制造T细胞的方法技术

本公开涉及用于过继免疫疗法的T细胞制造方法。本公开还提出了基因转导T细胞的方法、使用T细胞及其T细胞群的方法。一方面，本公开提出解冻冷冻的外周血单核细胞(PBMC)、静置解冻的PBMC、用固定于固相上的抗CD3抗体和抗CD28抗体激活培养的PBMC中的T细胞、用病毒载体转导激活的T细胞、扩增转导的T细胞以及获得扩增T细胞的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】制造T细胞的方法相关申请的交叉引用本申请为美国临时申请，其要求2018年9月3日提交的美国临时申请号62/726,350、2018年3月23日提交的美国临时申请号62/647,571、2018年2月21日提交的美国临时申请号62/633,113、2018年2月9日提交的美国临时申请号62/628,521、2018年4月16日提交的德国专利申请号102018108996.1、2018年2月28日提交的德国专利申请号102018104628.6、2018年2月9日提交的德国专利申请号102018102971.3的优先权，各自内容透过引用整体并入本文。专利
本公开一般涉及用于过继免疫疗法的T细胞制造方法。本公开还提出了基因转导T细胞的方法、使用T细胞及其T细胞群的方法。背景最近，透过T细胞受体(TCR)或嵌合抗原受体(CAR)的基因强制表达重定向T细胞对肿瘤相关抗原的特异性提升了过继性T细胞转移领域。第二代和第三代CAR的使用有助于解决长期存在的转移后体内T细胞持久性不足的问题，而该问题严重阻碍了其功效。然而，更广泛应用的重大障碍仍然存在，例如：需要在个体化的基础上生产T细胞产物，这使得此种具有前景的治疗方法难以在经济上可行。虽然使用T细胞(例如自体T细胞)已经显示出前景，但在先前高度治疗的患者中可能难以获得合适数量的自体细胞。US2003/0170238和US2003/0175272描述了过继性免疫疗法的方法，其中可透过将T细胞从激活刺激物移开而使T细胞静置至少48-72小时(通常至少约72-120小时)，然后透过用有丝分裂单克隆抗体(mAb)(诸如可溶性抗CD3和抗CD28mAb)等标记细胞在输注前重新激活它们，再将标记的细胞与任选在单核细胞和粒细胞中增强的自体单核细胞混合。美国2017/0051252描述了制造T细胞治疗剂的方法，包括获得含有T细胞和抗原呈递细胞(APC)的细胞群的步骤；在细胞培养基中培养细胞群，所述细胞培养基包含(i)一种或多种细胞因子、(ii)一种抗CD3抗体或其CD3结合片段和(iii)一种抗CD28抗体或其CD28结合片段、B7-1或其CD28结合片段或B7-2或其CD28结合片段，其中培养物激活并刺激T细胞；用病毒载体转导激活的细胞群；以及在细胞生长培养基中培养细胞群以扩增转导的T细胞；从而制造T细胞治疗剂。需要改进的策略来体外转导细胞群，从而可能产生足够的T细胞用于研究、诊断和治疗目的。本文提出了该技术问题的一种解决方案。简要概述一方面，本公开涉及一种转导T细胞的方法，包括解冻冷冻的外周血单核细胞(PBMC)、静置解冻的PBMC、用抗CD3抗体和抗CD28抗体激活培养PBMC中的T细胞、用病毒载体转导激活的T细胞、扩增转导的T细胞以及获得扩增的T细胞。一方面，T细胞在培养的PBMC中被固定于固相支持物上的抗CD3抗体和抗CD28抗体激活。另一方面，静置步骤可能在不超过约1小时、不超过约2小时、不超过约3小时、不超过约4小时、不超过约5小时、不超过约6小时、不超过约7小时、不超过约8小时、不超过约9小时、不超过约10小时、不超过约11小时、不超过约12小时、不超过约18小时、不超过约24小时、不超过约48小时、不超过约36小时、不超过约48小时、不超过约60小时、不超过约72小时、不超过约84小时、不超过约96小时、不超过约108小时或不超过约120小时的时间段内进行。另一方面，静置可能在约0.5小时至约48小时、约0.5小时至约36小时、约0.5小时至约24小时、约0.5小时至约18小时、约0.5小时至约12小时、约0.5小时至约6小时、约1小时至约6小时、约2小时至约5小时、约3小时至约5小时、约3小时至约4小时、约4至约5小时、或约1小时至约24小时、约2至约24小时、约12至约48小时、约0.5小时至约120小时、约0.5小时至约108小时、约0.5小时至约96小时、约0.5小时至约84小时、约0.5小时至约72小时或约0.5小时至约60小时的时间段内进行。