本发明专利技术公开了一种基于嵌合型病毒样颗粒的新型冠状病毒疫苗，其包含作为有效成分的嵌合型病毒样颗粒。所述嵌合型病毒样颗粒主要由一类重组的嵌合蛋白聚集形成，所述重组嵌合蛋白是通过将SARS‑CoV‑2病毒的S蛋白受体结合区域嵌合到HBcAg的主要免疫决定区而获得。本发明专利技术的疫苗能够在人类体内产生较强免疫响应，免疫后人类能够抵御新型冠状病毒感染。
【技术实现步骤摘要】
基于嵌合型病毒样颗粒的新型冠状病毒疫苗
本专利技术涉及一种基因工程疫苗，具体涉及一种基于嵌合型病毒样颗粒的新型冠状病毒疫苗、其制备方法与应用，属于人用疫苗和人用生物制品领域。
技术介绍
新型冠状病毒肺炎(CoronavirusDisease，COVID-19)是一种由新型冠状病毒(SevereAcuteRespiratorySyndromeCoronavirus2，SARS-CoV-2，如下亦简称“新冠病毒”)引起的一种急性呼吸道传染性疾病。SARS-CoV-2以飞沫传播和接触传播为主，也存在粪便传播、气溶胶传播的可能，人群普遍易感，老年人及有基础疾病者感染后病情较重。SARS-CoV-2主要侵犯肺泡上皮细胞，感染后潜伏期约为1～14d，最长可达24d，临床症状主要以发热、干咳以及呼吸困难为主，病情严重者可快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和凝血功能障碍等。76.4％的患者存在肺部CT异常，CT主要表现为双侧毛玻璃样病变，重症患者表现可以为双侧多发性小叶和肺段实变。2020年1月31日，世界卫生组织(WHO)将该疫情列为国际关注的突发公共卫生事件(PublicHealthEmergencyofInternationalConcern，PHEIC)。2020年3月11日，WHO根据评估认为当前疫情可被称为全球大流行。我国将COVID-19纳入《中华人民共和国传染病防治法》规定的乙类传染病，并采取甲类传染病的预防、控制措施，同时将其纳入检疫传染病管理。SARS-CoV-2为正链单链RNA病毒，基因组长约为30kb，属于套式病毒目、冠状病毒科、β属冠状病毒。基因功能研究发现，SARS-CoV-25’段约2/3基因用于编码非结构性蛋白，这些非结构蛋白形成多聚体，行使复制酶和翻译功能，剩余约1/3基因编码四种结构蛋白，包括S蛋白(SpikeProtein)、M蛋白(MembranceProtein)、E蛋白(EnvelopeProtein)和N蛋白(NucleocapsidProtein)(ChenY，LiuQ，GuoD.Emergingcoronaviruses：Genomestructure，replication，andpathogenesis[J].JMedVirol，2020，92(4)：418-423.)。其中S蛋白是由1273个氨基酸残基构成的糖蛋白，主要作用是介导病毒识别宿主细胞受体，促进膜融合，并诱导免疫反应产生中和抗体。S蛋白由S1与S2两个亚基组成，其中S1亚基包含1个信号肽、N末端结构域(N-terminalDomain，NTD)和受体结合域(Receptor-bindingDomain，RBD)。S蛋白的受体结合区域(SRBD)是与宿主细胞受体直接结合的部分，在病毒吸附、进入宿主细胞过程中发挥重要作用。最新报道发现，SARS-CoV-2能够通过ACE2受体感染人类、蝙蝠和猪(ZhomP，YangXL，WangXG，etal.Apnemmoniaoutbreakassociatedwithanewcoronavirusofprobablebatorigin[J].Nature，2020.doi：10.1038/s41S86-020-2012-7.)，这说明SARS-CoV-2的S蛋白通过与ACE2受体结合，参与病毒入侵过程。SRBD序列有两段缺失，其不缺失的部分也能结合ACE2而入侵细胞(ChanJF，KokKH，ZhmZ，etal.Genomiccharacterizationofthe2019novelhmman-pathogeniccoronavirusisolatedfromapatientwithatypicalpneumoniaaftervisitingWuhan[J].EmergMicrobesInfections，2020，9(1)：221-236.)，说明SRBD某段特定序列在病毒与ACE2结合、吸附宿主细胞过程中发挥重要作用。因此，SRBD可能可以作为抗SARS-CoV-2药物和疫苗研发的重要作用靶点。然而，COVID-19目前尚无明确的药物应用，临床治疗多以对症、支持为主。针对COVID-19的疫苗仍处于研制阶段，迄今为止，还主要是依靠控制传染源与切断传播途径来管控疫情。
