一种新的多肽——高尔基体运输蛋白-27.61和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人ｇａｍｍａ－ｃｏｐ蛋白２７．６１，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人ｇａｍｍａ－ｃｏｐ蛋白２７．６１的多核苷酸的用途。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人gamma-cop蛋白-27.61(高尔基体运输蛋白)，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。内质网里合成蛋白质是通过高尔基体运载小泡运输至血浆膜表面的(Rothman，J.et al.，1992，Natrure，355，409-415)。高尔基运载小泡来源于带有细胞溶胶和ATP的高尔基膜孵化(Orci，L.et Al.，1986，Cell，46，171-184)。这些运载小泡就叫COPI-包被小泡，它们的直径一致大约为75纳米并且包含一个有细毛的蛋白质外被。其外被蛋白包括外被体和ADP-核糖基化因子两部分(Serafini，T.etal.，1991，Nature，349，215-220)。外被体是一个蛋白质复合体，由7个亚基组成，分别是α、β、β、γ、δ、ε，ζ-COP。外被体以可溶的形式存在于细胞质中，当COPI包被小泡形成时，外被体就聚集到高尔基膜上(Palmer，D.etal.，1993，J.Biol.Chem.268，12083-12089)。哺乳动物和酵母细胞的外被体在体内结合一些融合蛋白，这些融合蛋白包含dilysine基元，该基元是内质网膜蛋白在细胞质中的典型尾部(Cosson，P.et al.，1994，Science，263，1629-1631)。该KKXX基元位于C末端，作为膜蛋白从内质网到后内质网的运输信号G(Gaynor，E.C.etal.，1994，Cell Biol.127，653-655)。COPI包被小泡所包被的膜蛋白是P23和P24家族。P24家族蛋白质包括一个大的luminal结构域，一个单独的转膜结构域和一个短的胞质尾巴。COPI包被小泡的外被体能与所有的内质网提取基元以及P24家族成员的二苯胺基元结合(Sohn，K.etal.，1996，J.Cell Biol，135，1239-1248)。这表明包被复合体参与了蛋白质的逆行转运(Cosson，P.et al.，1994，Science，263，1629-1631)。在外被体与P23结合过程中，γ-COP是与P23特异性结合的外被体亚基。并且，Wbp1p和P23胞质尾巴分享一个共同的γ-COP结合位点。上文所提的融合蛋白中的KKXX基元也是和γ-COP结合的。γ-COP是唯一的外被体标记蛋白，不仅是因为它与P23多肽结合，还因为它在琼脂糖颗粒表面和膜的细胞质结构域模拟突起中所表现的独立方式。γ-COP基因编码一个874个氨基酸的蛋白质，分子量为97,385。γ-COP可能功能就是与KKXX基元结合调节膜蛋白到COPI包被小泡的逆行性分装。通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本专利技术的多肽的表达谱与人gamma-cop蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本专利技术被命名为人gamma-cop蛋白27.61。由于如上所述人gamma-cop蛋白27.61蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人gamma-cop蛋白27.61蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人gamma-cop蛋白27.61蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人gamma-cop蛋白27.61以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人gamma-cop蛋白27.61的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人gamma-cop蛋白27.61的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人gamma-cop蛋白27.61的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人gamma-cop蛋白27.61的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人gamma-cop蛋白27.61的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人gamma-cop蛋白27.61异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO1中11-766位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-1215位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人gamma-cop蛋白27.61蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人gamma-cop蛋白27.61蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人gamma-cop蛋白27.61表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人ｇａｍｍａ－ｃｏｐ蛋白２７．６１，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]