一种二维阵列液相色谱-质谱联用方法技术

本发明专利技术涉及一种高效、高通量的二维阵列液相色谱－质谱联用方法，被分析样品经第一维色谱的分离之后，进入第二维进行进一步的高效分离；第一维经单一色谱柱流出的流分经接口进入第二维色谱；第二维流动相经色谱泵打出后通过接口由分流装置分流，打入第二维色谱柱中；第二维色谱柱采用阵列模式，且阵列中每根色谱柱以同样的色谱条件进行同步分离；第二维每根色谱柱的出口与多通道检测器的一个通道相连，进行同步高灵敏检测。本发明专利技术的优点为：系统峰容量大，分离效率高；检测灵敏，在线定性简单；系统设计简单，可商品化前景大；分析对象范围广泛。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及复杂样品的多维液相色谱分析技术，具傳:地说是一种二维阵列液 相色谱-质谱联用方法。
技术介绍
近年来随着研究的深入，人们已经认识到了复杂样品中很多难检测到的微量 组分可能扮演着重要角色，所以复杂样品(如生物样品、环境样品、天然草药等) 的全成分分析就成为了分析化学领域研究的热点和难点。多维色谱技术被公认为 有着强大的分离能力。作为其中较成熟的技术，全二维气相色谱为挥发性复杂样品的全成分分析提供了强大的技术支撑(Tranchi(K R Q.; Dugo， P.; Dugo，G; Mondello, L. J. Chromatogr" A 2004,1054,3-16; Dalliige， J.; Beens， J.; Brinkm叫UAT. J.Chromatogr.，A2003， 1000,68-108)。相比之下，二维液相色谱虽然具有更大的应 用领域，但因液相色谱的分析速度和柱效都远不及气相色谱，使LCxLC的研究 一直没有取得令人振奋的进展(KimuraJI; Tanigawa^ T.; Morisak^ H.; Ikegami， T.; Hosoya^ K.; Ishizuka^ N.; Minakuchi, H.; Nakanishi, K.; Ueda^ M.; Cabrera^ K.; Tanaka^ N. J却.5b: 2004， 27， 897-904 )。在全二维液相色谱中，为了保证在下一个流分注入之前当前的分析能完成， 第二维的分析逸变必须很快。所以在这种理念的指导下，目前大家普遍关注的研 究热点是如何在现存的全二维模式的基础上实现第二维的高速分离。短柱 (Opit喊G J.; Joigenson, J. W.; Anderegg, R. J.爿加/.Oz缀1997， 69, 2283-2291; Opiteckj G J.; Ramirez^ S. M.; Joigenson， J. W.; Moseley, M. A.爿ra/. 1998， 258, 349-361; Wagner， K.; Mliotis, T.; Marko-Vaiga^ G; Bischoff, R.; Unger, K. K. 爿脂/.02缀2002， 74, 809-820)、整体柱(Kim叫H.; Tanigaw^ T.; Mori我H.; Dcegami, T.; Hosoya^ K.; Ishizuka^ N.; Minakuchi, H.; Nakanishi, K.; Ueda^ M.; Cabrera^ K.; Tan麵N. / 2004， 27,897-904 )、高温HPLC (Stoll， D. R.; Carr, P. W. /爿肌C&m. &c. 2005， 127， 5034-5035 )相继被采用，不可否认它们为LC x LC注入 了新的元素，但很短的分离时间限制了他们的分离能力。为了从根本上提高二维 液相色谱的分离能力，就应该适当提高第二维的分析时间，增加第二维的色谱柱长，但这些都与传统二维第二维的快速分离理念相违背，也是传统全二维液相色谱《,做到的。
技术实现思路