技术实现思路
本专利技术的主要目的在于提供一种新型冠状病毒疫苗、其制备方法与应用，以克服现有技术中的不足。为实现前述专利技术目的，本专利技术采用的技术方案包括：本专利技术实施例提供了一种嵌合蛋白，是通过将SARS-CoV-2病毒的S蛋白受体结合区域嵌合到HBcAg的主要免疫决定区而获得。进一步的，所述嵌合蛋白包含SEQIDNO：2所示的氨基酸序列或者与SEQIDNO：2的全长氨基酸序列95％以上相同的氨基酸序列。本专利技术实施例还提供了所述嵌合蛋白的编码基因。进一步的，所述编码基因包括序列如SEQIDNO：1所示的核酸分子或者与SEQIDNO：1的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子。本专利技术实施例还提供了包含所述编码基因的重组载体。本专利技术实施例还提供了包含所述编码基因或所述重组载体的重组菌。本专利技术实施例还提供了由所述重组菌表达的嵌合型病毒样颗粒。本专利技术实施例还提供了所述嵌合蛋白、所述编码基因、所述重组载体、所述重组菌或所述嵌合型病毒样颗粒在制备新型冠状病毒检测试剂中的用途或者在制备预防和/或治疗新型冠状病毒感染的药物中的用途。本专利技术实施例还提供了一种新型冠状病毒疫苗，其活性成分包括所述的嵌合型病毒样颗粒。进一步的，所述疫苗还可以包括药学上可接受的载体。本专利技术实施例还提供了一种制备所述嵌合型病毒样颗粒的方法，包括：将包含所述编码基因的重组载体转化大肠杆菌，再经培养及后处理，获得所述嵌合型病毒样颗粒。较之现有技术，本专利技术实施例通过将SARS-CoV-2的SRBD嵌合到HBcAg(乙肝病毒核心抗原)的MIR区域(主要免疫决定区，MajorImmunodominantRegion)，可以在HBcAg形成的病毒样颗粒表面展示SRBD，从而借助病毒样颗粒结构增强人体免疫系统对SRBD的免疫响应，获得良好的免疫效果，进而使免疫人群获得良好的免疫保护，免除新型冠状病毒的感染。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施方式的技术方案，下面将对实施方式中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。图1是本专利技术实施例2所获样品的SDS-PAGE图；图2是本专利技术实施例3所获病毒样颗粒的电镜照片；图3是本专利技术实施例4中基于试剂盒标准品检测结果的标准曲线。具体实施方式应该指出，以下详细说明都是示例性的，旨在对本专利技术提供进一步的说明。除非另有指明，本说明书使用的所有技术和科学术语具有与本专利技术所属
的普通技术人员通常理解的相同含义。...
【技术保护点】
1.一种嵌合蛋白，是通过将SARS-CoV-2病毒的S蛋白受体结合区域嵌合到HBcAg的主要免疫决定区而获得；优选的，所述嵌合蛋白包含SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列或者与SEQID NO：2的全长氨基酸序列95％以上相同的氨基酸序列。/n
【技术特征摘要】
1.一种嵌合蛋白，是通过将SARS-CoV-2病毒的S蛋白受体结合区域嵌合到HBcAg的主要免疫决定区而获得；优选的，所述嵌合蛋白包含SEQIDNO：2所示的氨基酸序列或者与SEQIDNO：2的全长氨基酸序列95％以上相同的氨基酸序列。
2.如权利要求1所述嵌合蛋白的编码基因；优选的，所述编码基因包括序列如SEQIDNO：1所示的核酸分子或者与SEQIDNO：1的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子。
3.包含权利要求2所述编码基因的重组载体；优选的，所述重组载体包括pET-22b(+)载体。
4.包含权利要求2所述编码基因或权利要求3所述重组载体的重组菌；优选的，所述重组菌包括大肠杆菌。
5.由权利要求4所述重组菌表达的嵌合型病毒样颗粒。
6.如权利要求1...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙祥明，曹文龙，孔迪，滕小锘，张大鹤，易小萍，
申请(专利权)人：苏州米迪生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。