结合CTLA-4的抗体及其用途制造技术

公开了分离的单克隆抗体，其包含CD152结合结构域，其中抗体与人CD152特异性结合。还提供了制备和使用抗体以治疗包括癌症和自身免疫性疾病的疾病的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】结合CTLA-4的抗体及其用途专利
本专利技术涉及单克隆抗CTLA-4抗体、编码该抗体的核酸、含有该核酸的表达载体和重组细胞以及包含该抗体的药物组合物。还提供了制备该抗体的方法以及使用该抗体治疗包括癌症和自身免疫性疾病在内的疾病的方法。专利技术背景癌症免疫疗法是癌症治疗中的最新突破，它利用患者自身的免疫系统攻击肿瘤细胞。在肿瘤微环境中促进强大的CD8T细胞依赖性细胞毒性应答对于产生有效的抗肿瘤免疫应答非常重要。然而，肿瘤倾向于通过利用T细胞抑制机制来逃避免疫监视。肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的耗竭导致细胞毒性T细胞的无反应性和肿瘤细胞的逃逸(WherryandKurachi,2015,NatRevImmunol.,2015,15:486-499；DyckandMills,2017,Eur.J.Immunol.,47(5):765-779)。免疫检查点蛋白的抑制剂具有治疗多种肿瘤，如转移性黑色素瘤、肺癌、乳腺癌和肾细胞癌的潜力。CTLA-4(CD152)是T细胞表面上的此类抑制性检查点分子。它最初是通过鼠溶细胞性T细胞cDNA文库的差异筛选来鉴定的(Brunetetal.,1987,Nature,328:267-270)。提示了CTLA-4可以充当T细胞活化的负调节物(Walunasetal.,1994,Immunity,1:405-413)。CTLA-4在调节性T细胞的表面上组成性表达，但数量相对较低。它在T细胞活化后上调。活化后，CTLA-4与CD80(B7.1)和CD86(B7.2)相互作用，CD80(B7.1)和CD86(B7.2)也是CD28的配体，其结合亲和力比CD28高得多(vanderMerweetal.,1997,JExpMed.185:393-403；Alegreetal.,2001,NatRevImmunol,1:220-228)。CD28信号传导促进T细胞活化，而CTLA-4与其配体B7.1和B7.2的相互作用阻止T细胞的进一步活化。CTLA-4拮抗剂引人注目，因为显示了用拮抗剂阻断CTLA-4为针对肿瘤的有效疗法(美国专利号6,984,720)。使用拮抗剂如抗CTLA-4mAb对该表面受体进行抑制增强效应CD4和CD8T细胞应答，并降低Treg细胞的抑制功能。近年来，基于CTLA-4拮抗剂的治疗进展很快。伊匹单抗(ipilimumab)是一种人源化抗体且阻断CTLA-4的作用，其增强T细胞对肿瘤细胞的应答。伊匹单抗是首个在随机对照3期临床试验中显示出改进患有转移性黑色素瘤的患者的总生存的药物。在以前用其他疗法治疗的患者中以3mg/kg的剂量作为单一疗法以及在初治患者中以10mg/kg的剂量与达卡巴嗪(dacarbazine)组合，它都有可控的安全性概况。除恶性黑色素瘤外，伊匹单抗也正在开发用于前列腺癌和非小细胞肺癌的治疗。然而，尽管有上述进展，仍期望具有改进的亲和力、特异性和可开发性的CTLA-4拮抗剂。另外，还需要涉及在人类中有效抑制CTLA-4信号传导活性，同时引起最小的不良副作用的抗CTLA-4抗体的更有效的疗法。专利技术概述公开了分离的单克隆抗体，其包含CD152结合结构域，其中CD152结合结构域包含包括CDR1、CDR2和CDR3的免疫球蛋白重链可变区，其中CDR1、CDR2和CDR3分别包含与以下具有至少80％、85％、88％、90％、92％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的氨基酸序列：(1)SEQIDNO:4、5和6；(2)SEQIDNO:10、11和12；(3)SEQIDNO:16、17和18；(4)SEQIDNO:22、23和24；(5)SEQIDNO:28、29和30；(6)SEQIDNO:34、35和36；(7)SEQIDNO:40、41和42；(8)SEQIDNO:46、47和48；(9)SEQIDNO:52、53和54；(10)SEQIDNO:58、59和60；(11)SEQIDNO:64、65和66；(12)SEQIDNO:70、71和72；(13)SEQIDNO:76、77和78；(14)SEQIDNO:82、83和84；(15)SEQIDNO:88、89和90；(16)SEQIDNO:94、95和96；(17)SEQIDNO:100、101和102；(18)SEQIDNO:106、107和108；(19)SEQIDNO:112、113和114；(20)SEQIDNO:118、119和120；(21)SEQIDNO:124、125和126；(22)SEQIDNO:130、131和132；(23)SEQIDNO:136、137和138；(24)SEQIDNO:142、143和144；(25)SEQIDNO:148、149和150；(26)SEQIDNO:154、155和156；(27)SEQIDNO:160、161和162；(28)SEQIDNO:166、167和168；(29)SEQIDNO:172、173和174；(30)SEQIDNO:178、179和180；(31)SEQIDNO:184、185和186；或(32)SEQIDNO:190、191和192。在一些情况下，抗体是仅重链的抗体。在一些情况下，抗体不包含免疫球蛋白轻链。在一些情况下，抗体包含一条免疫球蛋白重链。在一些情况下，抗体包含两条免疫球蛋白重链。在一些情况下，抗体由两条免疫球蛋白重链组成。在一些情况下，两条免疫球蛋白重链的至少一条包含与SEQIDNO:2、8、14、20、26、32、38、44、50、56、62、68、74、80、86、92、98、104、110、116、122、128、134、140、146、152、158、164、170、176、182或188具有至少80％、85％、88％、90％、92％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的氨基酸序列。