两个支链异构化粉蝶霉素类化合物及其在制备抗肾癌药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了两个支链异构化粉蝶霉素类化合物及其在制备抗肾癌药物中的应用。本发明专利技术从链霉菌Streptomyces sp.HBERC‑58855发酵培养物中分离制备得到具有抗肾癌活性的粉蝶霉素piericidin L和piericidin M。通过对多株癌细胞的抑制活性实验评价，发现化合物piericidin L和piericidin M对人肾癌OS‑RC‑2细胞具有明显的选择性抑制活性，IC

【技术实现步骤摘要】
两个支链异构化粉蝶霉素类化合物及其在制备抗肾癌药物中的应用
本专利技术属于天然产物领域，具体涉及两个支链异构化粉蝶霉素类化合物及其在制备抗肾癌药物中的应用。
技术介绍
恶性肿瘤已经成为我国居民首要死因，中国恶性肿瘤死亡率近20年来不断呈现上升趋势，处于世界恶性肿瘤死亡率的前列。据我国卫生部统计，中国每年新增肿瘤病人约200万人，目前全国肿瘤患者总数约为450万人。药物治疗在恶性肿瘤的疗法中占有相当重要的地位，发展速度最快。对于恶性肿瘤的治疗，天然产物及其衍生物药物发挥着重要作用。据报道，1981年到2008年间，天然产物来源的抗肿瘤药物占上市抗肿瘤药物的60％以上，而且，新型天然产物及其衍生物作为新的抗肿瘤药物所占数量还在不断增加。肾癌现位居世界恶性肿瘤第16位，其发病率占恶性肿瘤的3％-5％，发病率上升幅度居于首位，另外肾癌在我国泌尿系肿瘤相关死亡中居于首位。研究发现，肾癌患者中30％发生转移，另有30％在10年内有发生转移的危险，并且转移性肾癌对放化疗及系统性治疗具有较高的耐受性。粉蝶霉素(piericidin)类化合物是微生物来源的α-吡啶酮类抗生素，不仅有杀虫、抗菌等活性，而且对部分肿瘤细胞也有抑制活性，支链异构化对粉蝶霉素的活性变化影响较大，从支链异构化的粉蝶霉素类化合物中有望挖掘具有抗肿瘤潜力的先导化合物。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的是提供两个支链异构化粉蝶霉素类化合物piericidinL和piericidinM。式(I)所示的任一粉蝶霉素类化合物或其药用盐，化合物piericidinL，式(I)中R为化合物piericidinM，式(I)中R为本专利技术人通过对一株红树林底泥来源的链霉菌Streptomycessp.HBERC-58855(保藏编号为CCTCCNO:M2017186)进行摇床放大发酵和提取纯化，获得两个未见报道的结构新颖的粉蝶霉素类化合物piericidinL和piericidinM。化合物piericidinL和piericidinM的结构，相对于其他同类化合物，新颖性在于支链片段发生了异构化，piericidinL具有少见的C-12酮基和Δ11,14共轭片段，piericidinM具有同类化合物少见的C-7乙基化。通过对这两个支链异构化粉蝶霉素类化合物进行多种癌细胞的体外活性评价，发现piericidinL和piericidinM具有选择性地抑制人肾癌细胞OS-RC-2的活性，半数抑制率IC50分别为2.2和4.5μM。piericidinL和piericidinM以浓度依赖型方式使人肾癌细胞OS-RC-2细胞周期G2/M期受阻，并诱导细胞凋亡。因此，支链异构化粉蝶霉素类化合物piericidinL或piericidinM可以做为抗肾癌药物开发的先导化合物。因此本专利技术的第二个目的是提供所述的化合物piericidinL和/或piericidinM，或其药用盐在制备抗肾癌药物中的应用。本专利技术的第三个目的是提供一种抗肾癌药物，其特征在于，包括有效量的作为活性成份的权利要求1所述的化合物piericidinL和/或piericidinM，或其药用盐，和药学上可以接受的载体。本专利技术的第四个目的是提供所述的化合物piericidinL和/或piericidinM的制备方法，是从链霉菌Streptomycessp.HBERC-58855的发酵培养物中分离制备得到piericidinL和/或piericidinM。