识别人乙型肝炎病毒核心抗原的T细胞受体制造技术

本发明专利技术公开了识别人乙型肝炎病毒核心抗原的T细胞受体，涉及细胞免疫治疗技术领域。所述T细胞受体具有结合HLA‑A2‑HBV‑C18‑27抗原复合物的特性，所述T细胞受体包括TCRα链可变区和/或TCRβ链可变区。本发明专利技术还提供包含编码所述TCR的核苷酸序列或其互补序列的核酸分子，以及含有所述核酸分子的载体，以及转导所述核酸分子或所述载体的细胞，以及包含所述TCR、核酸分子、载体或细胞作为活性成分的药物组合物，以及所述TCR、核酸分子、载体、细胞、药物组合物的用途。本发明专利技术提供的识别人乙型肝炎病毒核心抗原的T细胞受体(TCR)具有特异性识别人乙型肝炎病毒核心抗原、亲和性良好的性能。

【技术实现步骤摘要】
识别人乙型肝炎病毒核心抗原的T细胞受体
本专利技术涉及细胞免疫治疗
，尤其涉及能特异性识别并结合人乙型肝炎病毒核心抗原的TCR，以及包含编码所述TCR的核苷酸序列或其互补序列的核酸分子，以及含有所述核酸分子的载体，以及转导所述核酸分子或所述载体的细胞，以及包含所述TCR、核酸分子、载体或细胞作为活性成分的药物组合物，以及所述TCR、核酸分子、载体、细胞、药物组合物的用途。
技术介绍
乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HepatitisBVirus，HBV)引起的一种肝脏感染性炎症，是病毒性肝炎中最严重的一种类型。HBV是一个部分环状的双链DNA病毒，全基因组长约3.2kb，包含4个部分重叠的开放阅读框(ORF)：S(preS1/preS2/S)ORF编码乙肝表面抗原(HBsAg)；C(即precore/core)ORF编码乙肝e抗原(HBeAg)和核心抗原(HBcAg)；XORF编码HBx蛋白；PORF编码聚合酶蛋白。根据HBV全基因组序列差异≥8％分为A、B、C、D、E、F、G、H、I和J共10个基因型。欧美等国家流行的HBV病毒基因型主要是A和D型,而我国流行的HBV病毒基因型主要是B和C型。HBV感染可以引起急性和慢性肝脏疾病，患者死于肝硬化和肝癌的风险显著升高。据世界卫生组织(WHO)公布的数据，全球有20亿人曾感染过HBV，其中3.5亿人以上为慢性HBV携带者，每年约有100万人死于HBV感染所引起的相关性疾病，包括肝衰竭、肝硬化和原发性肝癌等。乙型肝炎已成为严重威胁人类健康的世界性疾病，是全球主要公共卫生问题之一，也是我国当前流行最为广泛、危害性最严重的一种传染病，估计我国HBV病毒携带者约有9300万，其中3000万为慢性乙型肝炎患者。目前，慢性乙型肝炎的治疗方案主要是依赖于干扰素或核苷(酸)类似物，虽然这些治疗可以有效地控制病毒复制，但对于绝大多数患者来说并不能有效的根除病毒，患者需要终身服药。因而，一旦治疗中断，存在于宿主细胞核中的HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)便会驱动病毒反弹和疾病复发。长期服用这些药物治疗不仅费用昂贵，而且还会出现毒副作用或耐药。因此，目前迫切需要一种新的、有效的、无或较小毒副作用的靶向HBV的治疗方法。HBV对细胞的感染和转化使得细胞表达HBV特异的抗原，如核心抗原，这些抗原在正常人体组织中并无表达，是理想的T淋巴细胞识别并杀伤被感染细胞的靶点。然而，研究显示在慢性HBV患者的外周血中没有或仅存在数量稀少的HBV特异性T细胞。使用T细胞受体基因修饰T淋巴细胞(TCR-T)的过继免疫疗法通过将可识别HBV抗原的TCR基因整合至患者T细胞中，使得原本不具备抗原特异性识别能力的T细胞可识别并杀伤表达相应HBV抗原的靶细胞，从而达到治疗肝炎和肝癌的目的。分离并鉴定得到特异性、亲和力良好的TCR是实施TCR-T治疗的基础。不同TCR分子的特性赋予了TCR-T产品不同的效用功能。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是
技术介绍
中的一些缺陷，提供一种能识别并结合HLA-A2-HBV-C18-27抗原复合物的TCR，以及包含编码所述TCR的核苷酸序列或其互补序列的核酸分子，以及含有所述核酸分子的载体，以及转导所述核酸分子或所述载体的细胞，以及包含所述TCR、核酸分子、载体或细胞作为活性成分的药物组合物，以及所述TCR、核酸分子、载体、细胞、药物组合物的用途。所述HLA-A2-HBV-C18-27抗原复合物由人白细胞表面抗原HLA-A2及HBV核心抗原短肽(FLPSDFFPSI)或突变体(FLPSDFFPSV)组成，表达于目标靶细胞表面。为了解决上述问题，本专利技术提出以下技术方案：一方面，本专利技术提供一种识别人乙型肝炎病毒核心抗原的TCR，所述人乙型肝炎病毒核心抗原为HBV-C18-27抗原；所述TCR具有结合HLA-A2-HBV-C18-27抗原复合物的特性，所述TCR包含TCRα链可变区和/或TCRβ链可变区；所述TCRα链可变区的CDR3氨基酸序列为CAMREPSYSGAGSYQLTF(如SEQIDNO：7所示)；所述TCRβ链可变区的CDR3氨基酸序列为CASSTGRLGKNIQYF(如SEQIDNO：10所示)。优选的，所述TCRα链可变区的3个互补决定区氨基酸序列为：αCDR1：SEQIDNO：5，αCDR2：SEQIDNO：6，αCDR3：SEQIDNO：7。更优选的，所述TCRα链可变区的3个互补决定区核苷酸序列为：αCDR1：SEQIDNO：11，αCDR2：SEQIDNO：12，αCDR3：SEQIDNO：13。优选的，所述TCRβ链可变区的3个互补决定区氨基酸序列为：βCDR1：SEQIDNO：8，βCDR2：SEQIDNO：9，βCDR3：SEQIDNO：10。更优选的，所述TCRβ链可变区的3个互补决定区核苷酸序列为：βCDR1：SEQIDNO：14，βCDR2：SEQIDNO：15，βCDR3：SEQIDNO：16。优选的，以上所述的识别HBV-C18-27抗原的TCR，所述TCRα链可变区的氨基酸序列为与SEQIDNO：1具有至少90％序列相同性的氨基酸序列。优选的，TCRα链可包含SEQIDNO：5、SEQIDNO：6和SEQIDNO：7的全部序列。优选的，以上所述的识别HBV-C18-27抗原的TCR，所述TCRβ链可变区的氨基酸序列为与SEQIDNO：2具有至少90％序列相同性的氨基酸序列。优选的，TCRβ链可包含SEQIDNO：8、SEQIDNO：9和SEQIDNO：10的全部序列。第二方面，本专利技术提供一种核酸分子，所述核酸分子包含编码第一方面所述的识别HBV-C18-27抗原的TCR或所述的识别HBV-C18-27抗原的TCR链的核苷酸序列或其互补序列。优选的，所述核酸分子包含编码TCRα链可变区的核苷酸序列SEQIDNO：3和/或包含编码TCRβ链可变区的核苷酸序列SEQIDNO：4。第三方面，本专利技术提供一种载体，所述载体含有第二方面所述的核酸分子。优选的，所述载体为病毒载体。更优选的，所述载体为逆转录病毒载体或慢病毒载体。第四方面，本专利技术提供一种细胞，所述细胞转导第二方面所述核酸分子或第三方面所述载体，所述细胞可表达结合HLA-A2-HBV-C18-27抗原复合物的特异性TCR。优选的，所述细胞为T细胞或干细胞。第五方面，本专利技术提供一种药物组合物，所述药物组合物包含以上任一所述的识别HBV-C18-27抗原的TCR、以上任一所述的核酸分子、以上任一所述的载体或以上任一所述的细胞作为活性成分。本专利技术还提供以上任一所述的识别HBV-C18-27抗原的TCR、以上任一所述的核酸分子、以上任一所述的载体、以上任一所述的细胞、以上任一所述的药物组合物用于制备治疗肿瘤或病毒感本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种识别人乙型肝炎病毒核心抗原的T细胞受体，其特征在于，所述T细胞受体具有结合HLA-A2-HBV-C

