一种桑叶提取物及其制得的具有降血糖作用的桑叶多组分混合物制造技术

本发明专利技术涉及一种桑叶提取物及其制得的具有降血糖作用的桑叶多组分混合物。具体提供了一种桑叶DNJ提取物，它是通过以下方法制得：以桑叶为原料，利用酸性的乙醇溶液提取，即得；所述乙醇溶液浓度为65％～75％，乙醇溶液与桑叶的体积质量比为15～30mL/g。本发明专利技术的提取方法操作简单、条件温和，在本发明专利技术的特定提取条件下，所得桑叶DNJ提取物中DNJ的得率和纯度显著提高。进一步以本发明专利技术的桑叶DNJ提取物为原料，与桑叶黄酮提取物、桑叶多糖提取物在特定比例下混合制得的桑叶多组分混合物具有优异的降血糖作用，在制备降血糖药物中具有良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种桑叶提取物及其制得的具有降血糖作用的桑叶多组分混合物
本专利技术属于中药提取领域，具体涉及一种桑叶提取物及其制得的具有降血糖作用的桑叶多组分混合物。
技术介绍
桑叶，为桑科桑属植物桑树(MorusalbaL.)的叶子，其含有人体必需的氨基酸、维生素、矿物质等营养素及黄酮类、生物碱、多糖类、多酚类等多种生物活性成分。其中包括一种多羟基生物碱——1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin，DNJ)，它可以同小肠中的麦芽糖酶、蔗糖酶和乳糖酶等双糖苷酶结合，使双糖不能进一步分解为单糖被机体吸收，从而明显抑制餐后血糖急剧升高的现象，延缓糖尿病的发生与发展。此外，根据文献“桑叶多组分协同降血糖作用，王德萍、江岩等”记载，桑叶多糖、黄酮、DNJ混合物可通过减轻糖尿病小鼠体内氧化损伤，修复受损胰岛细胞、改善机体胰岛素效应细胞的抵抗作用，达到协同降血糖效应。因此，有效的从桑叶中提取出DNJ，对制备治疗糖尿病的药物具有非常重要的价值。目前，有关DNJ提取工艺的研究报道较少，现有提取工艺主要有微波辅助法、稀酸提取法、超声波辅助法。文献“正交优化桑叶中1-脱氧野尻霉素酸水提取的工艺”公开了一种用酸性水溶液提取桑叶中DNJ的方法，在其最佳工艺下：桑叶粉末粒度60目、提取温度55℃、pH＝3盐酸溶液、料液比为1:20(g/mL)、提取时间为1.5h，DNJ得率为0.062％，纯度为19.7％。文献“超声波辅助提取桑叶中1-脱氧野尻霉素工艺的响应面法优化”公开了一种以水为溶剂的超声波辅助提取方法，在其最佳提取工艺条件下：提取时间为60min、提取温度为75℃、超声功率为350W、液料比为16mL/g，DNJ最大提取量为1.873mg/g。上述提取方法均采用水作为提取溶剂，增加了后处理时除去溶剂的难度，不适应大规模生产；而且上述方法所得桑叶提取物中DNJ得率较低，增加了生产成本。因此，亟需一种能够提高桑叶提取物中DNJ的提取率和纯度的提取工艺。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种桑叶DNJ提取物及其制得的具有降血糖作用的桑叶多组分混合物。本专利技术提供了一种桑叶DNJ提取物，它是通过以下方法制得的：以桑叶为原料，利用酸性的乙醇溶液提取，即得；所述乙醇溶液浓度为65％～75％，乙醇溶液与桑叶的体积质量比为15～30mL/g。进一步地，所述酸性的乙醇溶液的pH为1～3，乙醇溶液浓度为70％～71％，乙醇溶液与桑叶的体积质量比为20～26mL/g，所述桑叶为粉碎后过60目筛的桑叶粉末；和/或，所述提取时，提取温度为45～65℃，优选为50～61℃。进一步地，所述提取方法为浸提法，包括以下步骤：以桑叶为原料，用pH为1～3的乙醇溶液提取；所述乙醇溶液浓度为70％～71％，提取温度为60～61℃，乙醇溶液与桑叶的体积质量比为20～21mL/g，提取次数为1～2次，提取时间为每次148～150min。进一步地，所述提取方法为超声波辅助酸性乙醇浸提法，包括以下步骤：以桑叶为原料，用pH为2～3的乙醇溶液在功率为320～322W的超声波下提取；所述乙醇溶液浓度为70％，提取温度为50℃，乙醇溶液与桑叶的体积质量比为20mL/g，提取次数为1～2次，提取时间为每次30～31min。