抗卷曲蛋白抗体和使用方法技术

本发明专利技术提供了抗Fzd单克隆抗体和相关组合物，所述抗Fzd单克隆抗体和相关组合物可以在用于治疗疾病的各种治疗方法中的任一种治疗方法中使用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗卷曲蛋白抗体和使用方法相关申请的交叉引用本申请要求于2017年12月19日提交的美国临时申请第62/607,877号和于2018年6月4日提交的美国临时申请第62/680,508号的优先权，所述两个美国临时申请都通过全文引用的方式并入本文。关于序列表的声明与本申请相关的序列表以文本格式提供以代替纸质副本，并且在此通过引用并入本说明书中。含有序列表的文本文件的名称为SRZN_004_02WO_ST25.txt。文本文件为527KB，创建于2018年12月19日并且通过EFS-Web以电子方式提交。
本专利技术总体上涉及抗卷曲蛋白抗体和其抗原结合片段、组合物以及所述抗卷曲蛋白抗体和其抗原结合片段、组合物的使用方法。此类抗体可用于例如调节Wnt信号传导通路。
技术介绍
Wnt(“无翅相关整合位点”或“无翅和Int-1”或“无翅-Int”)配体和其信号在控制许多基本器官和组织(包含骨、肝、皮肤、胃、肠、肾、中枢神经系统、乳腺、味蕾、卵巢、耳蜗和许多其它组织)的发育、内稳态和再生中发挥了关键作用(例如，由Clevers、Loh和Nusse综述，2014；346:1248012)。对Wnt信号传导通路的调节具有治疗变性疾病和组织损伤的潜力。将调节Wnt信号传导作为治疗的挑战之一是存在多种Wnt配体和Wnt受体、卷曲蛋白1-10(Fzd1-10)，其中许多组织表达多种Fzd和重叠的Fzd。典型的Wnt信号还涉及作为共受体的低密度脂蛋白(LDL)受体相关蛋白5(LRP5)或低密度脂蛋白(LDL)受体相关蛋白6(LRP6)，除了Fzd之外，所述共受体也在各种组织中广泛表达。因此，在本领域中显然需要与一种或多种Fzd、LRP5或LRP6特异性结合的结合部分，如抗体。本专利技术解决了此需要。
技术实现思路
在各个实施例中，本专利技术提供了抗Fzd抗体和其抗原结合片段以及相关使用方法。在一个实施例中，本公开提供了一种分离的抗体或其抗原结合片段，其与一种或多种卷曲蛋白受体结合，其包括包含以下的序列：(i)针对表1A的抗体中的任何抗体所示的CDRH1、CDRH2和CDRH3序列；和/或(ii)针对表1A的抗体中的任何抗体所示的CDRL1、CDRL2和CDRL3序列，或所述抗体或其抗原结合片段的变体，所述变体包括一个或多个氨基酸修饰，其中所述变体在所述CDR序列中包括少于8个氨基酸取代。在特定实施例中，所述抗体或其抗原结合片段包括：包括与SEQIDNO:1-37、66或68中的任一个所示的氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列的重链可变区；或包括SEQIDNO:1-37、66或68中的任一个所示的氨基酸序列的重链可变区。在特定实施例中，所述抗体或其抗原结合片段包括：包括与SEQIDNO:38-65、67或69中的任一个所示的氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列的轻链可变区；或包括SEQIDNO:38-65、67或69中的任一个所示的氨基酸序列的轻链可变区。在特定实施例中，所述抗体或其抗原结合片段中的任一种抗体或其抗原结合片段是人源化的。在某些实施例中，所述抗体或其抗原结合片段中的任一种抗体或其抗原结合片段是单链抗体、scFv、缺乏铰链区的单价抗体、VHH或单结构域抗体(sdAb)或迷你体。在特定实施例中，所述抗体或其抗原结合片段中的任一种抗体或其抗原结合片段是Fab或Fab’片段。在某些实施例中，所述抗体或其抗原结合片段中的任一种抗体或其抗原结合片段是融合蛋白。在某些实施例中，所述抗体或其抗原结合片段与结合LRP5或LRP6的多肽序列融合。在某些实施例中，结合LRP5或LRP6的所述多肽序列是与LRP5或LRP6结合的抗体或其抗原结合片段。在所述抗体或其抗原结合片段中的任一种抗体或其抗原结合片段的特定实施例中，所述抗体或其抗原结合片段与以下中的一种或多种结合：卷曲蛋白1(Fzd1)、卷曲蛋白2(Fzd2)、卷曲蛋白3(Fzd3)、卷曲蛋白4(Fzd4)、卷曲蛋白5(Fzd5)、卷曲蛋白6(Fzd6)、卷曲蛋白7(Fzd7)、卷曲蛋白8(Fzd8)、卷曲蛋白9(Fzd9)和卷曲蛋白10(Fzd10)。在某些实施例中，所述抗体或其抗原结合片段中的任一种抗体或其抗原结合片段与以下中的两种或更多种结合：卷曲蛋白1(Fzd1)、卷曲蛋白2(Fzd2)、卷曲蛋白3(Fzd3)、卷曲蛋白4(Fzd4)、卷曲蛋白5(Fzd5)、卷曲蛋白6(Fzd6)、卷曲蛋白7(Fzd7)、卷曲蛋白8(Fzd8)、卷曲蛋白9(Fzd9)和卷曲蛋白10(Fzd10)。在某些实施例中，所述抗体或其抗原结合片段中的任一种抗体或其抗原结合片段与以下结合：(i)Fzd1、Fzd2、Fzd7和Fzd9；(ii)Fzd1、Fzd2和Fzd7；(iii)Fzd5和Fzd8；(iv)Fzd5、Fzd7和Fzd8；(v)Fzd1、Fzd4、Fzd5和Fzd8；(vi)Fzd1、Fzd2、Fzd5、Fzd7和Fzd8；(vii)Fzd4和Fzd9；(viii)Fzd9和Fzd10；(ix)Fzd5、Fzd8和Fzd10；(x)Fzd4、Fzd5和Fzd8；(xi)Fzd1、Fzd5、Fzd7和Fzd8或(xii)Fzd1、Fzd2、Fzd4、Fzd5、Fzd7和Fzd8。在相关实施例中，本公开提供了一种分离的抗体或其抗原结合片段，其与本文公开的抗体中的任一种抗体竞争与人Fzd受体结合。在特定实施例中，所述抗体或其抗原结合片段中的任一种抗体或其抗原结合片段以50μM或更低的KD与Fzd结合。在特定实施例中，所述抗体或其抗原结合片段中的任一种抗体或其抗原结合片段调节细胞，任选地，哺乳动物细胞中的Wnt信号传导通路。在特定实施例中，所述抗体或其抗原结合片段中的任一种抗体或其抗原结合片段增加了通过细胞中的Wnt信号传导通路的信号传导。在特定实施例中，所述抗体或其抗原结合片段中的任一种抗体或其抗原结合片段减少了通过细胞中的Wnt信号传导通路的信号传导。在某些实施例中，所述Wnt信号传导通路是典型的Wnt信号传导通路或非典型的Wnt信号传导通路。在另外的相关实施例中，本公开提供了一种对本文公开的抗体或其抗原结合片段进行编码的分离的多核苷酸。在某些实施例中，本公开提供了一种包括分离的多核苷酸的表达载体和包括所述表达载体的分离的宿主细胞。在另一个实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括生理学上可接受的赋形剂、稀释剂或载剂以及治疗有效量的本文公开的分离的抗体或其抗原结合片段。在另外的实施例中，本公开提供了一种用于激动细胞中的Wnt信号传导通路的方法，所述方法包括使所述细胞与本文公开的增加Wnt信号传导的分离的抗体或其抗原结合片段接触。在特定实施例中，所述抗体或其抗原结合片段是包括结合LRP5或LRP6的多肽序列的融合蛋白。在另一个实施例中，本公开提供了一种用于抑制细胞中的Wnt信号传导通路的方法，所述方法包括使所述细胞与本文公开的抑制Wnt信号传导的分离的抗体或其抗原结合片段接触。...