另一方面，静置步骤可能在约1小时、约2小时、约3小时、约4小时、约5小时、约6小时、约7小时、约8小时、约9小时或约10小时的时间段内进行。一方面，透过约1小时、约2小时、约3小时、约4小时、约5小时、约6小时、约7小时、约8小时、约9小时、约10小时、约2小时至约5小时、约3小时至约5小时、约3小时至约4小时或约4至约5小时的静置步骤所产生的T细胞倍数扩增是透过约16小时、约17小时、约18小时、约19小时、约20小时、约24小时或约16至约20小时的静置步骤所产生的T细胞倍数扩增的约相等(约1:1)、约至少1.1倍、约至少1.2倍、约至少1.3倍、约至少1.5倍、约至少1.7倍或约至少2.0倍。在一优选方面，透过约4小时的静置步骤所产生的T细胞的倍数扩增是透过约16小时(例如，过夜)的静置步骤产生的T细胞的倍数扩增的约至少1.5倍。一方面，T细胞产生之间的唯一差异是静置时间减少。一方面，透过约1小时、约2小时、约3小时、约4小时、约5小时、约6小时、约7小时、约8小时、约9小时、约10小时、约2小时至约5小时、约3小时至约5小时、约3小时至约4小时或约4至约5小时的静置步骤所产生的T细胞数量是透过约16小时、约17小时、约18小时、约19小时、约20小时、约24小时或约16至约20小时的静置步骤所产生的T细胞数量的约相等(约1:1)、约至少1.1倍、约至少1.2倍、约至少1.3倍、约至少1.5倍、约至少1.7倍或约至少2.0倍。在一优选方面，透过约4小时的静置步骤所产生的T细胞数量是透过约16小时(例如，过夜)的静置步骤所产生的T细胞的倍数扩增的约至少1.5倍或约1.3倍至约2.0倍。一方面，T细胞产生之间的唯一差异是静置时间减少。再一方面，抗CD3抗体和抗CD28抗体各自的浓度可能不超过约0.1μg/ml、不超过约0.2μg/ml、不超过约0.3μg/ml、不超过约0.4μg/ml、不超过约0.5μg/ml、不超过约0.6μg/ml、不超过约0.7μg/ml、不超过约0.8μg/ml、不超过约0.9μg/ml、不超过约1.0μg/ml、不超过约2.0μg/ml、不超过约4.0μg/ml、不超过约6.0μg/ml、不超过约8.0μg/ml或不超过约10.0μg/ml。再一方面，抗CD3抗体和抗CD28抗体各自的浓度可能为约0.1μg/ml至约1.0μg/ml、约0.1μg/ml至约0.8μg/ml、约0.1μg/ml至约0.6μg/ml、约0.1μg/ml至约0.5μg/ml、约0.1μg/ml至约0.25μg/ml、约0.2μg/ml至约0.5μg/ml、约0.2μg/ml至约0.3μg/ml、约0.3μg/ml至约0.5μg/ml、约0.3μg/ml至约0.4μg/ml、约0.2μg/ml至约0.5μg/ml、约0.1μg/ml至约10.0μg/ml、约0.1μg/ml至约8.0μg/ml、约0.1μg/ml至约6.0μg/ml、约0.1μ本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.权利要求内容为： /n一种转导T细胞的方法，其包括/n解冻冷冻的外周血单核细胞(PBMC)，/n静置解冻的PBMC，/n用抗CD3抗体和抗CD28抗体激活静置PBMC中的T细胞，/n用病毒载体转导激活的T细胞，/n扩增转导的T细胞，以及/n获得扩增的T细胞。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180209 DE 102018102971.3;20180228 DE 102018104621.权利要求内容为：
一种转导T细胞的方法，其包括
解冻冷冻的外周血单核细胞(PBMC)，
静置解冻的PBMC，
用抗CD3抗体和抗CD28抗体激活静置PBMC中的T细胞，
用病毒载体转导激活的T细胞，
扩增转导的T细胞，以及
获得扩增的T细胞。


