一种抗体药物偶联物中间体的一锅法制备工艺制造技术

一种“一锅法”制备抗体药物偶联物中间体的方法，制备工艺是将Py‑MAA‑Val‑Cit‑PAB‑OH或MC‑Val‑Cit‑PAB‑OH与二(对硝基苯)碳酸酯在有机碱存在的条件下接触反应，待反应结束后，向反应体系中补充加入有机碱，1‑羟基苯并三唑和药物部分D进行反应即得。整个反应体系仅进行一次分离纯化处理，无需进行中间反应液的浓缩、洗涤、有机废液的处理以及中间体的包装贮存等步骤，且具有更高的收率。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】一种抗体药物偶联物中间体的一锅法制备工艺
本专利技术涉及抗体药物偶联物领域，具体涉及一种抗体药物偶联物中间体(即连接子部分-药物部分偶联物)的一锅法制备工艺。
技术介绍
抗体药物偶联物(Antibodydrugconjugate，简称ADC)是一类抗肿瘤药物，其包括三个组成部分：抗体部分(Antibody)、连接子部分(Linker)和药物部分(Drug)，其中抗体部分和药物部分通过连接子部分相连，其作用机制是运用抗体的靶向性将药物靶向运输到靶细胞(如肿瘤细胞)后释放药物实现杀伤肿瘤细胞的目的。目前合成抗体药物偶联物最常用的方法是将连接子部分和药物部分在液相中共价连接形成连接子-药物偶联物，之后再与抗体进行巯基或氨基偶联形成抗体药物偶联物。公开号为CN107427591A的中国专利详细的公开了连接子-药物偶联物通用的合成方法(说明书第34页以及说明书第47-48页)(如附图1所示)，上述通用合成方法分为：第一步是将含有游离苄醇基团的连接子溶解在适当的溶剂中，向反应体系中添加二(对硝基苯基)碳酸酯和二异丙基乙基胺，反应数小时后将中间产物提取纯化；第二步是将上述中间产物、含有游离氨基基团的药物部分溶解在适当的溶剂中，加入1-羟基苯并三唑和吡啶，反应数小时后减压除溶剂，即可获得连接子-药物偶联物。由于上述两步法反应体系中，中间体需要进行提取纯化，会影响最终的反应收率。除此之外，上述制备工艺在生产时存在多体系反应时的必然缺陷，即需要对多个步骤中的反应液浓缩、洗涤、过滤、处理有机废液以及第一步中间体的包装贮存等，既增加了生产耗材、人工、设备、场地等成本，也产生了更多的生产废液，使得整体生产成本及生产时间增加。在公开号为CN107921030A的中国专利申请中还公开了多种能够与抗体以桥接偶联方式共价连接的连接子，其在说明书第42页公开了一种如下所示的抗体药物偶联物中间体(Py-MAA-Val-Cit-PAB-MMAE)(其中，Py为1,3,5-三丙烯酰基六氢-1,3,5-三嗪，其CAS为959-52-4，可购自百灵威科技有限公司、南京康满林化工实业有限公司)。此外，在该专利申请第32页中还公开了一种药物部分是MMAD(Demethyldolastatin10)的抗体药物偶联物中间体(Py-MAA-Val-Cit-PAB-MMAD)的制备工艺：该工艺是先将Val-Cit-PAB与药物部分(MMAD)偶联在一起形成Val-Cit-PAB-MMAD偶联物后，纯化获得目的产物后再与Py-MAA反应生成抗体药物偶联物中间体Py-MAA-Val-Cit-PAB-MMAD。同样采用多体系合成，并且由于抗体药物偶联物中连接的药物部分(例如MMAD/MMAE或MMAF等)在反应的前期(MMAD在生成Val-Cit-PAB-MMAD时作为反应物加入反应体系)而不是最后一步参与连接反应，因此导致通过上述工艺的生产药物部分(例如MMAD/MMAE或MMAF等)投料损耗较高，由于抗体药物偶联物中连接的药物部分(例如MMAD/MMAE或MMAF等)的价格通常都比较昂贵，因此也极大地提高了生产成本。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术提供了一种“一锅法”制备抗体药物偶联物中间体(即连接子-药物偶联物)的方法。具体的，本专利技术提供了一种包含连接子部分和药物部分的抗体药物偶联物中间体的制备工艺，所述的抗体药物偶联物中间体为Py-MAA-Val-Cit-PAB-D或MC-Val-Cit-PAB-D，所述中间体中Py-MAA-Val-Cit-PAB或MC-Val-Cit-PAB为连接子部分，所述中间体中D代表连接的药物部分，所述连接的药物部分含有游离的氨基基团，其特征在于，包括以下反应路线：所述制备工艺为一锅法，两步反应均在一个体系中进行。进一步的，所述的制备工艺为：将Py-MAA-Val-Cit-PAB-OH或MC-Val-Cit-PAB-OH与二(对硝基苯)碳酸酯(NPC)在有机碱存在的条件下接触反应，待反应结束后，在同一个反应体系中直接补充加入有机碱，并加入1-羟基苯并三唑及所述的药物部分D进行反应。进一步的，所述的药物部分D为奥瑞他汀(auristatin)类细胞毒性剂、安曲霉素(Anthramycin)类细胞毒性剂、蒽环(anthracycline)类细胞毒性剂或嘌呤霉素(puromycin)细胞毒性剂、喜树碱类似物。