【技术保护点】
1.一种分离的抗体或其抗原结合片段，其与一种或多种卷曲蛋白受体结合，其包括包含以下的序列：/n(i)针对表1A的抗体中的任何抗体所示的CDRH1、CDRH2和CDRH3序列；/n(ii)针对表1A的抗体中的任何抗体所示的CDRL1、CDRL2和CDRL3序列；/n和/或/n(iii)表2中所示的CDRH1、CDRH2、CDRH3、CDRL1、CDRL2和CDRL3序列，/n或所述抗体或其抗原结合片段的变体，所述变体包括一个或多个氨基酸修饰，其中所述变体在所述CDR序列中包括少于8个氨基酸取代。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171219 US 62/607,877;20180604 US 62/680,5081.一种分离的抗体或其抗原结合片段，其与一种或多种卷曲蛋白受体结合，其包括包含以下的序列：
(i)针对表1A的抗体中的任何抗体所示的CDRH1、CDRH2和CDRH3序列；
(ii)针对表1A的抗体中的任何抗体所示的CDRL1、CDRL2和CDRL3序列；
和/或
(iii)表2中所示的CDRH1、CDRH2、CDRH3、CDRL1、CDRL2和CDRL3序列，
或所述抗体或其抗原结合片段的变体，所述变体包括一个或多个氨基酸修饰，其中所述变体在所述CDR序列中包括少于8个氨基酸取代。