进一步地，所述提取方法为微波辅助酸性乙醇浸提法，包括以下步骤：以桑叶为原料，用pH为2～3的乙醇溶液在功率为300～306W的微波下提取；所述乙醇溶液浓度为70％，乙醇溶液与桑叶的体积质量比为25～26mL/g，提取次数为1～2次，提取时间为每次70s。进一步地，所述方法还包括纯化步骤，纯化方法为：将提取所得产物经过大孔树脂和/或离子交换树脂纯化；优选的，所述大孔树脂为NKA-9大孔树脂，所述离子交换树脂为001×7阳离子交换树脂。进一步地，经过大孔树脂纯化时，上样条件如下：上样浓度为1.5mg/mL，pH＝8，上样流速为1.5BV/h；洗脱条件如下：洗脱剂为75％乙醇，洗脱剂流速为2BV/h；和/或，经过离子交换树脂纯化时，上样条件如下：上样浓度为0.8mg/mL，pH＝2，上样流速为1.5BV/h；洗脱条件如下：洗脱剂为1mol/L氨水，洗脱剂流速为1BV/h。本专利技术还提供了一种桑叶多组分混合物，所述桑叶多组分混合物是将上述桑叶DNJ提取物与桑叶黄酮提取物、桑叶多糖提取物混合后所得；优选的，所述桑叶多组分混合物中，DNJ、黄酮、多糖的重量比为1:6:8。进一步地，所述桑叶黄酮提取物是通过以下方法制得的：以桑叶为原料，利用乙醇溶液提取，即得；所述乙醇溶液浓度为70％，提取温度为88℃，乙醇溶液与桑叶的体积质量比为30mL/g，提取时间为2.5h；或，所述桑叶黄酮提取物是通过以下方法制得的：以桑叶为原料，用乙醇溶液在功率为126W的超声波下提取，即得；所述乙醇溶液浓度为51％，提取温度为70℃，乙醇溶液与桑叶的体积质量比为25mL/g，提取时间为36min；和/或，所述桑叶多糖提取物是通过以下方法制得的：以桑叶为原料，用水提取，即得；所述提取温度为82℃，水与桑叶的体积质量比为17mL/g，提取时间为74min。进一步地，所述桑叶黄酮提取物的制备方法还包括以下纯化步骤：将提取后所得产物经过AB-8大孔树脂纯化；优选的，纯化时的上样浓度为3mg/mL，上样流速为2BV/h；洗脱剂为70％乙醇，洗脱剂流速为2BV/h；和/或，所述桑叶多糖提取物的制备方法还包括以下纯化步骤：将提取后所得产物用乙醇溶液沉淀；优选的，所述乙醇溶液浓度为95％，乙醇溶液体积为多糖提取物的3倍，沉淀温度为2～4℃，沉淀时间为12h；优选的，所述桑叶多糖提取物的制备方法还包括以下纯化步骤：将上述用乙醇溶液沉淀后的体系经过AB-8大孔树脂纯化；优选的，纯化时的上样浓度为0.7mg/mL，上样流速为3BV/h，洗脱剂为蒸馏水，洗脱剂流速为2BV/h。如无特别说明，本专利技术的混合溶液的浓度均为体积浓度，比如70％乙醇为体积浓度70％的乙醇溶液。本专利技术提供了3种制备桑叶DNJ提取物的方法，实验证明：(1)采用酸性乙醇浸提时，在以下特定提取条件下：乙醇浓度为70～71％、提取时间为148～150min、液料比为20～21mL/g、提取温度为60～61℃，所得提取物中DNJ的得率高达2.939mg/g；(2)采用超声波辅助酸性乙醇浸提法提取时，在以下特定提取条件下：超声波功率为320～322W、提取时间为30～31min、液料比为2mL/g、提取温度为50℃，所得提取物中DNJ的得率高达3.203mg/g；(3)采用微波辅助酸性乙醇浸提法提取时，在以下特定提取条件下：微波功率为300～306W、提取时间为70s、液料比为25～26mL/g，所得提取物中DNJ的得率高达3.097mg/g。本专利技术还利用NKA-9大孔树脂、001×7阳离子交换树脂对所得桑叶DNJ提取物进行纯化，在特定的纯化条件下，显著提高了提取物中DNJ的纯度。此外，本专利技术以上述方法制得的桑本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种桑叶DNJ提取物，其特征在于：它是通过以下方法制得的：以桑叶为原料，利用酸性的乙醇溶液提取，即得；所述乙醇溶液浓度为65％～75％，乙醇溶液与桑叶的体积质量比为15～30mL/g。/n

