一种甲磺酸卡莫司他有关物质的检测方法及应用技术

本发明专利技术提供了一种甲磺酸卡莫司他有关物质的检测方法及应用，该方法为液相色谱法，其中色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；流动相A是离子对溶液，流动相B是乙腈、甲醇、乙醇任一种或者两种的混合液；检测器为二极管阵列检测器，以一定量的样品浓度进样分析。该方法在甲磺酸卡莫司他合成工艺中的起始物料有关物质检测中和在合成工艺用到的催化剂4‑二甲氨基吡啶的残留量以及用到精制溶剂丙酮和DMF的残留量检测中的应用。

【技术实现步骤摘要】
一种甲磺酸卡莫司他有关物质的检测方法及应用
本专利技术属于药物分析
，具体涉及一种甲磺酸卡莫司他有关物质的液相检测方法及应用。
技术介绍
甲磺酸卡莫司他（英文名：CamostatMesilate）化学名成为2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基4-(4-胍基苯甲酰氧基)苯乙酸酯甲磺酸盐，分子式为C20H22N4O5CH4O3S，分子量为494.52，CAS登录号:59721-29-8。其结构如式I所示：甲磺酸卡莫司他是日本小野药品株式会社开发的非肽类蛋白酶抑制剂,它的作用机制为口服后迅速作用于机体的激肽生成系统、纤维蛋白溶解系统、凝血系统及补体系统,抑制这些体系的酶活性的异常亢进,从而控制慢性胰腺炎的症状,缓解疼痛,降低淀粉酶值。此外，本品还用于治疗弥漫性血管凝血症，另外还具有抗癌、降低尿蛋白作用。更有研究指出甲磺酸卡莫司他作为丝氨酸蛋白酶抑制剂在细胞实验中展现了抑制效果，能够阻断新冠病毒感染肺细胞，有望成为潜在的小分子药物。甲磺酸卡莫司他是以对氨基苯甲酸为起始物料，在一定条件下与氰胺反应制得对胍基苯甲酸盐酸盐。以N,N-二甲基氯乙酰胺为原料，经与对羟基苯乙酸缩合制得对羟基苯乙酸-N,N-二甲基氨基甲酰甲酯，对胍基苯甲酸盐酸盐与对羟基苯乙酸-N,N-二甲基氨基甲酰甲酯在一定条件下缩合，得到甲磺酸卡莫司他盐酸盐，用碳酸氢钠处理卡莫司他碳酸盐，卡莫司他碳酸盐在一定条件下经甲磺酸酸化制备甲磺酸卡莫司他.(该工艺引自陈宝泉等人在《化工进展》发表的论文《胰腺炎治疗药甲磺酸卡莫司他的合成工艺》)。氨基苯甲酸、N,N-二甲基氯乙酰胺和对羟基苯乙酸是合成甲磺酸卡莫司他的起始物料，而对氨基苯甲酸与氰氨反应，得到对胍基苯甲酸盐酸盐，对胍基苯甲酸盐酸盐再与对羟基苯乙酸反应，故可将对氨基苯甲酸和氰氨看作合成对胍基苯甲酸盐酸盐的起始物料，甲磺酸卡莫司他无需对对氨基苯甲酸和氰氨进行质量控制，N,N-二甲基氯乙酰胺无紫外吸收官能团，可在残留溶剂检测中对其进行控制。因此可以将对胍基苯甲酸盐酸盐和对羟基苯乙酸看作是合成甲磺酸卡莫司他的起始物料。另外甲磺酸卡莫司他稳定性较差，在酸、碱、氧化、光照、加热环境中均不稳定，可以降解成胍基苯甲酸盐酸盐、对羟基苯乙酸、对羟基苯乙酸-N,N-二甲基氨基甲酰甲酯、降解杂质A和降解杂质B，而同时降解杂质A和降解杂质B也是甲磺酸卡莫司他合成过程的工艺杂质。因此需要建立一种同时检测甲磺酸卡莫司他中胍基苯甲酸盐酸盐、对羟基苯乙酸、对羟基苯乙酸-N,N-二甲基氨基甲酰甲酯、降解杂质A和降解杂质B含量的方法，对甲磺酸卡莫司他的有关物质进行质量控制。甲磺酸卡莫司他是具有多适应症潜力，并且是潜在治疗新冠肺炎的小分子药物，建立甲磺酸卡莫司他有关物质的质控方法也是非常必要的。降解杂质A为4-(4-胍基苯甲酰氧基)苯乙酸甲磺酸盐，其结构式如下：降解杂质B为4-(4-胍基苯甲酰氧基)胍基苯甲酰氧基)苯乙酸[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]酯三氟乙酸盐，其结构式如下：
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种检测甲磺酸卡莫司他有关物质的液相方法和该方法在甲磺酸卡莫司他合成工艺中的起始物料有关物质检测中和在合成工艺用到的催化剂4-二甲氨基吡啶的残留量以及用到精制溶剂丙酮和DMF的残留量检测中的应用。为实现上述目的，本专利技术公开了如下的
技术实现思路
：一种检测甲磺酸卡莫司他有关物质的方法，其特征在于：所述检测方法为液相色谱法，色谱条件如下：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；流动相A为：离子对溶液，流动相B是乙腈、甲醇、乙醇任一种或者两种的混合液；稀释剂为：纯水或盐溶液、纯水或盐溶液与甲醇、乙腈、乙醇任一种或两种的混合溶液；所述的离子对溶液指的是：庚烷磺酸钠、十二烷基硫酸钠、四丁基硫酸氢铵的混合溶液并加入一定量酸；所述的酸指的是：乙酸、磷酸、甲磺酸、硼酸及甲酸任一种或者多种；所述的盐溶液为磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、醋酸铵、