进一步的，所述的奥瑞他汀(auristatin)类细胞毒性剂为MMAE、MMAF、MMAD或其衍生物；所述的安曲霉素(Anthramycin)类细胞毒性剂为安曲霉素或其衍生物；所述的蒽环(anthracycline)类细胞毒性剂为柔红霉素、阿霉素、表阿霉素、伊达比星、米托蒽醌或其衍生物；所述的嘌呤霉素(puromycin)细胞毒性剂为嘌呤毒素或其衍生物；所述的喜树碱类似物为DX8951(依喜替康)或其衍生物。进一步的，所述的Py-MAA-Val-Cit-PAB-D或MC-Val-Cit-PAB-D的结构如示(1-22)所示：进一步的，所述的有机碱1、有机碱2各自独立地为N，N二异丙基乙胺、三乙胺、吡啶的一种或几种；优选的，所述的有机碱1、有机碱2各自独立地为N，N二异丙基乙胺、吡啶的一种或两种。进一步的，所述的三氮唑类催化剂为1-羟基苯并三氮唑、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑、1-羟基-1H-1,2,3-三唑-4-羧酸乙酯的一种或几种，优选为1-羟基苯并三氮唑。进一步的，上述所述反应的反应温度约为15－35℃，进一步地，反应温度可以为15，16，17，18，19，20，21，22，23，24，25，26，27，28，29，30，31，32，33，34或35℃。上述任一项所述的方法在制备抗肿瘤药物中的应用。上述任一项所述的方法在制备抗体药物偶联物中的应用。相较于传统的两步法反应体系，本专利技术提供的“一锅法”制备抗体药物偶联物中间体的制备工艺，操作简单，中间过程无需进行中间反应液的浓缩、洗涤、过滤、有机废液的处理以及中间体的包装贮存等步骤，而是在第一步反应结束后，直接在相同体系中，进行下一步的反应操作，整个反应体系仅仅进行一次分离纯化处理，既节省了生产耗材、人工、设备、场地、原料等成本，也大大降低了产生的生产废液，降低了生产成本，提高了生产效率。并且在反应过程中，连接的药物部分在最后的反应环节进行加入，有效了降低了药物部分(例如MMAD、MMAE或MMAF、DX8951等)投料的损耗。因此，本专利技术提供的“一锅法”制备抗体药物偶联物中间体的制备工艺更适用于放大生产。附图说明图1显示了公开号为CN107427591A的中国专利说明书第34页以及说明书第47-48页公开的制备连接子-药物偶联物的方法。具体实施方式缩写除非另有说明，本专利技术使用的所有缩写具有本领域普通技术人员所理解的相同含义本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包含连接子部分和药物部分的抗体药物偶联物中间体的制备工艺，所述的抗体药物偶联物中间体为Py-MAA-Val-Cit-PAB-D或MC-Val-Cit-PAB-D，所述中间体中Py-MAA-Val-Cit-PAB或MC-Val-Cit-PAB为连接子部分，所述中间体中D代表连接的药物部分，所述连接的药物部分含有游离的氨基基团，其特征在于，包括以下反应路线：/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20190520 CN 201910420868X;20190926 CN 2019109162001.一种包含连接子部分和药物部分的抗体药物偶联物中间体的制备工艺，所述的抗体药物偶联物中间体为Py-MAA-Val-Cit-PAB-D或MC-Val-Cit-PAB-D，所述中间体中Py-MAA-Val-Cit-PAB或MC-Val-Cit-PAB为连接子部分，所述中间体中D代表连接的药物部分，所述连接的药物部分含有游离的氨基基团，其特征在于，包括以下反应路线：



或



所述制备工艺为一锅法，两步反应均在一个体系中进行。


2.权利要求1所述的制备工艺，其特征在于：将Py-MAA-Val-Cit-PAB-OH或MC-Val-Cit-PAB-OH与二(对硝基苯)碳酸酯(NPC)在有机碱存在的条件下接触反应，待上述反应结束后，向反应体系中补充加入有机碱，并加入1-羟基苯并三唑及所述的药物部分D进行反应。


3.权利要求1或2所述的制备工艺，其特征在于：所述的药物部分D为奥瑞他汀(auristatin)类细胞毒性剂、安曲霉素(Anthramycin)类细胞毒性剂、蒽环(anthracycline)类细胞毒性剂或嘌呤霉素(puromycin)细胞毒性剂、喜树碱类似物。


4.权利要求3所述的制备工艺，其特征在于：所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：于昭兴，李新芳，蓝明超，毛新洁，
申请(专利权)人：烟台迈百瑞国际生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37