视神经脊髓炎谱系疾病生物标记物组及其应用和蛋白芯片、试剂盒制造技术

本发明专利技术属于生物医药的技术领域，尤其涉及视视神经脊髓炎谱系疾病生物标记物组及其应用和蛋白芯片、试剂盒。本申请提供了视神经脊髓炎谱系疾病生物标记物组，其特征在于，包括：单核细胞趋化蛋白‑3、LIGHT、巨噬细胞炎性蛋白‑1δ、胰岛素样生长因子结合蛋白‑2、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体、血小板生成素和疱疹病毒进入介质；其中，LIGHT为T细胞上可诱导表达的，与HSV的糖蛋白D竞争结合HVEM的淋巴毒素类似物。本申请填补了目前临床没有可靠的、准确的诊断鉴别视神经脊髓炎谱系疾病的产品和方法的空缺。

【技术实现步骤摘要】
视神经脊髓炎谱系疾病生物标记物组及其应用和蛋白芯片、试剂盒
本专利技术属于生物医药的
，尤其涉及视神经脊髓炎谱系疾病生物标记物组及其应用和蛋白芯片、试剂盒。
技术介绍
中枢神经系统脱髓鞘疾病是以中枢神经系统多病灶性及炎性脱髓鞘为主的一种自身免疫系统疾病，其临床特征主要包括反复发作、多次缓解及复发。目前中枢神经系统脱髓鞘疾病尚无有效的治疗方法，主要原因在于脱髓鞘及髓鞘再生的机制不清楚。在我国视神经脊髓炎谱系疾病的发病率位居中枢神经系统脱髓鞘疾病之首，视视神经脊髓炎谱系疾病包括经典视视神经脊髓炎(NMO)及视视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)，是一种主要累及视神经、脊髓和大脑特殊部位的罕见的、严重的中枢神经系统免疫相关性脱髓鞘疾病，临床以视神经炎和长节段脊髓炎为主要特征，其复发率及病残率极高，患者需要终身服用免疫抑制剂进行治疗和防止复发。NMOSD与MS(多发性硬化，multiplesclerosis，MS)都属于中枢神经系统脱髓鞘疾病，且这两种疾病的临床症状有一定的相似，但在临床诊断中，明确区分诊断这两种疾病尤为重要，因为两种疾病的治疗方案完全不同：对MS治疗效果很好的药物(如IFN-β，natalizumab,oralfingolimod等)不仅对NMOSD治疗无效反而会加重NMOSD的病情。NMOSD的患病率在全球各个地区均比较接近，约为(1-5)/(10万人/年)，但在非白种人中更为易感，东亚和非洲人群中患NMOSD的风险高于MS，而在白种人群中，MS的发病率约为NMOSD的40倍；在性别构成上，女性居多，女男患病比例高达(9-11):1；NMOSD为高复发、高致残性疾病，90％以上患者为多时相病程，亚洲相对多见，约60％的患者在1年内复发，90％的患者在3年内复发，多数患者遗留有严重的视力障碍和或肢体功能障碍、尿便障碍等。NMOSD的预后较MS差，5年内约有半数患者单眼视力严重损伤甚至失明，约有50％复发性NMOSD患者发病5年后不能独立行走。NMOSD在临床上的诊断步骤十分复杂及繁琐，病人血清中AQP4-IgG抗体滴度检测在NMOSD该种疾病诊断中起尤为关键的作用。AQP4-IgG是NMOSD的免疫标志物，是鉴别NMOSD与MS的重要参考依据之一，需反复检测。此外，NMOSD患者NMO-IgG强阳性其复发可能性较大，其抗体滴度有可能作为复发与治疗疗效的评价指标。但仍有近30％的NMOSD患者血清AQP4-IgG阴性，尽管血清AQP4-IgG阳性和阴性的NMOSD患者在临床表现及治疗原则上没有差别，但这些患者的潜在发病机制尚不清楚且给临床诊断带来很大的挑战，因此寻找NMOSD疾病新的分子标记物尤为重要。目前临床上，没有可靠的能在健康人群中准确诊断鉴别视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)的生物标记物，以及蛋白芯片和试剂盒。
技术实现思路
本申请针对目前临床没有可靠的、准确的诊断鉴别视神经脊髓炎谱系疾病的生物标记物，以及蛋白芯片和试剂盒的不足，本专利技术提供了一种高通量、高灵敏度、高特异性和低成本的能诊断鉴别视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)的生物标记物。有鉴于此，本申请第一方面提供了视神经脊髓炎谱系疾病生物标记物组，包括：单核细胞趋化蛋白-3、LIGHT、巨噬细胞炎性蛋白-1δ、胰岛素样生长因子结合蛋白-2、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体、血小板生成素和疱疹病毒进入介质；其中，LIGHT为T细胞上可诱导表达的，与HSV的糖蛋白D竞争结合HVEM的淋巴毒素类似物。需要说明的是，单核细胞趋化蛋白-3(monocytechemoattractantprotein-3，MCP-3)是一种多效性的趋化因子，能与多种趋化因子受体结合,激活多个信号通路促进肿瘤的发生、发展。MCP-3通过介导细胞免疫反应加速对基质降解，促进肿瘤的恶化。MCP-3还是间质细胞与肿瘤细胞相互作用的重要调节因子，它不仅参与肿瘤的发生，而且还诱导单核细胞进入肿瘤边缘,有利于形成适合肿瘤发展的微环境。T细胞上可诱导表达的，与HSV的糖蛋白D竞争结合HVEM的淋巴毒素类似物(Lymphotoxin-like,exhibitsinducibleexpression,andcompeteswithHSVglycoproteinD(gD)forHVEM,areceptorexpressedbyTlymphocytes，LIGHT)又名肿瘤坏死因子配体超家族成员14(tumornecrosisfactorsuperfamily14，TNFSF14)或HEVEM-L(HerpesvirusentrymediatorLigand)是TNF超家族的第14个成员，LIGHT以三聚体的形式诱导表达于活化的T细胞、NK细胞，选择性地表达于未成熟的树突状细胞(DCs)上。巨噬细胞炎性蛋白-1δ(MIP-1delta，也称CC基序趋化因子15，CCL15)是一种趋化因子，与受体结合后，可以发挥趋化和促进炎症的生物学作用，能引起多种炎症性疾病。胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)是能与胰岛素样生长因子(IGFs)结合的调节蛋白，调节IGFs与其受体(IGFR)的结合能力，影响IGFR下游信号转导通路中信号强度，调控靶细胞的生长和增殖。糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(glucocorticoid-inducedtumornecrosisfactorreceptor,GITR)是肿瘤坏死因子受体超家族(TNFRSF)中的第18个成员，是胸腺来源的CD4+CD25+调节性T细胞(regulatoryTcell,Treg)上的一个表面分子，其配体为GITRL。血小板生成素(thrombopoietin，TPO)是哺乳动物调节血小板生成的主要细胞因子,具有刺激巨核细胞集落生成的功能.体外实验表明,TPO既可以促进早期巨核细胞分化。疱疹病毒进入介质(Herpesvirusentrymediator，HVEM)是肿瘤坏死因子及其受体超家族(TNF/TNFRSF)成员，其可以以配体及受体结合的形式结合多种协同刺激分子成员，发挥其生物学功能。HVEM在T淋巴细胞的免疫应答过程中通过结合不同的受体发挥的不同的作用，HVEM与自身免疫性疾病、炎症反应及肿瘤等多种复杂疾病都具有相关性。需要说明的是，单核细胞趋化蛋白-3、LIGHT、巨噬细胞炎性蛋白-1δ、胰岛素样生长因子结合蛋白-2、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体和血小板生成素组成视神经脊髓炎谱系疾病生物标记物组；单核细胞趋化蛋白-3、LIGHT、巨噬细胞炎性蛋白-1δ、胰岛素样生长因子结合蛋白-2、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体和血小板生成素为视神经脊髓炎谱系疾病生物标记物。视神经脊髓炎谱系疾病生物标记物组用于制备诊断视神经脊髓炎谱系疾病的产品中的应用，所述视神经脊髓炎谱系疾病生物标记物组包括：单核细胞趋化蛋白-3、LIGHT、巨噬细胞炎性蛋白-1δ、胰岛素样生长因子结合蛋白-2、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体和血小板生成素；其中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.视神经脊髓炎谱系疾病生物标记物组，其特征在于，包括：单核细胞趋化蛋白-3、LIGHT、巨噬细胞炎性蛋白-1δ、胰岛素样生长因子结合蛋白-2、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体、血小板生成素和疱疹病毒进入介质；/n其中，LIGHT为T细胞上可诱导表达的，与HSV的糖蛋白D竞争结合HVEM的淋巴毒素类似物。/n

