一种测定血清中茚达特罗格隆溴铵浓度的方法技术

本发明专利技术提供了一种测定血清中茚达特罗格隆溴铵浓度的方法，包括以下步骤：储备液配制，工作液的配制，标准曲线和质控样本的配制，内标工作液的配制，茚达特罗样品预处理；格隆溴铵样品预处理，方法验证。有益效果为：本发明专利技术提出的测定血清中茚达特罗格隆溴铵浓度的方法灵敏高(茚达特罗LLOQ为20.00pg/mL，格隆溴铵LLOQ为5.000pg/mL)，对于格隆溴铵未见报道使用LC‑MS/MS法进行人血清血药浓度检测，且本法定量下限到5.000pg/mL，尽管已有LC‑MS/MS法已将茚达特罗定量下限分别降低至到3.000pg/mL和10.00pg/mL，且本法采用蛋白沉淀法处理样本，操作方便，方法稳定可靠，能满足临床大批量样本检测需求。

【技术实现步骤摘要】
一种测定血清中茚达特罗格隆溴铵浓度的方法
本专利技术涉及血浆测定
，具体为一种测定血清中茚达特罗格隆溴铵浓度的方法。
技术介绍
茚达特罗是一种新型的、超长效、快速起效的β2-肾上腺素受体激动剂，用于哮喘和慢性阻塞性肺疾病的日常治疗。茚达特罗通过刺激气道平滑肌中的β2-肾上腺素受体起作用，这导致肌肉松弛，增加气道的直径，从而在哮喘和慢性阻塞性肺病中收缩。茚达特罗在呼吸道膜中的脂质筏域有很高的亲和性，慢慢地从受体上分离，所以作用时间长。茚达特罗有很高的内在功效，起效快。格隆溴铵是一种合成的季铵盐结构的长效乙酰胆碱受体拮抗剂，具有抑制胃液分泌及调节胃肠蠕动作用，对人体乙酰胆碱能M3受体的选择性高于M2受体4倍，可特异性结合并抑制支气管平滑肌分布的M3型乙酰胆碱受体而扩张气道。目前，药物药代动力学以及生物等效性的研究均通过测定药物的药动学参数来评价。因此，血清中茚达特罗和格隆溴铵的浓度测定对于茚达特罗格隆溴铵药物开发显得极为重要，目前少有报道检测人血清中茚达特罗和格隆溴铵的分析方法。使用茚达特罗格隆溴铵吸入粉雾剂用胶囊后茚达特罗和格隆溴铵本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定血清中茚达特罗格隆溴铵浓度的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n步骤一：储备液配制，分别精密称量茚达特罗对照品2份，用甲醇溶解摇匀、配制成浓度20.00μg/mL的茚达特罗储备液，即储备液茚达特罗-STD-Stock，茚达特罗-QC-Stock；分别精密称量格隆溴铵对照品2份，用甲醇溶解摇匀、配制成浓度20.00μg/mL的格隆溴铵储备液，即储备液格隆溴铵-STD-Stock，格隆溴铵-QC-Stock；/n步骤二：工作液的配制，标准曲线工作液以茚达特罗-STD-Stock和格隆溴铵-STD-Stock为起始溶液，以甲醇：水(50：50，v：v)溶液为稀释溶剂逐级稀释得到茚达特罗和...

【技术特征摘要】
1.一种测定血清中茚达特罗格隆溴铵浓度的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一：储备液配制，分别精密称量茚达特罗对照品2份，用甲醇溶解摇匀、配制成浓度20.00μg/mL的茚达特罗储备液，即储备液茚达特罗-STD-Stock，茚达特罗-QC-Stock；分别精密称量格隆溴铵对照品2份，用甲醇溶解摇匀、配制成浓度20.00μg/mL的格隆溴铵储备液，即储备液格隆溴铵-STD-Stock，格隆溴铵-QC-Stock；
步骤二：工作液的配制，标准曲线工作液以茚达特罗-STD-Stock和格隆溴铵-STD-Stock为起始溶液，以甲醇：水(50：50，v：v)溶液为稀释溶剂逐级稀释得到茚达特罗和格隆溴铵的各级标准曲线工作液；质控工作液以茚达特罗-QC-Stock和格隆溴铵-QC-Stock为起始溶液，以甲醇：水(50：50，v：v)溶液为稀释溶剂逐级稀释得到茚达特罗和格隆溴铵的各级质控工作液；
步骤三：标准曲线和质控样本的配制，吸取95％体积的人空白血清，加入5％体积步骤二提出浓度的工作液，得到曲线样本和质控样本；
步骤四：内标工作液的配制，用甲醇溶解茚达特罗-d3和格隆溴铵-d3对照品，用50％甲醇作为稀释液稀释得到内标工作液浓度分别为8.000ng/mL、2.000ng/mL；
步骤五：茚达特罗样品预处理；取血清样本150.0mL于96孔板中，加入50.00mL内标工作液(茚达特罗-d3，8.000ng/mL)，加入沉淀剂乙腈450.0mL，...

【专利技术属性】
技术研发人员：王玲，
申请(专利权)人：武汉伯瑞恒医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42