【技术实现步骤摘要】
一种测定人血浆中卡托普利浓度的方法
本专利技术涉及血浆测定
，具体为一种测定人血浆中卡托普利浓度的方法。
技术介绍
卡托普利为竞争性血管紧张素转换酶抑制剂，使血管紧张素I不能转换为血管紧张素II，从而降低外周血管阻力，并通过抑制醛固酮分泌，减少水钠潴留。对多种类型高血压均有明显降压作用，并能改善充血性心力衰竭患者的心脏功能。目前，药物生物等效性以及生物利用度的研究均通过测定药物的药动学参数来评价。因此，血浆中卡托普利的浓度测定对于卡托普利新药开发显得极为重要。由于卡托普利分子含有一个巯基基团，很容易与白蛋白和其他血浆蛋白结合。同时，卡托普利分子之间，卡托普利与血浆中内源性的化合物(例如半胱氨酸，谷胱甘肽)之间均会发生反应，生成二硫化合物。上述因素的影响，导致卡托普利在健康人血浆中极不稳定，因此很难准确测定其浓度。为了保持健康人血浆中卡托普利的稳定，现有文献报道了两种方法，一种是向血浆中预先加入化学稳定剂，抑制卡托普利的反应，经过前处理后，通过LC-MS/MS法直接测定卡托普利的浓度；另一种是向血浆中加入分子衍生...
【技术保护点】
1.一种测定人血浆中卡托普利浓度的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n步骤一：储备液的配制，用0.1％甲酸的乙腈：水(9:1，v:v)作为稀释液溶解卡托普利对照品，得浓度为400μg/mL的卡托普利标准曲线储备液(STD Stock-KTPL)和卡托普利质控储备液(QC Stock-KTPL)；/n步骤二：工作液的配制，标准曲线工作液以STD Stock-KTPL为起始溶液，以0.1％甲酸的乙腈：水(9:1，v:v)溶液为稀释溶剂逐级稀释得到卡托普利的各级标准曲线工作液；质控工作液以QC Stock-KTPL为起始溶液，以0.1％甲酸的乙腈：水(9:1，v:v)溶液为稀释溶...
【技术特征摘要】
1.一种测定人血浆中卡托普利浓度的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一：储备液的配制，用0.1％甲酸的乙腈：水(9:1，v:v)作为稀释液溶解卡托普利对照品，得浓度为400μg/mL的卡托普利标准曲线储备液(STDStock-KTPL)和卡托普利质控储备液(QCStock-KTPL)；
步骤二：工作液的配制，标准曲线工作液以STDStock-KTPL为起始溶液，以0.1％甲酸的乙腈：水(9:1，v:v)溶液为稀释溶剂逐级稀释得到卡托普利的各级标准曲线工作液；质控工作液以QCStock-KTPL为起始溶液，以0.1％甲酸的乙腈：水(9:1，v:v)溶液为稀释溶剂逐级稀释得到卡托普利的各级质控工作液；
步骤三：标准曲线和质控样本的配制，吸取95％体积的EDTA-K2抗凝人空白血浆，加入5％体积200mM二硫苏糖醇(DTT)的生理盐水溶液，配制成含10mMDTT的空白血浆，取上述含10mMDTT的空白血浆950μL，加入50μL上述工作液，得到曲线样本和质控样本；
步骤四：内标工作液的配制，用0.1％甲酸的乙腈：水(1:1，v:v)作为稀释液稀释卡托普利-d3对照品得到浓度为500ng/mL的卡托普利-d3内标工作液；
步骤五：样品预处理，取100L血浆样品于96孔板中，加入内标工作液30uL，涡旋3-8min，再加入乙腈溶液300L，震荡涡旋10-20min，高速离心(4000rpm)15-30min，取180L上清液至另一预先加有180L0.1％甲酸水溶液的96孔板中，混匀5-10min，高速离心(4000rpm)3-8min后进LC-MS/MS分析，进样体积6L；
步骤六：LC-MS/MS分析，柱温箱和进样器的温度分别设定为40℃和4℃；色谱柱作为分离柱；洗针液为含0.1％甲酸的甲醇：水(1:1，v:v)，洗针模式为进样前后清洗，洗针体积为450L；流动相：0.05％甲酸的水溶液-0.05％甲酸的甲醇溶液(62:38)，等度条件，流速为0.40mL/min分离分析物，分析时间为3.8分钟；离子源的极性为负模式，离子监测方式为...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘文伟，
申请(专利权)人：武汉伯瑞恒医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42
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