2.权利要求1中所述的方法，其中，激活步骤包括用固相支持物上的抗CD3抗体和抗CD28抗体固定静置PBMC中的T细胞。


3.权利要求1至2中任一项所述的方法，其中，静置步骤在约0.5小时至约48小时、约0.5小时至约36小时、约0.5小时至约24小时、约0.5小时至约18小时、约0.5小时至约12小时、约0.5小时至约6小时、约1小时至约6小时、约2小时至约5小时、约3小时至约5小时、或约1小时至约24小时、约2至约24小时、约12至约48小时、约0.5小时至约120小时、约0.5小时至约108小时、约0.5小时至约96小时、约0.5小时至约84小时、约0.5小时至约72小时或约0.5小时至约60小时的时间段内进行。


4.权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，抗CD3抗体和抗CD28抗体各自的浓度不超过约0.1μg/ml、不超过约0.2μg/ml、不超过约0.3μg/ml、不超过约0.4μg/ml、不超过约0.5μg/ml、不超过约0.6μg/ml、不超过约0.7μg/ml、不超过约0.8μg/ml、不超过约0.9μg/ml、不超过约1.0μg/ml、不超过约2.0μg/ml、不超过约4.0μg/ml、不超过约6.0μg/ml、不超过约8.0μg/ml或不超过约10.0μg/ml。


5.权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，抗CD3抗体和抗CD28抗体各自的浓度为约0.1μg/ml至约10.0μg/ml、约0.1μg/ml至约8.0μg/ml、约0.1μg/ml至约6.0μg/ml、约0.1μg/ml至约4.0μg/ml、约0.1μg/ml至约2.0μg/ml、约0.1μg/ml至约1.0μg/ml、约0.1μg/ml至约0.8μg/ml、约0.1μg/ml至约0.6μg/ml、约0.1μg/ml至约0.5μg/ml、约0.1μg/ml至约0.25μg/ml、约0.2μg/ml至约0.5μg/ml、约0.2μg/ml至约0.3μg/ml、约0.3μg/ml至约0.5μg/ml、约0.3μg/ml至约0.4μg/ml或约0.4μg/ml至约0.5μg/ml。


6.权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，激活在不超过约1小时、约2小时、约3小时、约4小时、约5小时、约6小时、约7小时、约8小时、约9小时、约10小时、约11小时、约12小时、约14小时、约16小时、约18小时、约20小时、约22小时、约24小时、约26小时、约28小时、约30小时、约36小时、约48小时、约60小时、约72小时、约84小时、约96小时、约108小时或约120小时的时间段内进行。


7.权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，激活在约1小时至约120小时、约1小时至约108小时、约1小时至约96小时、约1小时至约84小时、约1小时至约72小时、约1小时至约60小时、约1小时至约48小时、约1小时至约36小时、约1小时至约24小时、约2小时至约24小时、约4小时至约24小时、约6小时至约24小时、约8小时至约24小时、约10小时至约24小时、约12小时至约24小时、约12小时至约72小时、约24小时至约72小时、约6小时至约48小时、约24小时至约48小时、约6小时至约72小时或约1小时至约12小时的时间段内进行。


8.权利要求1至7中任一项所述的方法，其中，所述固相为珠、板、烧瓶或袋的表面。


9.权利要求8所述的方法，其中，所述板为6孔、12孔或24孔板。


10.权利要求8所述的方法，其中，所述烧瓶的接种表面积为约25cm2至约75cm2、约25cm2至约100cm2、约25cm2至约150cm2或约50cm2至约1720cm2。


11.权利要求8所述的方法，其中，所述袋的容积为约5ml至约100升、约100ml至约100升、约150ml至约100升、约200ml至约100升、约250ml至约100升、约500ml至约100升、约1升至约100升、约1升至约75升、约1升至约50升、约1升至约25升、约1升至约20升、约1升至约15升、约1升至约10升、约1升至约5升、约1升至约2.5升或约1升至约2升。


