一种快速检测蔬菜综合毒性的方法技术

本发明专利技术涉及一种快速检测蔬菜综合毒性的方法，属于食品安全检测技术领域，所述的发光细菌检测法，包括如下步骤：１）发光细菌的准备，２）制备测试用菌液，３）选取蔬菜样品，４）进行发光检测，５）发光强度的计算，６）蔬菜食用安全性结果评价。经过发光细菌的准备和样品的预处理，随后进行发光检测，由此判断样品是否存在生物毒性。发光细菌菌种采用青海弧菌Ｑ６７菌株，菌株的斜面菌种，移接到新鲜斜面上，２０－２２℃培养１２－１４ｈ，此时细菌发光明亮，然后进行发光检测，相对发光强度的计算，蔬菜食用安全性结果评价。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，属于食品安全检测技 术领域。
技术介绍
"民以食为天，食以安为先"。当前，蔬菜时常受农药、重金属和未 知毒物的污染，因此，蔬菜食用安全性问题尤为引人关注。通过互联网搜索，与"食用蔬菜农药中毒"有关的信息有近97万多 项。由于中国农业的特殊性，蔬菜生产与流通的安全性控制问题呈现基础 薄弱，面大点多的特点。目前，安全控制监测方法的关键技术，以气相、液相色谱以及分光光 度计仪器分析为主，可检出样品中的痕量污染物，但是存在着操作复杂、 时间长、成本较高等问题，不适于蔬菜生产和流通过程中的现场监测，也 无法对污染物质进行生物危害性评估。一些具有遗传毒性的污染物质逐渐被人们认识；同时，对由多个污染 因子引起的食物综合生物毒性也引起了人们的关注。还有类似"苏丹红一 号"食品安全危机的出现，对现有蔬菜食用安全监测手段提出挑战，当前 只检测蔬菜中已知有毒有害物质，而对未知有毒有害物质就无能为力，尤 其对于由多种有毒有害物质共存时产生的综合生物毒性缺乏有效的快速 检测方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种快速检测蔬菜综合毒性的发光细菌检测 法，本方法用于蔬菜生产和流通过程中进行安全性快速检测，从样品取样 处理直到检测结果出来，不超过1小时。为达到上述目的，本专利技术的技术方案是采用发光细菌检测法，来判 定所测样品是否含有毒性物质及其综合毒性的程度，给出可否安全食用的 结论。所述的发光细菌检测法，包括如下步骤l)发光细菌的准备，2制 备测试用菌液，3)选取蔬菜样品，4)进行发光检测，5)发光强度的计算，6)蔬菜食用安全性结果评价。经过发光细菌的准备和样品的预处理，随后进行发光检测，由此判断样品是否存在生物毒性。采用发光细菌检测法，适用于蔬菜上市之前的安全性检测，对所检样 品做出生物毒性的综合判断(有毒、无毒或者可疑等)。以下对如下歩骤进行说明1) 发光细菌的准备，发光细菌菌种采用青海弧菌Q67菌株(W^r" ^'/ ^ si'e7^^s Q67)，其培养基成分，包括MgS04 2. 47g ， MgC030. 79g ， MgBr2 0. 09g , MgCl2 0. 109g ， CaC03 0. 103g ， KC1 0. 122g ， NaCl 8. 29g ，Mg(HC03)2 0. 50g ，酵母膏5g ，胰胨5g ，甘油3g ，琼脂20g， 溶于1000mL蒸馏水中，于121"灭菌20min，制成斜面，贮于4"C冰箱备 用。2) 用上述青海弧菌Q67菌株的斜面菌种，移接到新鲜斜面上，20-22 。C培养12-14h，此时细菌发光明亮，用10ml生理盐水(0. 85%Nacl溶液)将菌苔从斜面上轻柔冲刷下来，摇匀，用少量生理盐水调整菌液浓度，使 菌液浓度0D660"0. 3左右，取O. lml菌液，加入置有2ml生理盐水的样品测试管中，用测光仪检测发光。3) 蔬菜样品的准备取有代表性蔬菜样品50g，叶菜类蔬菜取叶片部位，瓜果类蔬菜用削皮刀取表皮部位，操作者需戴无菌手套，用50ml无 菌生理盐水浸泡15min，用旋涡震荡器震荡lmin，，取上清液备用，对照 选用同类无污染蔬菜50g，用上述样品处理方法同样处理备用。4) 发光检测。准备好三个测试杯，每个小杯各平行样，对照也取三个 测量杯，各加入2ml上清夜同样设置三个平行样。依次加入0.2ml测试用 菌液每个测量杯加菌液的时间间隔为15s，放置30min后，发光检测仪依 次相隔15s测定各测量杯的发光强度，计算相对发光强度。