一种维生素K1的纯化工艺制造技术

本发明专利技术涉及一种维生素K1的纯化工艺，其方法包括以下步骤：步骤1，使用C18反相硅胶柱作为填料的DAC600制备色谱柱，甲醇和乙酸乙酯混合溶液为流动相，对合成得到的VK1粗品进行层析纯化；步骤2，步骤1收获的经过反相硅胶柱层析纯化的VK1进一步用正相层析硅胶作为填料，正己烷为流动相，对VK1进行层析纯化。

【技术实现步骤摘要】
一种维生素K1的纯化工艺
：本专利技术涉及一种原料药的纯化方法，特别涉及一种维生素K1的纯化工艺。
技术介绍
：维生素k1，英文名VitaminK1，别名：植物甲萘醌；2-甲基-3-(3,7,11,15-四甲基十六-2-烯基)-1,4-萘醌，分子式C31H46O2，分子量450.71，结构式：维生素k1为维生素类及矿物质缺乏症用药。维生素K1注射液是2009版国家基本药物目录品种，主要用于各种维生素K缺乏引起的出血性疾病的治疗。在临床上应用于凝血酶过低症、维生素K1缺乏症、新生儿自然出血症的防治以及梗阻性黄疸、胆瘘、慢性腹泻等所致出血，香豆素类、水杨酸钠等所致的低凝血酶原血症。维生素还具有镇痛、缓解支气管痉挛的作用，对内脏平滑肌绞痛、胆管痉挛、肠痉挛引起的绞痛有明显的效果。维生素K1还可以用于多维食品和禽畜饲料的添加剂。维生素k1原料药为黄色至橙黄色透明粘稠的液体。无臭或几乎无臭；遇光易分解。在氯仿、乙醚或植物油中易溶，在乙醇中略溶，在水中不溶，折光率为1.525～1.528。2011年，国家食品药品监督管理局发布了第43期药品不良反应信息通报，表示维生素K1注射液存在严重过敏反应，提醒医务人员和患者要关注过敏反应的风险。数据分析显示，维生素K1注射液的安全风险除其本身外，还包括原料药中的杂质成分。维生素K1的制备方法包括：使用氧化银将未酯化的二氢维生素K1转化为维生素K1。使用六硝酸联铵为催化剂对二氢维生素K1二甲醚的氧化去甲基化可制备维生素K1。r>通过氧化二氢维生素K1碱金属盐制备维生素K1的方法。使用碱金属氢氧化物皂化二氢维生素K1单乙酸酯或单苯甲酸酯，然后使用空气氧化。日本专利公开(公开)212142/1982公开了使用二乙酯代替单酯为原料。使用空气氧化制备维生素K1方法。日本专利公开(公开)76854/1973公开了使用氧化银、氧化铅、二氧化锰、过氧化镍和二甲亚砜将二氢维生素K1氧化为维生素K1的方法现有方法所得到的产物，可能产生的杂质包括：维生素K1顺式异构体杂质(杂质3)，溶剂残留，以及相关的过氧化产物或中间体，如"β,γ-DihydroVitaminK1"(杂质2)，"VitaminK12,3-Epoxide"(杂质1)等。对维生素K1的纯化问题是制备维生素K1原料药的难题，特别是如何去除上述杂质，现有技术报道极少。本专利技术人经过研究发现采用层析法有利于安全性的提高，但如何将其应用于工业化生产，仍需要探索。层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。层析系统由两个相组成：一是固定相，另一是流动相。当待分离的混合物随流动相通过固定相时，由于各组分的理化性质存在差异，与两相发生相互作用(吸附、溶解、结合等)的能力不同，在两相中的分配(含量比)不同，且随流动相向前移动，各组分不断地在两相中进行再分配。分部收集流出液，可得到样品中所含的各单一组分，从而达到将各组分分离的目的。常用的层析方法包括，凝胶层析，离子交换层析，高效液相层析(HPLC)，亲和层析等。《沈阳药科大学学报》2013年第04期“维生素K1微乳剂在大鼠体内的药物动力学”孙婷；唐丽英；徐静瑶；赵云丽；于治国等公开了大鼠血浆中维生素K1的高效液相色谱测定法，并应用于经灌胃给予维生素K1微乳剂后的维生素K1药动学研究。方法为采用无水乙醇一乙醚(体积比为1：3)提取的方法处理血浆样品。采用反相高效液相色谱法测定维生素K1的血药浓度，色谱柱为ThermoC18柱(150mm×4.6mm，5p.m)，流动相为无水乙醇一水(体积比为90：10)，流速为1.1mL·min-1，检测波长为270nm，柱温为35℃。2005版中国药典公开了维生素K1的检测方法：照高效液相色谱法(附录Ⅴd)测定。避光操作。色谱条件与系统适用性试验用硅胶为填充剂；以石油醚(60-90℃)-正戊醇(2000:2.5)为流动相；检测波长为254nm。测定法取本品约20mg，精密称定.置50ml量瓶中.用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液5ml与内标溶液1ml，置10ml量瓶中，以流动相稀释至刻度.摇匀.取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取维生素k1对照品适量，精密称定，同法测定。按内标法以顺、反式异构体峰面积的和计算，即得。本专利技术人对现有技术进行了研究后，找到一种适合维生素k1的层析方法。
技术实现思路
：本专利技术提供一种维生素k1原料药的纯化方法，所述方法，包括以下步骤：步骤1，使用C18反相硅胶柱作为填料的DAC600制备色谱柱，甲醇和乙酸乙酯混合溶液为流动相，对合成得到的VK1粗品进行层析纯化。步骤2，步骤1收获的经过反相硅胶柱层析纯化的VK1进一步用正相层析硅胶作为填料，正己烷为流动相，对VK1进行层析纯化。其中，步骤1的层析条件如下：流动相为：甲醇和乙酸乙酯，两者比例为200：85，检测波长：270nm，300nm，流速：10L/min，上样量：5％，样品浓度：400mg/ml步骤1的操作过程如下：1)流动相配制将甲醇1781kg和乙酸乙酯676kg加入反应釜并混合搅拌均匀。2)样品配制称取VK1粗品9.00kg，加入乙酸乙酯8.00kg搅拌溶清，将Vk1粗品的乙酸乙酯溶液过预柱过滤以除去机械杂质和活性炭，用剩余的2.22Kg乙酸乙酯冲洗，冲洗液合并到滤液中，搅拌下称量加入甲醇8.88kg，搅拌并保证溶液为澄清状态；一般甲醇用量会比乙酸乙酯少(7.20Kg左右)，否则会发生浑浊；若溶液发生浑浊，则向其中加入少量乙酸乙酯即可溶清(0.20Kg左右)；将配制好的样品溶液平均分成4份待用。3)进针，冲柱，进针，洗脱；4)洗脱液浓缩将所收集的洗脱液减压浓缩，蒸出溶剂，加热从30℃逐渐升温至70℃，减压真空≥0.095MPa，抽蒸5～10小时，检测折光率1.520～1.528之间，出料，得到VK1精制品，供正相层析精制。其中，步骤2的层析条件如下：溶剂和洗脱液：正己烷填料：正相层析硅胶+活性炭步骤2操作过程如下：1)备柱取硅胶，加入正己烷浸泡装入层析柱中；再在硅胶上层铺垫一层活性炭；2)装料VK1精制品加入正己烷溶解，打开层析柱底部料液出口，使料液进入柱中；3)洗脱加入正己烷洗脱液，进行洗脱。流速大约在2～3Kg/min；前洗脱无色溶液返回流动相釜继续使用，待洗脱出黄色料液，开始收集，收集时间约2～3小时；4)浓缩将所收集的层析液减压浓缩，得VK1纯品。经过检测，本专利技术VK1纯品，各种指标如下：采用现有方法制备得到的VK1，有关杂质含量如下：收率总杂含量杂质1含量杂质2含量杂质3含量样品50％0.250.06％0.12％<本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种维生素K1的纯化工艺，其特征在于，所述工艺包括以下步骤：/n步骤1，使用C18反相硅胶柱作为填料的DAC600制备色谱柱，甲醇和乙酸乙酯混合溶液为流动相，对合成得到的VK1粗品进行层析纯化；/n步骤2，步骤1收获的经过反相硅胶柱层析纯化的VK1进一步用正相层析硅胶作为填料，正己烷为流动相，对VK1进行层析纯化。/n

