一种印度黄檀的提取方法及提取物在抗肿瘤药物中的应用技术

本发明专利技术涉及印度黄檀的提取方法，所述黄檀为豆科Leguminosae黄檀属Dalbergia植物印度黄檀Dalbergia sissoo Roxb.；提取物包含醇提取物、乙醚提取物、石油醚提取物；提取物中分离的单体有4‑甲氧基黄檀醌(4‑Methoxydalbergione)。具体包括以下步骤：取印度黄檀心材，刨成薄片后粉碎并过2号筛，提取溶剂为乙醇或甲醇溶液，料液比为1∶2‑1∶8，加热回流提取2‑5次，每次1‑3h。趁热滤过，合并滤液，减压浓缩成稀浸膏状。通过细胞实验证实了印度黄檀具有重要的药用价值。其单体能够显著抑制人肝癌细胞HepG2、人乳腺癌细胞MCF‑7和小鼠乳腺癌细胞4T1及人脑胶质瘤细胞U87的增殖，影响其形态功能。将为印度黄檀的开发利用提供依据，为抗肿瘤药物的研发提供新的选择。

An extraction method of Dalbergia odorata and its application in antitumor drugs

【技术实现步骤摘要】
一种印度黄檀的提取方法及提取物在抗肿瘤药物中的应用
本专利技术属于医药
，具体涉及植物印度黄檀心材及其提取物在制备抗肿瘤药物中的用途。
技术介绍
恶性肿瘤严重危害着人类的健康，是引起全世界广泛关注的严重公共卫生问题。世界卫生组织(WHO)数据显示，人群中，因慢性病死亡的人数占所有死因的70％，其中肿瘤排第2位。据国际癌症研究机构(IARC)研宄预测，2020年全球癌症新发病例将达约1711万人，2030年将达约2165万人。我国2017年主要疾病的死亡率顺位结果显示：恶性肿瘤死亡率居第1位，据估计我国每年慢性病死亡人数约800万，肿瘤新发病例约310万，死亡约200万；近20年来发病率年均增长4％。中药抗肿瘤具有作用多靶点作用、药效持久、毒副作用小等有优点，中药及其有效成分已成为当今抗肿瘤药物研究热点之一。《中国药典》(2015版)规定降香唯一来源是降香檀，具有理气、活血化瘀、止痛止血的功效，用于治疗吐血，衄血及外伤出血，还可用于治疗肝郁胁痛，胸痹刺痛，跌扑伤痛，呕吐腹痛等。但降香檀资源经过度开采，国内野生资源已面临濒危，而人工栽培生长周期长，需要10年才能初步结香，30年才能成材，未能解决市场需求。印度黄檀DalbergiasissooRoxb.为豆科Leguminosae黄檀属Dalbergia植物，是一种较为珍贵的中药材，历史上曾作为中药降香广泛使用，称“番降”。我国学者根据形态、产地、功效等，经过长期考证，认为“番降”即印度黄檀。印度黄檀生长迅速，种植5年生的印度黄檀一般就能形成心材，10-15年就基本成材。由于印度黄檀生长优势明显，且具有确切的药用价值，我国自上世纪90年代开始在国内引种印度黄檀，主要分布于广东、广西、海南、福建、浙江、云南等地。目前印度黄檀未纳入《中国药典》，其药理活性研究较少，其活性部位、活性成分含量等都不够明确，主要成分的药理活性多集中在黄酮类化合物，相关黄酮类成分具体诸多功效，如抗血小板凝聚、增加冠脉流量，抗炎、抗菌、抗氧化作用，中枢神经系统对胶质细胞的保护作用及对骨肉瘤、肺癌等的抗肿瘤作用等。经检索文献和国内外专利，未发现有关印度黄檀及其提取物对肝癌、乳腺癌和胶质瘤等抗肿瘤作用报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种印度黄檀的提取方法及提取物在抗肿瘤药物中的应用，以解决上述
技术介绍
中存在的多种缺点和弊病。印度黄檀的提取方法，所述印度黄檀为豆科Leguminosae黄檀属Dalbergia植物印度黄檀DalbergiasissooRoxb.。具体包括以下步骤：取印度黄檀心材，刨成薄片后粉碎并过2号筛，提取溶剂为乙醇或甲醇溶液，料液比为1∶2-1∶8，加热回流提取2-5次，每次1-3h。趁热滤过，合并滤液，减压浓缩成稀浸膏状。印度黄檀石油醚提取物的方法包括以下步骤：取印度黄檀心材，刨成薄片后粉碎并过2号筛，加入石油醚溶剂，料液比为1∶2-1∶8，超声提取0.5-2h，浸泡12-48h，滤过，再次加入石油醚进行提取，提取2-5次，合并滤液，减压浓缩，得深棕色油状液体。印度黄檀乙醚提取物的方法包括以下步骤：取印度黄檀心材，刨成薄片后粉碎并过2号筛，加入乙醚溶剂，料液比为1∶2-1∶8，超声提取0.5-2h，冷浸12-48h，滤过，再次加入乙醚进行提取，提取2-5次，合并滤液，加入无水硫酸钠脱水12-24h，滤过，置通风橱内自然挥干乙醚，得深棕色油状液体。4-甲氧基黄檀醌(4-Methoxydalbergione)的分离、纯化方法包括以下步骤：将三氯甲烷部位、乙酸乙酯部位成分进行分离纯化：取少量甲醇分别溶解三氯甲烷部位、乙酸乙酯部位稠浸膏，加入1.5倍量硅胶(80～100目)拌样，研磨均匀，水浴挥至无醇味，上样。依次用环己烷-乙酸乙酯(体积比100∶0～0∶100)进行梯度洗脱，每份收集约100ml。经TLC检视，相同流分合并，减压浓缩，析出黄色晶体，经萃取、重结晶，得化合物4-甲氧基黄檀醌。所述抗肿瘤药物为含有印度黄檀原植物所制成的饮片和/或其醇提取物或乙醚提取物或石油醚提取物或其中分离的单体化合物4-甲氧基黄檀醌，还包含常规药用辅料；所述肿瘤是肝癌、乳腺癌和脑胶质瘤。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：印度黄檀DalbergiasissooRoxb.历史上曾作为中药降香广泛使用，称“番降”。具有行气、活血、止痛等药效。本专利技术通过细胞实验证实了印度黄檀中提取分离的单体化合物4-甲氧基黄檀醌(4-Methoxydalbergione)能够显著抑制人肝癌细胞HepG2、人乳腺癌细胞MCF-7和小鼠乳腺癌细胞4T1及人脑胶质瘤细胞U87的增殖。本专利技术将为印度黄檀的临床应用提供科学依据，为抗肿瘤药物的开发提供新的选择。本专利技术通过细胞实验证实了印度黄檀具有重要的药用价值。其单体能够显著抑制人肝癌细胞HepG2、人乳腺癌细胞MCF-7和小鼠乳腺癌细胞4T1及人脑胶质瘤细胞U87的增殖，影响其形态功能。将为印度黄檀的开发利用提供依据，为抗肿瘤药物的研发提供新的选择。附图说明图1为印度黄檀原植物图及其心材和粉末；图2为化合物4-甲氧基黄檀醌的外观图和紫外吸收光谱图；图3为单体化合物4-甲氧基黄檀醌(4-Methoxydalbergione)的HPLC色谱图；图4为化合物4-甲氧基黄檀醌对人肝癌细胞HepG2的细胞增殖及抑制作用结果；图5为化合物4-甲氧基黄檀醌对人乳腺癌细胞MCF-7的细胞增殖及抑制作用结果；图6为化合物4-甲氧基黄檀醌对鼠乳腺癌细胞4T1的细胞增殖及抑制作用结果；图7为化合物4-甲氧基黄檀醌对人脑胶质瘤细胞U87的细胞增殖及抑制作用结果；图8为化合物4-甲氧基黄檀醌对人肝癌细胞HepG2形态的影响；图9为化合物4-甲氧基黄檀醌对人脑胶质瘤细胞U87形态的影响。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1：印度黄檀饮片的制备本品为豆科Leguminosae黄檀属Dalbergia植物印度黄檀DalbergiasissooRoxb.的干燥心材(图1B)，除去边材，阴干，劈成小块，碾成细粉或镑片。实施例2：印度黄檀心材粉末的制备取印度黄檀，除去边材，阴干，刨成薄片后用粉碎机粉碎过50-150目筛，即得(图1C)。实施例3：印度黄檀醇提取物的制备取印度黄檀心材，刨成薄片后粉碎并过2号筛，提取溶剂为乙醇或甲醇溶液，料液比为1∶2-1∶8，加热回流提取2-5次，每次1-3h。趁热滤过，合并滤液，减压浓缩成稀浸膏状。实施例4：印度黄檀石油醚提取物的制备取印度黄檀心材，刨本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种印度黄檀的提取方法，其特征在于，所述印度黄檀为豆科Leguminosae黄檀属Dalbergia植物印度黄檀Dalbergia sissoo Roxb.；提取物包含醇提取物、乙醚提取物、石油醚提取物；提取物中分离的单体包含4-甲氧基黄檀醌(4-Methoxydalbergione)。/n