【技术特征摘要】
1.一种桑叶DNJ提取物，其特征在于：它是通过以下方法制得的：以桑叶为原料，利用酸性的乙醇溶液提取，即得；所述乙醇溶液浓度为65％～75％，乙醇溶液与桑叶的体积质量比为15～30mL/g。


2.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于：所述酸性乙醇溶液的pH为1～3，乙醇溶液浓度为70％～71％，乙醇溶液与桑叶的体积质量比为20～26mL/g，所述桑叶为粉碎后过60目筛的桑叶粉末；
和/或，所述提取时，提取温度为45～65℃，优选为50～61℃。


3.根据权利要求1或2所述的提取物，其特征在于：所述提取方法为浸提法，包括以下步骤：以桑叶为原料，用pH为1～3的乙醇溶液提取；所述乙醇溶液浓度为70％～71％，提取温度为60～61℃，乙醇溶液与桑叶的体积质量比为20～21mL/g，提取次数为1～2次，提取时间为每次148～150min。


4.根据权利要求1或2所述的提取物，其特征在于：所述提取方法为超声波辅助酸性乙醇浸提法，包括以下步骤：以桑叶为原料，用pH为2～3的乙醇溶液在功率为320～322W的超声波下提取；所述乙醇溶液浓度为70％，提取温度为50℃，乙醇溶液与桑叶的体积质量比为20mL/g，提取次数为1～2次，提取时间为每次30～31min。


5.根据权利要求1或2所述的提取物，其特征在于：所述提取方法为微波辅助酸性乙醇浸提法，包括以下步骤：以桑叶为原料，用pH为2～3的乙醇溶液在功率为300～306W的微波下提取；所述乙醇溶液浓度为70％，乙醇溶液与桑叶的体积质量比为25～26mL/g，提取次数为1～2次，提取时间为每次70s。


6.根据权利要求1～5任一项所述的提取物，其特征在于：所述方法还包括纯化步骤，纯化方法为：将提取所得产物经过大孔树脂和/或离子交换树脂纯化；优选的，所述大孔树脂为NKA-9大孔树脂，所述离子交换树脂为001×7阳离子交换树脂。


7.根据权利要求6所述的提取物，其特征在于：经过大孔树脂纯化时，上样条件如下：上样浓度为1.5mg/mL，pH＝8，上样流速为...

【专利技术属性】
技术研发人员：江岩，吕奕姝，张月，
申请(专利权)人：成都医学院，
类型：发明
国别省市：四川;51