12.权利要求1至11中任一项所述的方法，其中，所述静置在存在至少一种细胞因子的情况下进行。


13.权利要求12所述的方法，其中，所述至少一种细胞因子包括白细胞介素7(IL-7)和/或白细胞介素15(IL-15)。


14.权利要求13所述的方法，其中IL-7的浓度为不超过约1ng/ml、不超过约2ng/ml、不超过约3ng/ml、不超过约4ng/ml、不超过约5ng/ml、不超过约6ng/ml、不超过约7ng/ml、不超过约8ng/ml、不超过约9ng/ml、不超过约10ng/ml、不超过约11ng/ml、不超过约12ng/ml、不超过约13ng/ml、不超过约14ng/ml、不超过约15ng/ml、不超过约16ng/ml、不超过约17ng/ml、不超过约18ng/ml、不超过约19ng/ml、不超过约20ng/ml、不超过约25ng/ml、不超过约30ng/ml、不超过约35ng/ml、不超过约40ng/ml、不超过约45ng/ml、不超过约50ng/ml、不超过约60ng/ml、不超过约70ng/ml、不超过约80ng/ml、不超过约90ng/ml或不超过约100ng/ml。


15.权利要求13所述的方法，其中IL-7的浓度为约1ng/ml至90ng/ml、约1ng/ml至80ng/ml、约1ng/ml至70ng/ml、约1ng/ml至60ng/ml、约1ng/ml至50ng/ml、约1ng/ml至40ng/ml、约1ng/ml至30ng/ml、约1ng/ml至20ng/ml、约1ng/ml至15ng/ml、约1ng/ml至10ng/ml、约2ng/ml至10ng/ml、约4ng/ml至10ng/ml、约6ng/ml至10ng/ml或约5ng/ml至10ng/ml。


16.权利要求13至15中任一项所述的方法，其中IL-15的浓度为不超过约5ng/ml、不超过约10ng/ml、不超过约15ng/ml、不超过约20ng/ml、不超过约25ng/ml、不超过约30ng/ml、不超过约35ng/ml、不超过约40ng/ml、不超过约45ng/ml、不超过约50ng/ml、不超过约60ng/ml、不超过约70ng/ml、不超过约80ng/ml、不超过约90ng/ml、不超过约100ng/ml、不超过约110ng/ml、不超过约120ng/ml、不超过约130ng/ml、不超过约140ng/ml、不超过约150ng/ml、200ng/ml、250ng/ml、300ng/ml、350ng/ml、400ng/ml、450ng/ml或500ng/ml。


17.权利要求13至15中任一项所述的方法，其中IL-15的浓度为约5ng/ml至500ng/ml、约5ng/ml至400ng/ml、约5ng/ml至300ng/ml、约5ng/ml至200ng/ml、约5ng/ml至150ng/ml、约5ng/ml至100ng/ml、约10ng/ml至100ng/ml、约20ng/ml至100ng/ml、约30ng/ml至100ng/ml、约40ng/ml至100ng/ml、约50ng/ml至100ng/ml、约60ng/ml至100ng/ml、约70ng/ml至100ng/ml、约80ng/ml至100ng/ml、约90ng/ml至100ng/ml、约10ng/ml至50ng/ml、约20ng/ml至50ng/ml、约30ng/ml至50ng/ml或约40ng/ml至50ng/ml。


18.权利要求1至16中任一项所述的方法，其中转导在不超过约1小时、不超过约2小时、不超过约3小时、不超过约4小时、不超过约5小时、不超过约6小时、不超过约7小时、不超过约8小时、不超过约9小时、不超过约10小时、不超过约11小时、不超过约12小时、不超过约14小时、不超过约16小时、不超过约18小时、不超过约20小时、不超过约22小时、不超过约24小时、不超过约26小时、不超过约28小时、不超过约30小时、不超过约36小时、不超过约42小时、不超过约48小时、不超过约54小时、不超过约60小时、不超过约66小时、不超过约72小时、不超过约84小时、不超过约96小时、不超过约108小时或不超过约120小时的时间段内进行。


19.权利要求1至16中任一项所述的方法，其中转导在约1小时至120小时、约1小时至108小时、约1小时至96小时、约1小时至72小时、约1小时至48小时、约1小时至36小时、约1小时至24小时、约2小时至24小时、约4小时至24小时、约6小时至24小时、约8小时至24小时、约10小时至24小时、约12小时至24小时、约14小时至24小时、约16小时至24小时、约18小时至24小时、约20小时至24小时或约22小时至24小时的时间段内进行。