2.根据权利要求1所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其包括重链可变区，所述重链可变区包括与SEQIDNO:1-37、66、68或1477中的任一个所示的氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列。


3.根据权利要求2所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其包括重链可变区，所述重链可变区包括SEQIDNO:1-37、66、68或1477中的任一个所示的氨基酸序列。


4.根据权利要求1到3中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其包括轻链可变区，所述轻链可变区包括与SEQIDNO:38-65、67、69或1476中的任一个所示的氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列。


5.根据权利要求4所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其包括轻链可变区，所述轻链可变区包括SEQIDNO:38-65、67、69或1476中的任一个所示的氨基酸序列。


6.根据权利要求1到5中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是人源化的。


7.根据权利要求1到6中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是单链抗体、scFv、缺乏铰链区的单价抗体、VHH或sdAb或迷你体。


8.根据权利要求7所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是VHH或sdAb。


9.根据权利要求1所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是Fab或Fab’片段。


10.根据权利要求1到9中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是融合蛋白。


11.根据权利要求10所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段与结合LRP5或LRP6的多肽序列融合。


12.根据权利要求11所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中结合LRP5或LRP6的所述多肽序列是与LRP5或LRP6结合的抗体或其抗原结合片段。


13.根据权利要求1到12中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段与以下中的一种或多种结合：卷曲蛋白1(Fzd1)、卷曲蛋白2(Fzd2)、卷曲蛋白3(Fzd3)、卷曲蛋白4(Fzd4)、卷曲蛋白5(Fzd5)、卷曲蛋白6(Fzd6)、卷曲蛋白7(Fzd7)、卷曲蛋白8(Fzd8)、卷曲蛋白9(Fzd9)和卷曲蛋白10(Fzd10)。


14.根据权利要求13所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段与以下中的两种或更多种结合：卷曲蛋白1(Fzd1)、卷曲蛋白2(Fzd2)、卷曲蛋白3(Fzd3)、卷曲蛋白4(Fzd4)、卷曲蛋白5(Fzd5)、卷曲蛋白6(Fzd6)、卷曲蛋白7(Fzd7)、卷曲蛋白8(Fzd8)、卷曲蛋白9(Fzd9)和卷曲蛋白10(Fzd10)。


15.根据权利要求14所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段与以下结合：(i)Fzd1、Fzd2、Fzd7和Fzd9；(ii)Fzd1、Fzd2和Fzd7；(iii)Fzd5和Fzd8；(iv)Fzd5、Fzd7和Fzd8；(v)Fzd1、Fzd4、Fzd5和Fzd8；(vi)Fzd1、Fzd2、Fzd5、Fzd7和Fzd8；(vii)Fzd4和Fzd9；(viii)Fzd9和Fzd10；(ix)Fzd5、Fzd8和Fzd10；(x)Fzd4、Fzd5和Fzd8；(xi)Fzd1、Fzd5、Fzd7和Fzd8；或(xii)Fzd1、Fzd2、Fzd4、Fzd5、Fzd7和Fzd8。


16.一种分离的抗体或其抗原结合片段，其与根据权利要求1到15中任一项所述的抗体竞争与人卷曲蛋白结合。


17.根据权利要求1到16中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其以50μM或更低的KD与所述Fzd结合。


18.根据权利要求1到17中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其调节细胞，任选地哺乳动物细胞中的Wnt信号传导通路。


19.根据权利要求18所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其增加了通过所述细胞中的所述Wnt信号传导通路的信号传导。


20.根据权利要求18所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其减少了通过所述细胞中的所述Wnt信号传导通路的信号传导。


21.根据权利要求18到20中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述Wnt信号传导通路是...

【专利技术属性】
技术研发人员：李阳，袁之邺，亚伦·肯·佐藤，叶文琛，鲁成钢，帕塔萨拉蒂·桑帕库玛，克劳迪娅·伊冯·贾达，
申请(专利权)人：瑟罗泽恩公司，
类型：发明
国别省市：美国;US