优选，所述的制备方法，包括以下步骤：将链霉菌Streptomycessp.HBERC-58855的发酵培养物用乙酸乙酯萃取，萃取物浓缩后得到提取物，提取物经硅胶柱层析，顺序用石油醚、石油醚：二氯甲烷1：1v/v、二氯甲烷、二氯甲烷：甲醇100：1v/v、二氯甲烷：甲醇100：2v/v、二氯甲烷：甲醇100：3v/v、二氯甲烷：甲醇100：4v/v、二氯甲烷：甲醇100：5v/v、甲醇洗脱，收集石油醚：二氯甲烷1：1v/v洗脱的馏分S2，S2经制备HPLC纯化得到化合物piericidinL和piericidinM。本专利技术的第五个目的是提供链霉菌Streptomycessp.HBERC-58855在制备所述的化合物piericidinL和/或piericidinM中的应用。本专利技术的两个支链异构化粉蝶霉素类化合物piericidinL和piericidinM是未经报道的新化合物。本专利技术揭示piericidinL和piericidinM对肾癌细胞OS-RC-2具有明显的选择性抑制活性，这类粉蝶霉素可以用于制备特异性的抗肾癌药物。因此本专利技术为开发新的抗肾癌药物提供了备选化合物，对开发中国海洋微生物药物资源具有重要的意义。本专利技术涉及的链霉菌Streptomycessp.HBERC-58855，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉武汉大学，保藏日期为2017年4月20日，保藏编号为CCTCCNO:M2017186(该保藏信息公开于专利申请CN201710344174.3中)。附图说明图1是化合物piericidinL和piericidinM的重要COSY、HMBC和NOESY相关信息。图2是化合物piericidinL和piericidinM对OS-RC-2肾癌细胞的细胞周期作用。图3是化合物piericidinL和piericidinM对OS-RC-2肾癌细胞的细胞凋亡作用。具体实施方式以下实施例是对本专利技术的进一步说明，而不是对本专利技术的限制。实施例1：支链异构化粉蝶霉素类化合物piericidinL和piericidinM的制备1、Streptomycessp.HBERC-58855的固体培养链霉菌Streptomycessp.HBERC-58855(保藏编号为CCTCCNO:M2017186)是从红树林底泥分离得到，该菌种保存于ISP-2培养基斜面，ISP-2培养基组成为：每升含有酵母提取粉4g，葡萄糖4g，麦芽提取粉10g，粗海盐30g，琼脂粉20g，余量为水，pH7.2-7.4；制备方法为将上述各组分混合，121℃灭菌，分装备用。2、Streptomycessp.HBERC-58855的放大发酵取少量Streptomycessp.HBERC-58855斜面菌种进行种子发酵培养，种子发酵培养基：每升含有甘露醇20g，大豆蛋白胨10g，豆油2.5g，磷酸氢二钾0.35g，余量为去离子水，pH7.0。用500毫升三角瓶装100毫升种子发酵培养基，接种培养条件为：28℃，120转/min。培养96h后，进行扩大培养，培养体积扩大到3L，培养基和培养条件不变。培养48h后，进行罐体发酵，发酵体积为30L，罐体发酵培养基：每升含有葡萄糖10g，可溶性淀粉10g，棉籽粉25g，酵母提取物3g，碳酸钙5g，氯化钠2g，余量为去离子水，pH7.0；28℃，培养120h后，收本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.式(I)所示的任一粉蝶霉素类化合物或其药用盐，/n

【技术特征摘要】
1.式(I)所示的任一粉蝶霉素类化合物或其药用盐，



化合物piericidinL，式(I)中R为
化合物piericidinM，式(I)中R为


2.权利要求1所述的化合物piericidinL和/或piericidinM，或其药用盐在制备抗肾癌药物中的应用。


3.一种抗肾癌药物，其特征在于，包括有效量的作为活性成份的权利要求1所述的化合物piericidinL和/或piericidinM，或其药用盐，和药学上可以接受的载体。


4.一种权利要求1所述的化合物piericidinL和/或piericidinM的制备方法，其特征在于，是从链霉菌Streptomycessp.HBERC-58855的发酵培养物中分离制备得到piericidinL和/或pieri...

【专利技术属性】
技术研发人员：周雪峰，李坤龙，唐斓，杨斌，刘永宏，
申请(专利权)人：中国科学院南海海洋研究所，
类型：发明
国别省市：广东;44