为了克服传统体系存在的主要问题，本专利技术将如何实现高峰容量与高分l腿度的有效结合作为首要出发点。本专利技术的系统峰容量大，分离效率高；检测灵敏，在线定性简单；系统设计简单，可商品化前景大；分析对象范围广泛。 为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案为，被分析样品经第一维色谱的分离之 后，进入第二维进行进一步的高效分离；第一维经单一色谱柱流出的流分经接口进入第二维色谱；第二维流动相经色谱泵打出后通过接口由分流装置分流，打入 第二维色谱柱中；第二维色谱柱采用阵列模式，且阵列中每根色谱柱以同样的色 谱条件进行同步分离;第二维每根色谱柱的出口与多通道检测器的一个通道相连， 进行同步高灵敏检测。所述的第一维色谱可以为反相色谱、体积排阻色谱、离子交换色谱或亲和色 谱等几乎所有类型的色谱;接口可以是样品存储环、富集柱或三通阀等；第二维色谱柱阵列由两根或两根以上的相同或不同的色谱柱组成;第二维色谱柱釆用与第一维分离机理不同的填料，它也可以包括反相色谱、体积排阻色谱 等很多类型的色谱。其中的色谱柱阵列中的色谱柱可以是相同填料，也可以是不 同填料。但均釆用同样的洗脱条件进行同步分离；最好应第二维色谱柱阵列中每 根色谱柱所处通道的阻尼相同；本专利技术第二维色谱泵出口采用分流技术，保证各 个通道流动相组成与流速完全相等。所述的检测器是多通道检测器，可以包括多通 谱检测器、多通道紫外检 测器、多通道蒸发光散射检测器等。本专利技术二维阵列液相色谱-质谱联用技术(2D-Airay-HPLC/MS )采用的是 "l+n" (n>=l)的二维柱模式，'T，指的是第一维釆用一根常规色谱柱，"n"指 的是第二维釆用n根与第一维分离机理正交的普通色谱柱釆用同样的梯度洗脱、 同步分离，在高效的二维分离之后，分别釆用一个n通道的UV和MS检测器对 n组流出物同步进行检测。本专利技术的有益玄i^是1. 第二维色谱柱可以采用各种市售或自制的色谱柱，来源简单。2. 由于第二维采用色谱柱阵列，因此可以适当增加第二维的分析时间，提 高系统峰容量，增加分离能力。3. 采用阵列柱和多通道检测器，可以在增加系统分离能力的基础上，减少 第二维的色谱泵个数、检测器个数，使系统构造简单。4. 采用多种检测器同步检测，可以在最大程度上保证色谱的分离信息不丢失，增加系统峰容量。5.适用范围广，可用于各种复杂样品的高效分离分析。附图说明图1为二维阵列液相色谱设计框图。图中1为第一维的色谱泵(pump 1 )， 2为进样器(injector )， 3为第一维的色谱柱(column 1 )， 4为接口装置(interface )， 5为第二维的色谱泵(pump 2)， 6为分流装置(splitter) ,7为第二维的色谱柱阵 列(columns array) ,8为多通道的质谱检测器(multi~channel MS detector) ,9为多 通道的紫夕卜检测器(multi-channelUVdetector) ,IO为工作站(computer)。具体实施例方式下面通过实例对本专利技术给予进一步的说明，当然，本专利技术不仅限于下述的实 施例。实施例1二维阵列液相色谱-质谱联用技术分析传统中药藏茵陈甲醇提取液的氯仿萃 取部位。本试验第一维釆用CN柱(250x4.6mm)，第二维采用C18柱(150x2.1mm)， 两维均釆用乙腈(B沐水《5。/。甲酸(A)的梯度洗脱。由于实验室硬件有限，目前 采取的是离线的"1+4"模式的2D"Airay-HPLC/MS。即第一维釆用一根氰基柱， 第二维采用四根C18柱。其中第一维的色谱条件是15%B在72min内线性升至 75%B,流it^ lmL/min,检测波长是254nm。第二维的色谱条件是15%B在20min 内线性升至39T。B，然后在30min内线性升至60。/。B，最后在10min内线性升至 75%B,流逸是0.211117111111,采用全波长扫描，监测波长是254nm。第二维的质谱 条件是喷雾气压力35.0p本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种二维阵列液相色谱－质谱联用方法，其特征在于：被分析样品经第一维色谱的分离之后，进入第二维进行进一步的高效分离；第一维经单一色谱柱流出的流分经接口进入第二维色谱；第二维流动相经色谱泵打出后通过接口由分流装置分流，打入第二维色谱柱中；第二维色谱柱采用阵列模式，且阵列中每根色谱柱以同样的色谱条件进行同步分离；第二维每根色谱柱的出口与多通道检测器的一个通道相连，进行同步高灵敏检测。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：梁鑫淼，刘艳明，徐青，薛兴亚，章飞芳，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：91[中国|大连]