【技术特征摘要】
1.视神经脊髓炎谱系疾病生物标记物组，其特征在于，包括：单核细胞趋化蛋白-3、LIGHT、巨噬细胞炎性蛋白-1δ、胰岛素样生长因子结合蛋白-2、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体、血小板生成素和疱疹病毒进入介质；
其中，LIGHT为T细胞上可诱导表达的，与HSV的糖蛋白D竞争结合HVEM的淋巴毒素类似物。


2.视神经脊髓炎谱系疾病生物标记物组用于制备诊断视神经脊髓炎谱系疾病的产品中的应用；
所述视神经脊髓炎谱系疾病生物标记物组包括：单核细胞趋化蛋白-3、LIGHT、巨噬细胞炎性蛋白-1δ、胰岛素样生长因子结合蛋白-2、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体、血小板生成素和疱疹病毒进入介质；其中，LIGHT为T细胞上可诱导表达的，与HSV的糖蛋白D竞争结合HVEM的淋巴毒素类似物。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述视神经脊髓炎谱系疾病的受检样品为血清或/和血浆。


4.一种由视神经脊髓炎谱系疾病生物标记物组的第一抗体组成的用于诊断视神经脊髓炎谱系疾病的蛋白芯片，其特征在于，包括权利要求1所述的视神经脊髓炎谱系疾病生物标记物组的第一抗体，或权利要求2或3所述应用的视神经脊髓炎谱系疾病生物标记物组的第一抗体和载...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄若磐，符聪聪，张惠华，
申请(专利权)人：广州瑞博奥生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44