【技术特征摘要】
1.一种维生素K1的纯化工艺，其特征在于，所述工艺包括以下步骤：
步骤1，使用C18反相硅胶柱作为填料的DAC600制备色谱柱，甲醇和乙酸乙酯混合溶液为流动相，对合成得到的VK1粗品进行层析纯化；
步骤2，步骤1收获的经过反相硅胶柱层析纯化的VK1进一步用正相层析硅胶作为填料，正己烷为流动相，对VK1进行层析纯化。


2.根据权利要求1所述的纯化工艺，其特征在于，
其中，步骤1的层析条件如下：
流动相为：甲醇和乙酸乙酯，两者比例为200：85，检测波长：270nm，300nm，
流速：10L/min，上样量：5％，样品浓度：400mg/ml。


3.根据权利要求1所述的纯化工艺，其特征在于，
步骤1的操作过程如下：
1)流动相配制
将甲醇1781kg和乙酸乙酯676kg加入反应釜并混合搅拌均匀。
2)样品配制
称取VK1粗品9.00kg，加入乙酸乙酯8.00kg搅拌溶清，将Vk1粗品的乙酸乙酯溶液过预柱过滤以除去机械杂质和活性炭，用剩余的2.22Kg乙酸乙酯冲洗，冲洗液合并到滤液中，搅拌下称量加入甲醇8.88kg，搅拌并保证溶液为澄清状态；一般甲醇用量会比乙酸乙酯少(7.20Kg左右)，否则会发生浑浊；若溶液发生浑浊，则向其中加入少量乙酸乙酯即可溶清(0.20Kg左右)；将配制好的样品溶液平均分成4份待用。
3)进针，冲柱，进针，洗脱；
4)洗脱液浓缩
将所收集的洗脱液减压浓缩，蒸出溶剂，加热从30℃逐渐升温至70℃，减压真空≥0.095MPa，抽蒸5～10小时，检测折光率1.520～1.528之间，出料，得到VK1精制品，供正相层析精制。


4.根据权利要求1所述的纯化工艺，其特征在于，
其中，步骤2的层析条件如下：
溶剂和洗脱液：正己烷
填料：正相层析硅胶+活性炭。


5.根据权利要求1所述的纯化工艺，其特征在于，
步骤2操作过程如下：
1)备柱
取硅胶，加入正己烷浸泡装入层析柱中；再在硅胶上层铺垫一层活性炭；
2)装料
VK1精制品加入正己烷溶解，打开层析柱底部料液出口，使料液进入柱中；
3)洗脱
加入正己烷洗脱液，进...

【专利技术属性】
技术研发人员：王志伟，沈海东，陈小芳，陈燕燕，赵师靖，
申请(专利权)人：浙江诚意药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33