【技术特征摘要】
1.一种印度黄檀的提取方法，其特征在于，所述印度黄檀为豆科Leguminosae黄檀属Dalbergia植物印度黄檀DalbergiasissooRoxb.；提取物包含醇提取物、乙醚提取物、石油醚提取物；提取物中分离的单体包含4-甲氧基黄檀醌(4-Methoxydalbergione)。


2.根据权利要求1所述的印度黄檀的提取方法，其特征在于，具体包括以下步骤：取印度黄檀心材，刨成薄片后粉碎并过2号筛，提取溶剂为乙醇或甲醇溶液，料液比为1∶2-1∶8，加热回流提取2-5次，每次1-3h。趁热滤过，合并滤液，减压浓缩成稀浸膏状。


3.根据权利要求1所述的印度黄檀的提取方法，其特征在于，印度黄檀石油醚提取物的方法包括以下步骤：取印度黄檀心材，刨成薄片后粉碎并过2号筛，加入石油醚溶剂，料液比为1∶2-1∶8，超声提取0.5-2h，浸泡12-48h，滤过，再次加入石油醚进行提取，提取2-5次，合并滤液，减压浓缩，得深棕色油状液体。


4.根据权利要求1所述的印度黄檀的提取方法，其特征在于，印度黄檀乙醚提取物的方法包括以下步骤：取印度黄檀心材，刨成薄片后粉碎...

【专利技术属性】
技术研发人员：李然，徐长琼，纪晓宇，黎春辉，林励，吴杰，陈地灵，沈建新，祁龙凯，唐奇，李静，任秋芸，罗志华，钟汝婷，薛帆，
申请(专利权)人：岳阳市中医医院，李然，
类型：发明
国别省市：湖南;43