在一些情况下，免疫球蛋白重链可变区包含与SEQIDNO:3、9、15、21、27、33、39、45、51、57、63、69、75、81、87、93、99、105、111、117、123、129、135、141、147、153、159、165、171、177、183或189具有至少80％、85％、88％、90％、92％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的氨基酸序列。在一些情况下，抗体与人CD152特异性结合。在一些情况下，抗体以高亲和力与人CD152结合。在一些情况下，抗体以比伊匹单抗类似物更高的亲和力与人CD152结合。在一些情况下，抗体以比伊匹单抗类似物高至少2倍、至少5倍、至少10倍、至少20倍、至少30倍、至少50倍或至少100倍的亲和力与人CD152结合。在一些情况下，抗体以1.0*10-7M或更小的Kd从人CD152解离。在一些情况下，抗体以1.0*10-8M或更小的Kd从人CD152解离。在一些情况下，抗体以1.0*10-9M或更小的Kd从人CD152解离。在一些情况下，抗体以1.0*10-10M或更小的Kd从人CD152解离。在一些情况下，抗体以1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.分离的单克隆抗体，其包含CD152结合结构域，其中所述CD152结合结构域包含包括CDR1、CDR2和CDR3的免疫球蛋白重链可变区，其中所述CDR1、CDR2和CDR3分别包含与以下具有至少80％、85％、88％、90％、92％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的氨基酸序列：/n(1)SEQ ID NO:4、5和6；/n(2)SEQ ID NO:10、11和12；/n(3)SEQ ID NO:16、17和18；/n(4)SEQ ID NO:22、23和24；/n(5)SEQ ID NO:28、29和30；/n(6)SEQ ID NO:34、35和36；/n(7)SEQ ID NO:40、41和42；/n(8)SEQ ID NO:46、47和48；/n(9)SEQ ID NO:52、53和54；/n(10)SEQ ID NO:58、59和60；/n(11)SEQ ID NO:64、65和66；/n(12)SEQ ID NO:70、71和72；/n(13)SEQ ID NO:76、77和78；/n(14)SEQ ID NO:82、83和84；/n(15)SEQ ID NO:88、89和90；/n(16)SEQ ID NO:94、95和96；/n(17)SEQ ID NO:100、101和102；/n(18)SEQ ID NO:106、107和108；/n(19)SEQ ID NO:112、113和114；/n(20)SEQ ID NO:118、119和120；/n(21)SEQ ID NO:124、125和126；/n(22)SEQ ID NO:130、131和132；/n(23)SEQ ID NO:136、137和138；/n(24)SEQ ID NO:142、143和144；/n(25)SEQ ID NO:148、149和150；/n(26)SEQ ID NO:154、155和156；/n(27)SEQ ID NO:160、161和162；/n(28)SEQ ID NO:166、167和168；/n(29)SEQ ID NO:172、173和174；/n(30)SEQ ID NO:178、179和180；/n(31)SEQ ID NO:184、185和186；或/n(32)SEQ ID NO:190、191和192。/n...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171220 US 62/607,9171.分离的单克隆抗体，其包含CD152结合结构域，其中所述CD152结合结构域包含包括CDR1、CDR2和CDR3的免疫球蛋白重链可变区，其中所述CDR1、CDR2和CDR3分别包含与以下具有至少80％、85％、88％、90％、92％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的氨基酸序列：
(1)SEQIDNO:4、5和6；
(2)SEQIDNO:10、11和12；
(3)SEQIDNO:16、17和18；
(4)SEQIDNO:22、23和24；
(5)SEQIDNO:28、29和30；
(6)SEQIDNO:34、35和36；
(7)SEQIDNO:40、41和42；
(8)SEQIDNO:46、47和48；
(9)SEQIDNO:52、53和54；
(10)SEQIDNO:58、59和60；
(11)SEQIDNO:64、65和66；
(12)SEQIDNO:70、71和72；
(13)SEQIDNO:76、77和78；
(14)SEQIDNO:82、83和84；
(15)SEQIDNO:88、89和90；
(16)SEQIDNO:94、95和96；
(17)SEQIDNO:100、101和102；
(18)SEQIDNO:106、107和108；
(19)SEQIDNO:112、113和114；
(20)SEQIDNO:118、119和120；
(21)SEQIDNO:124、125和126；
(22)SEQIDNO:130、131和132；
(23)SEQIDNO:136、137和138；
(24)SEQIDNO:142、143和144；
(25)SEQIDNO:148、149和150；
(26)SEQIDNO:154、155和156；
(27)SEQIDNO:160、161和162；
(28)SEQIDNO:166、167和168；
(29)SEQIDNO:172、173和174；
(30)SEQIDNO:178、179和180；
(31)SEQIDNO:184、185和186；或
(32)SEQIDNO:190、191和192。