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾及甲酸铵任一种或两种的混合溶液；检测器为紫外检测器，二极管阵列检测器中的一种；所述检测器的检测波长为210nm~280nm；所述色谱柱选自：KromasilC18、ODS-C18、ThermoSyncronisC18、ThermoHypersilGOLDC18、WaterssymmetryC18、WatersRPC18、AgilentXDBC18、AgilentEclipsePlusC18、ShimadzuGLODSC18、WatersBEHC18；所述流动相流速为0.8-1.2ml/min；所述柱温为30~40℃；优选色谱柱为WatersBEHC18。本专利技术以一定量的样品浓度进样分析，样品浓度为0.5~3.0mg/ml；所述的流动相A：流动相B进行梯度洗脱，洗脱比例按下表：本专利技术优选流动相A的离子对溶液含有0.5%~1.5%的庚烷磺酸钠、0.05%~0.5%的十二烷基硫酸钠、1%~4%的四丁基硫酸氢铵；所述的百分数为质量百分数，和0.05%~1.0%的乙酸，所述的百分数为体积百分数；流动相B为甲醇。更加优选所述流动相A的离子对溶液含有0.5%的庚烷磺酸钠、0.1%的十二烷基硫酸钠、2%的四丁基硫酸氢铵和0.1%的乙酸。本专利技术所述的稀释剂为pH值为5.0~7.5的0.005mol/L~0.1mol/L的磷酸氢二钾溶液与甲醇的混合溶液；混合溶液中含量10%~60%的甲醇，所述的百分数为体积百分数。所述的磷酸二氢钾溶液的pH值为7.0，浓度为0.01mol/L。所述检测器为二极管阵列检测器；检测波长按下表：本专利技术进一步公开了甲磺酸卡莫司他有关物质的检测方法在用于甲磺酸卡莫司他合成工艺中的对起始物料有关物质检测中的应用。特别是在作为合成工艺用到的催化剂4-二甲氨基吡啶的残留量以及用到精制溶剂丙酮和DMF的残留量检测中的应用。实验结果显示：在进行起始物料有关物质控制和丙酮、DMF残留量控制时具有良好的专属性、灵敏度和准确度。本专利技术更加详细的描述如下：色谱条件如下：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，选自：KromasilC18、ODS-C18、ThermoSyncronisC18、ThermoHypersilGOLDC18、WaterssymmetryC18、WatersRPC18、AgilentXDBC18、AgilentEclipsePlusC18、ShimadzuGLODSC18。流动相A是离子对溶液，流动相B是乙腈、甲醇、乙醇任一种或者两种的混合液；检测器为紫外检测器，二极管阵列检测器中的一种；优选地，样品浓度为0.5~3.0mg/ml；优选地，所述的稀释剂为盐溶液与甲醇的混合溶液；进一步，所述的盐溶液与甲醇的混合溶液含有10%~60%的甲醇。所述百分比为体积百分比；更进一步，所述的盐溶液中盐浓度为0.01mol/L的磷酸氢二钾，盐溶液的pH值为7.0；优选地，所述本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种甲磺酸卡莫司他有关物质的检测方法，其特征在于：所述检测方法为液相色谱法，色谱条件如下：/n色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；/n流动相A为：离子对溶液，流动相B是乙腈、甲醇、乙醇任一种或者两种的混合液；/n稀释剂为：纯水或盐溶液、纯水或盐溶液与甲醇、乙腈、乙醇任一种或两种的混合溶液；/n所述的离子对溶液指的是：庚烷磺酸钠、十二烷基硫酸钠、四丁基硫酸氢铵的混合溶液并加入一定量酸；/n所述的酸指的是：乙酸、磷酸、甲磺酸、硼酸及甲酸任一种或者多种；/n所述的盐溶液为磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、醋酸铵、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾及甲酸铵任一种或两种的混合溶液；/n检测器为紫外检测器，二极管阵列检测器中的一种；所述检测器的检测波长为210nm~280nm；/n所述色谱柱选自： Kromasil C18、ODS-C18、Thermo Syncronis C18、Thermo HypersilGOLD C18 、Waters symmetry C18、Waters RP C18、Agilent XDB C18、Agilent EclipsePlus C18、Shimadzu GL ODS C18、Waters BEH C18 ；所述流动相流速为0.8-1.2ml/min；所述柱温为30~40℃；/n以一定量的样品浓度进样分析，样品浓度为0.5~3.0mg/ml；/n所述的流动相A：流动相B进行梯度洗脱，洗脱比例按下表：/n...

