一种新的多肽－人糖蛋白42和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－－人糖蛋白４２，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人糖蛋白４２的多核苷酸的用途。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人糖蛋白42，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。
技术介绍
糖类，蛋白，脂类是细胞膜的主要组分，其中，跨膜的糖蛋白在反应的催化，分子的膜内外传递，胞内信号的接受传输，酶作用物的膜定位，组织识别标记等方面有着重要作用。糖蛋白是可从很多病毒反应中获得的抗原，糖蛋白及其抗体可以在对很多病毒引起的疾病诊断和治疗中起作用，如人获得性免疫缺乏综合症(AIDS)。在病理学对人免疫缺乏病毒(HIV)对人体感染的过程的研究中，发现了外膜糖蛋白对此过程的重要作用。无论在病毒侵入过程还是引发的细胞病理效应中，外膜糖蛋白都是重要的影响因素，但具体的机制尚不清楚。有四种外膜糖蛋白(gp300，gp140，gp125，gp36)在人的受HIV-2感染的细胞中能被检测到。(J Virol 1989 Feb；63(2)647-58)目前的研究发现了三个抗原决定簇，有两个分别位于gp125糖蛋白的可变区2(V2)和可变区4(V4)，有一个位于gp36糖蛋白上。这三个抗原决定簇是人抗体的结合位点，也是抑制作用的靶位点。(Viral Immunol 1999；12(1)79-88)目前在鼠和犬科动物组织中发现了一种糖蛋白，经研究这种糖蛋白有抗原和流行性感冒病毒受体的功能，此糖蛋白分子量为36kDa，因此被定义为gp36糖蛋白，gp36糖蛋白在肺，胎盘，骨骼肌等组织中广泛表达。在人胎盘组织的RNA中也发现了一条编码有162个氨基酸的多肽的多核苷酸，其功能被推测与gp36糖蛋白类似。(BioChem J 1999 Jul 15；341(Pt 2)277-84)根据氨基酸同源比较的结果，本专利技术的多肽被推断鉴定为一种新的人糖蛋白42(HGP42)。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人糖蛋白42以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人糖蛋白42的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人糖蛋白42的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人糖蛋白42的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人糖蛋白42的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人糖蛋白42的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人糖蛋白42异常相关的疾病的方法。在本专利技术的第一方面，提供新颖的分离出的人糖蛋白42，该多肽是人源的，它包含具有<210>2氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物、类似物。较佳地，该多肽是具有<210>2氨基酸序列的多肽。在本专利技术的第二方面，提供编码分离的这些多肽的多核苷酸，该多核苷酸包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少69％相同性(a)编码上述人糖蛋白42的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地，该多核苷酸编码具有<210>2所示氨基酸序列的多肽。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有<210>1中26-1174位的序列；和(b)具有<210>1中1-2430位的序列。在本专利技术的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的载体，以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。如本专利技术所用，“分离的”是指物质从其原始环境中分离出来(如果是天然的物质，原始环境即是天然环境)。如活体细胞内的天然状态下的多聚核苷酸和多肽是没有分离纯化的，但同样的多聚核苷酸或多肽如从天然状态中同存在的其他物质中分开，则为分离纯化的。如本文所用，“分离的”是指人糖蛋白42基本上不含天然与其相关的其它蛋白、脂类、糖类或其它物质。本领域的技术人员能用标准的蛋白质纯化技术纯化人糖蛋白42。基本上纯的多肽在非还原聚丙烯酰胺凝胶上能产生单一的主带。人糖蛋白42多肽的纯度能用氨基酸序列分析。本专利技术提供了一种新的多肽——人糖蛋白42，其基本上是由SEQ ID NO2所示的氨基酸序列组成的。本专利技术的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。本专利技术的多肽可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主，本专利技术的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本专利技术的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。本专利技术还包括人糖蛋白42的片段、衍生物和类似物。如本专利技术所用，术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本专利技术的人糖蛋白42相同的生物学功能或活性的多肽。本专利技术多肽的片段、衍生物或类似物可以是(I)这样一种，其中一个或多个氨基酸残基被保守或非保守氨基酸残基(优选的是保守氨基酸残基)取代，并且取代的氨基酸可以是也可以不是由遗传密码子编码的；或者(II)这样一种，其中一个或多个氨基酸残基上的某个基团被其它基团取代包含取代基；或者(III)这样一种，其中成熟多肽与另一种化合物(比如延长多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合；或者(IV)这样一种，其中附加的氨基酸序列融合进成熟多肽而形成的多肽序列(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列)通过本文的阐述，这样的片段、衍生物和类似物被认为在本领域技术人员的知识范围之内。本专利技术提供了分离的核酸(多核苷酸)，基本由编码具有<210>2氨基酸序列的多肽的多核苷酸组成。本专利技术的多核苷酸序列包括<210>1的核苷酸序列。本专利技术的多核苷酸是从人胎脑组织的cDNA文库中发现的。它包含的多核苷酸序列全长为2430个碱基，其开放读框(26-1174)编码了382个氨基酸。根据氨基酸序列同源比较发现，此多肽与人逆转录酶相关蛋白有53％的同源性，本专利技术的多核苷酸可以是DNA形式或是RNA形式。DNA形式包括cDNA、基因组DNA或人工合成的DNA。DNA可以是单链的或是双链的。DNA可以是编码链或非编码链。编码成熟多肽的编码区序列可以与<210>1所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本专利技术所用，“简并的变异体”在本专利技术中是指编码具有<210>2的蛋白质或多肽，但与<210>1所示的编码区序列有差别的核酸序列。编码<210>2的成熟多肽的多核苷酸包括只有成熟多肽的编码序列；成熟多肽的编码序列和各种附加编码序列；成熟多肽的编码序列(和任选的附加编码序列)以及非编码序列。术语“编码多肽的多核苷酸”是指包括编码此多肽的多核苷酸和包括附加编码和/或非编码序列的多核苷酸。本专利技术还涉及上述描述多核苷酸的变异体，其编码与本专利技术有相同的氨基酸序列的多肽或多肽的片断、类似物和衍生物。此多核苷酸的变异体可以本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人糖蛋白４２，其特征在于它包含有：〈２１０〉２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]