【技术特征摘要】
1.一种识别人乙型肝炎病毒核心抗原的T细胞受体，其特征在于，所述T细胞受体具有结合HLA-A2-HBV-C18-27抗原复合物的特性，所述T细胞受体包括TCRα链可变区和/或TCRβ链可变区；
所述TCRα链可变区的CDR3氨基酸序列为CAMREPSYSGAGSYQLTF；
所述TCRβ链可变区的CDR3氨基酸序列为CASSTGRLGKNIQYF。


2.如权利要求1所述的识别人乙型肝炎病毒核心抗原的T细胞受体，其特征在于，所述TCRα链可变区包括以下互补决定区氨基酸序列：
αCDR1：TSDPSYG；
αCDR2：QGSYDQQN；
和/或，αCDR3：CAMREPSYSGAGSYQLTF。


3.如权利要求1所述的识别人乙型肝炎病毒核心抗原的T细胞受体，其特征在于，所述TCRβ链可变区包括以下互补决定区氨基酸序列：
βCDR1：LNHDA；
βCDR2：SQIVND；
和/或，βCDR3：CASSTGRLGKNIQYF。


4.如权利要求1-3任一项所述的识别人乙型肝炎病毒核心抗原的T细胞受体，其特征在于，所述TCRα链可变区的氨基酸序列为与SEQIDNO：1具有至少90％序列相同性的氨基酸序列；所述TCRβ链可变区的氨基酸序列为与SEQIDNO...

【专利技术属性】
技术研发人员：王明军，马意朋，区家裕，林通，
申请(专利权)人：深圳市因诺转化医学研究院，深圳因诺免疫有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44