【技术特征摘要】
1.一种甲磺酸卡莫司他有关物质的检测方法，其特征在于：所述检测方法为液相色谱法，色谱条件如下：
色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；
流动相A为：离子对溶液，流动相B是乙腈、甲醇、乙醇任一种或者两种的混合液；
稀释剂为：纯水或盐溶液、纯水或盐溶液与甲醇、乙腈、乙醇任一种或两种的混合溶液；
所述的离子对溶液指的是：庚烷磺酸钠、十二烷基硫酸钠、四丁基硫酸氢铵的混合溶液并加入一定量酸；
所述的酸指的是：乙酸、磷酸、甲磺酸、硼酸及甲酸任一种或者多种；
所述的盐溶液为磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、醋酸铵、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾及甲酸铵任一种或两种的混合溶液；
检测器为紫外检测器，二极管阵列检测器中的一种；所述检测器的检测波长为210nm~280nm；
所述色谱柱选自：KromasilC18、ODS-C18、ThermoSyncronisC18、ThermoHypersilGOLDC18、WaterssymmetryC18、WatersRPC18、AgilentXDBC18、AgilentEclipsePlusC18、ShimadzuGLODSC18、WatersBEHC18；所述流动相流速为0.8-1.2ml/min；所述柱温为30~40℃；
以一定量的样品浓度进样分析，样品浓度为0.5~3.0mg/ml；
所述的流动相A：流动相B进行梯度洗脱，洗脱比例按下表：

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2.权利要求1所述的检...

【专利技术属性】
技术研发人员：张慕军，石涛，
申请(专利权)人：天津泰普制药有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12