20.权利要求1至19中任一项所述的方法，其中病毒载体是表达T细胞受体(TCR)的逆转录病毒载体。


21.权利要求1至20中任一项所述的方法，其中病毒载体是表达TCR的慢病毒载体。


22.权利要求1至21中任一项所述的方法，其中，所述转导在存在至少一种细胞因子的情况下进行。


23.权利要求22所述的方法，其中，所述至少一种细胞因子包括白细胞介素7(IL-7)和/或白细胞介素15(IL-15)。


24.权利要求23所述的方法，其中IL-7的浓度为不超过约1ng/ml、不超过约2ng/ml、不超过约3ng/ml、不超过约4ng/ml、不超过约5ng/ml、不超过约6ng/ml、不超过约7ng/ml、不超过约8ng/ml、不超过约9ng/ml、不超过约10ng/ml、不超过约11ng/ml、不超过约12ng/ml、不超过约13ng/ml、不超过约14ng/ml、不超过约15ng/ml、不超过约16ng/ml、不超过约17ng/ml、不超过约18ng/ml、不超过约19ng/ml、不超过约20ng/ml、不超过约25ng/ml、不超过约30ng/ml、不超过约35ng/ml、不超过约40ng/ml、不超过约45ng/ml、不超过约50ng/ml、不超过约60ng/ml、不超过约70ng/ml、不超过约80ng/ml、不超过约90ng/ml或不超过约100ng/ml。


25.权利要求23所述的方法，其中IL-7的浓度为约1ng/ml至100ng/ml、约1ng/ml至90ng/ml、约1ng/ml至80ng/ml、约1ng/ml至70ng/ml、约1ng/ml至60ng/ml、约1ng/ml至50ng/ml、约1ng/ml至40ng/ml、约1ng/ml至30ng/ml、约1ng/ml至20ng/ml、约1ng/ml至15ng/ml、约1ng/ml至10ng/ml、约2ng/ml至10ng/ml、约4ng/ml至10ng/ml、约6ng/ml至10ng/ml、约8ng/ml至10ng/ml或约9ng/ml至10ng/ml。


26.权利要求23至25中任一项所述的方法，其中IL-15的浓度为不超过约5ng/ml、不超过约10ng/ml、不超过约15ng/ml、不超过约20ng/ml、不超过约25ng/ml、不超过约30ng/ml、不超过约35ng/ml、不超过约40ng/ml、不超过约45ng/ml、不超过约50ng/ml、不超过约60ng/ml、不超过约70ng/ml、不超过约80ng/ml、不超过约90ng/ml、不超过约100ng/ml、不超过约110ng/ml、不超过约120ng/ml、不超过约130ng/ml、不超过约140ng/ml、不超过约150ng/ml、200ng/ml、250ng/ml、300ng/ml、350ng/ml、400ng/ml、450ng/ml或500ng/ml。


27.权利要求23至25中任一项所述的方法，其中IL-15的浓度为约5ng/ml至500ng/ml、约5ng/ml至400ng/ml、约5ng/ml至300ng/ml、约5ng/ml至200ng/ml、约5ng/ml至150ng/ml、约5ng/ml至100ng/ml、约10ng/ml至100ng/ml、约20ng/ml至100ng/ml、约30ng/ml至100ng/ml、约40ng/ml至100ng/ml、约50ng/ml至100ng/ml、约60ng/ml至100ng/ml、约70ng/ml至100ng/ml、约80ng/ml至100ng/ml、约90ng/ml至100ng/ml、约10ng/ml至50ng/ml、约20ng/ml至50ng/ml、约30ng/ml至50ng/ml或约40ng/ml至50ng/ml。