2.权利要求0的分离的单克隆抗体，其中所述抗体是仅重链的抗体。


3.权利要求1或2的分离的单克隆抗体，其中所述抗体包含两条免疫球蛋白重链。


4.权利要求0至3中任一项的分离的单克隆抗体，其中所述抗体由两条免疫球蛋白重链组成。


5.权利要求3或4的分离的单克隆抗体，其中所述两条免疫球蛋白重链的至少一条包含与SEQIDNO:2、8、14、20、26、32、38、44、50、56、62、68、74、80、86、92、98、104、110、116、122、128、134、140、146、152、158、164、170、176、182或188具有至少80％、85％、88％、90％、92％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的氨基酸序列。


6.权利要求0至5中任一项的分离的单克隆抗体，其中所述免疫球蛋白重链可变区包含与SEQIDNO:3、9、15、21、27、33、39、45、51、57、63、69、75、81、87、93、99、105、111、117、123、129、135、141、147、153、159、165、171、177、183或189具有至少80％、85％、88％、90％、92％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的氨基酸序列。


7.权利要求0至6中任一项的分离的单克隆抗体，其表现出以下特性的一种或组合：(a)与人CD152结合；(b)与猴CD152特异性结合；(c)不与小鼠CD152结合；(d)阻断CD152与CD80、CD86或两者的结合；(e)促进免疫细胞分泌IL-2；(f)诱导T细胞活化...

【专利技术属性】
技术研发人员：甘馨，何云，沈宇强，赵久乔，戎一平，F·格罗斯维尔德，D·德拉贝克，MR·范哈佩恩，R·扬森，
申请(专利权)人：和铂医药上海有限责任公司，
类型：发明
国别省市：上海;31