存各种生物样品中的核酸，包括口腔拭子、唾液等样品。
附图说明
[0025]图1为口腔拭子的提取的DNA进行凝胶电泳的结果示意图；
[0026]图2为新鲜人唾液提取的DNA进行凝胶电泳的结果示意图；
[0027]图3为37℃条件下使用本专利技术的核酸保护液样品进行凝胶电泳的结果示意图。
具体实施方式
[0028]为了更好地说明本专利技术的目的，技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本专利技术做进一步的说明。
[0029]实施例1
[0030]一种生物样品核酸保存液，由下述含量的下述组分组成：异硫氰酸胍60g/L、十二烷基肌氨酸钠4g/L、乙二胺四乙酸二钠8g/L、氯化铵80g/L、巯基乙醇3％ (V/V)、柠檬酸钠3g/L和余量的水。
[0031]实施例2
[0032]一种生物样品核酸保存液，由下述含量的下述组分组成：尿素180g/L、3
-ꢀ
磺丙基十四烷基二甲基甜菜碱3g/L、乙二胺四乙酸二钾12g/L、硫酸铵132g/L、三膦盐酸盐2g/L、柠檬酸钠7g/L和余量的水。
[0033]实施例3
[0034]一种生物样品核酸保存液，由下述含量的下述组分组成：尿素60g/L、异硫氰酸胍
60g/L、曲拉通X-100 3g/L、乙二胺四乙酸6g/L、硫酸铵70g/L、硫酸铝铵30g/L、二硫苏糖醇5g/L、柠檬酸钠5g/L和余量的水。
[0035]实施例4
[0036]一种生物样品核酸保存液，由下述含量的下述组分组成：尿素60g/L，异硫氰酸胍60g/L、曲拉通X-100 3g/L、乙二胺四乙酸1g/L、硫酸铵10g/L、二硫苏糖醇1g/L、柠檬酸钠5g/L,余量为水。
[0037]实施例5
[0038]一种生物样品核酸保存液，由下述含量的下述组分组成：尿素180g/L、3
-ꢀ
磺丙基十四烷基二甲基甜菜碱3g/L、乙二胺四乙酸二钾100g/L、硫酸铵500g/L、三膦盐酸盐100g/L、柠檬酸钠7g/L和余量的水。
[0039]实施例6
[0040]一种生物样品核酸保存液，由下述含量的下述组分组成：异硫氰酸胍60g/L、十二烷基肌氨酸钠0.1g/L、乙二胺四乙酸二钠40g/L、氯化铵30g/L、巯基乙醇40g/L和余量的水。
[0041]实施例7
[0042]一种生物样品核酸保存液，由下述含量的下述组分组成：异硫氰酸胍60g/L、十二烷基肌氨酸钠10g/L、乙二胺四乙酸二钠40g/L、氯化铵150g/L、巯基乙醇 40g/L和余量的水。
[0043]实施例8
[0044]一种生物样品核酸保存液，由下述含量的下述组分组成：异硫氰酸胍60g/L、十二烷基肌氨酸钠0.5g/L、乙二胺四乙酸二本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生物样品核酸保护液，其特征在于，包含以下浓度的成分：核酸酶抑制剂0.1-5mol/L、表面活性剂0.1-10g/L、渗透剂10～500g/L、螯合剂1～100g/L、还原剂1～100g/L；其中所述核酸酶抑制剂为尿素或异硫氰酸胍。2.根据权利要求1所述生物样品核酸保护液，其特征在于，所述核酸酶抑制剂中尿素的浓度为1～5mol/L；所述核酸酶抑制剂中异硫氰酸胍的浓度为0.1～2mol/L。3.根据权利要求2所述生物样品核酸保护液，其特征在于，所述核酸酶抑制剂中尿素的浓度为3～5mol/L；所述核酸酶抑制剂中异硫氰酸胍的浓度为0.1～0.8mol/L。4.根据权利要求1所述生物样品核酸保护液，其特征在于，包含以下浓度的成分：核酸酶抑制剂0.1-5mol/L、表面活...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢秀劲，
申请(专利权)人：广州捷倍斯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：