28.权利要求1至27中任一项所述的方法，其中，所述扩增在存在至少一种细胞因子的情况下进行。


29.权利要求28所述的方法，其中，所述至少一种细胞因子包括白细胞介素7(IL-7)和/或白细胞介素15(IL-15)。


30.权利要求29所述的方法，其中IL-7的浓度为不超过约1ng/ml、不超过约2ng/ml、不超过约3ng/ml、不超过约4ng/ml、不超过约5ng/ml、不超过约6ng/ml、不超过约7ng/ml、不超过约8ng/ml、不超过约9ng/ml、不超过约10ng/ml、不超过约11ng/ml、不超过约12ng/ml、不超过约13ng/ml、不超过约14ng/ml、不超过约15ng/ml、不超过约16ng/ml、不超过约17ng/ml、不超过约18ng/ml、不超过约19ng/ml、不超过约20ng/ml、不超过约25ng/ml、不超过约30ng/ml、不超过约35ng/ml、不超过约40ng/ml、不超过约45ng/ml、不超过约50ng/ml、不超过约60ng/ml、不超过约70ng/ml、不超过约80ng/ml、不超过约90ng/ml或不超过约100ng/ml。


31.权利要求29所述的方法，其中IL-7的浓度为约1ng/ml至100ng/ml、约1ng/ml至90ng/ml、约1ng/ml至80ng/ml、约1ng/ml至70ng/ml、约1ng/ml至60ng/ml、约1ng/ml至50ng/ml、约1ng/ml至40ng/ml、约1ng/ml至30ng/ml、约1ng/ml至20ng/ml、约1ng/ml至15ng/ml或约1ng/ml至10ng/ml。


32.权利要求29至31中任一项所述的方法，其中IL-15的浓度为不超过约5ng/ml、10ng/ml、15ng/ml、20ng/ml、25ng/ml、30ng/ml、35ng/ml、40ng/ml、45ng/ml、50ng/ml、60ng/ml、70ng/ml、80ng/ml、90ng/ml、100ng/ml、110ng/ml、120ng/ml、130ng/ml、140ng/ml、150ng/ml、200ng/ml、250ng/ml、300ng/ml、350ng/ml、400ng/ml、450ng/ml或500ng/ml。


33.权利要求29至31中任一项所述的方法，其中IL-15的浓度为约5ng/ml至500ng/ml、约5ng/ml至400ng/ml、约5ng/ml至300ng/ml、约5ng/ml至200ng/ml、约5ng/ml至150ng/ml、约5ng/ml至100ng/ml、约10ng/ml至100ng/ml、约20ng/ml至100ng/ml、约30ng/ml至100ng/ml、约40ng/ml至100ng/ml、约50ng/ml至100ng/ml、约60ng/ml至100ng/ml、约70ng/ml至100ng/ml、约80ng/ml至100ng/ml、约90ng/ml至100ng/ml、约10ng/ml至50ng/ml、约20ng/ml至50ng/ml、约30ng/ml至50ng/ml或约40ng/ml至50ng/ml。


34.权利要求1至33中任一项所述的方法，其中所述扩增在不超过约1天、不超过约2天、不超过约3天、不超过约4天、不超过约5天、不超过约6天、不超过约7天、不超过约8天、不超过约9天、不超过约10天、不超过约15天、不超过约20天、不超过约25天或不超过约30天的时间段内进行。


35.权利要求1至33中任一项所述的方法，其中所述扩增在约1天至约30天、约1天至约25天、约1天至约20天、约1天至约15天、约1天至约10天、约2天至约10天、约3天至约10天、约4天至约10天、约5天至约10天、约6天至约10天、约7天至约10天、约8天至约10天或约9天至约10天的时间段内进行。


36.权利要求1至35中任一项所述的方法，其中，所述获得的T细胞数量为至少约1x109、可能至少约2x109、可能至少约3x109、可能至少约4x109、可能至少约5x109、可能至少约6x109、可能至少约7x109、可能至少约8x109、可能至少约9x109、可能至少约1x1010、可能至少约5x1010、可能至少约1x1011、可能至少约5x1011、可能至少约1x1012、可能至少约5x1012或可能至少约1x1013个细胞。


37.权利要求1至35中任一项所述的方法，其中，所述获得的T细胞数量为约1x109至约1x1013、约1x109至约5x1012、约1x109至约1x1012、约1x109至约5x1011、约1x109至约1x1011、约1x109至约5x1010、约1x109至约1x1010、约2...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·卡尔拉，Z·科赫兰，A·阿尔珀特，S·沃尔特，A·穆罕默德，A·布尔戈尼，
申请(专利权)人：伊玛提克斯美国公司，
类型：发明
国别省市：美国;US