5) 发光强度的计算<formula>formula see original document page 6</formula>6)蔬菜食用安全性结果评价<table>table see original document page 6</column></row><table>本专利技术的有益效果本方法的优点1)运用发光细菌法检测技术， 对蔬菜食用安全性进行快速检测与评价，与现有方法比较，极大地縮短了 检测时间，并降低了成本；2)可以应用于蔬菜食用安全性评价的现场实 时检测，进行污染蔬菜的初筛，填补当前在农产品安全综合生物毒性快速 评价方法的空白；3)可对因多种污染物(多种农药和重金属残留)引起 的蔬菜进行食用安全性综合评估；4)可对农产品中潜在的危险因素进行 生物毒性的分析(可以防止类似"苏丹红一号"食品安全危机)。附图说明图1为本专利技术快速检测蔬菜综合毒性方法的步骤流程图。 以下结合附图和实施例对本专利技术快速检测方法作比较详细说明。 具体实施例方式参照图1，这是本专利技术快速检测蔬菜综合毒性方法的步骤流程图。所述的发光细菌检测法，包括如下步骤发光细菌的准备，测试用菌 液的制备，蔬菜样品的准备，发光检测，相对发光强度的计算，蔬菜食用 安全性结果评价。经过发光细菌的准备和样品的预处理，随后进行发光检 测，由此判断样品是否存在生物毒性。快速检测蔬菜综合毒性方法在实际样品中的应用。实施例l:青菜的检测1) 发光细菌Q67的准备发光细菌菌种采用青海弧菌Q67菌株("Z^j'o ^'/7^ sie/lsj's Q67)， 其培养基成分，包括MgS04 2.47g ，MgC03 0. 79g ， MgBr2 0. 09g ， MgCl2 0. 109g ，CaC03 0. 103g ， KC1 0. 122g ， NaCl 8. 29g ，Mg(HC03)2 0. 50g ，酵 母膏5g ，胰胨5g ，甘油3g ，琼脂20g，溶于lOOOmL蒸馏水中，于12rC灭 菌20min，制成斜面，贮于4。C冰箱备用。2) 测试用菌液的制备用上述青海弧菌Q67菌株的斜面菌种，移接到新鲜斜面上，20-22°C 培养12h-14h，此时细菌发光明亮，用10ml生理盐水(0. 85%Nacl溶液)将菌苔从斜面上轻柔冲刷下来，摇匀，用少量生理盐水调整菌液浓度，使 菌液浓度0D660"0. 3左右，取0. lml菌液，加入置有2ml生理盐水的样品测试管中，用测光仪检测发光。3) 青菜样品的准备取有代表性青菜样品50g，操作者需戴无菌手套，用50ml无菌生理盐 水浸泡15min，用旋涡震荡器震荡lmin，，取上清液备用，对照选用无污 染青菜50g，用上述样品处理方法同样处理备用。4) 发光检测准备好三个测试小管，每个小管各加入待测青菜样品上清液(5.1.3) 2ml，制成三个平行样。对照也取三个测量管，分别加入2ml对照样品上 清液，同样也设置三个平行样。依次加入O. 2ml测试用(5.1.2)菌液， 每个测量管加菌液的时间间隔为15s，放置30rnin后用发光检测仪依次(相 隔15s)检测各测试小管的发光强度，计算相对发光强度。5) 相对发光强度的计算<formula>formula see original document page 8</formula>6)青菜食用安全性结果评价<table>table see original document page 8</column></row><tabl本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速检测蔬菜综合毒性的方法，用于蔬菜生产和流通过程中进行安全性快速检测，其特征在于：所述的综合毒性快速检测的方法，包括如下步骤：１）发光细菌的准备，２）制备测试用菌液，３）选择蔬菜样品，４）发光检测，５）相对发光强度的计算，６）蔬菜食用安全性结果评价；　经过发光细菌的准备和样品的预处理，随后进行发光检测，由此判断样品是否存在生物毒性。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：吴淑杭，周德平，姜震方，朱文杰，
申请(专利权)人：上海市农业科学院，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]