本发明专利技术属于抗肿瘤药物制备技术领域，具体涉及一种5‑氟尿嘧啶与二硫代氨基甲酸盐化合物P1的设计、合成及其在制备抗肿瘤药物中的应用，尤其涉及一种[2‑（5´‑氟尿嘧啶）乙酸‑乙基苯基二硫代氨基甲酸]酐及其在制备抗肿瘤药物中的应用。将5‑氟尿嘧啶进行一定的衍生之后，与乙基苯基二硫代氨基甲酸锌通过化学键结合，设计并合成了一个潜在的多靶点抗肿瘤新药。细胞毒性实验验证了其抗肿瘤活性，并且联合铜离子使用，其对应的肿瘤细胞生长的抑制能力显著增强。肿瘤细胞克隆形成实验进一步表明其抑制细胞增殖活性的能力，细胞转移实验也显示出其对肿瘤细胞转移能力的抑制作用。
【技术实现步骤摘要】
[2-(5′-氟尿嘧啶)乙酸-乙基苯基二硫代氨基甲酸]酐及在制备抗癌药物中的应用
本专利技术属于抗肿瘤药物制备
，具体涉及一种5-氟尿嘧啶与二硫代氨基甲酸盐化合物P1的设计、合成及其在制备抗肿瘤药物中的应用，尤其涉及一种[2-(5′-氟尿嘧啶)乙酸-乙基苯基二硫代氨基甲酸]酐及其在制备抗肿瘤药物中的应用。
技术介绍
5-氟尿嘧啶(5-FU)是抑制胸苷酸合成酶(TS)的抗代谢药物，进入体内后，能在分子水平上代替正常代谢物，掺入生物大分子，干扰DNA的合成，发挥细胞毒作用从而杀灭肿瘤细胞。5-FU是细胞周期特异性药物，对S期细胞敏感。主要作用于胃肠癌、肝癌和结肠癌等的治疗。5-FU及其衍生物己应用于临床，但由于具有骨髓抑制和胃肠道等副反应，毒副作用大，因此长期以来人们一直致力于对5-FU的各种改性，试图寻找选择性更好，毒副作用更低的氟尿嘧啶化合物作为抗癌药物的先导化合物。二硫代氨基甲酸盐衍生物可与铜离子络合形成复合物，具有抗细菌、抗病毒和抗肿瘤等生物活性。多项研究已报道二硫代氨基甲酸盐衍生物吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)和双硫仑(DSF)能够有效降低体内铜水平，抑制蛋白酶体活性和诱导肿瘤凋亡。其中双硫仑的抗癌机制已被报道，双硫仑在机体内代谢产生两分子乙基苯基二硫代氨基甲酸根离子，这种离子与铜离子螯合形成有活性的抗癌复合物，这种复合物可以与p97-NPL4通路中的NPL4蛋白牢固结合，抑制其“质量控制”功能，使癌细胞内积累大量的残次蛋白，最终诱导癌细胞的凋亡。药物拼合原理是药物化学中的一种常用的药物结构改造手段。其不足之处在于：由于拼合后药物分子结构比较大，往往会与设想的目标产生较大的出入。如：有时拼合药物分子的立体选择性会发生改变；有时药效基团会受到邻位较大基团的掩蔽，构成较大的空间位阻；并且断键的难易也与所连基团结构有关。药物结构改变后，药物在体内的吸收、转运、代谢等方面也随之发生变化，会导致药效学的复杂情况。如：拼合后的分子一般相对分子质量较大，所以它的细胞通透性较差；而且分子结构大，相对来说性质不太稳定，易分解，从而导致没有实际药用价值；另外有些分子在体内过于稳定，对水解酶不敏感，不能迅速定量地释放出目标药物，所以也没有临床意义。
技术实现思路
针对现有技术中存在的不足和为了填补本领域的技术空白，本专利技术的第一个目的在于提供了一种化合物P1：[2-(5′-氟尿嘧啶)乙酸-乙基苯基二硫代氨基甲酸]酐，其结构式如下：分子式：C15H14FN3O3S2分子量：367.04606该化合物是将5-氟尿嘧啶进行适当衍生后，通过酸酐键使其与乙基苯基二硫代氨基甲酸酯连接在一起，其溶解性好，可以作为前药，在人体内酯酶的作用下分解成两种具有药物活性的化合物，从而发挥疗效，而且这两种药物在药理活性上又可以相互促进，达到增强疗效、减轻毒副作用、提高药物的生物利用度的目的。而且成酯后的药物要通过酯酶水解才可以释放出来，有延长作用时间的可能，所以值得研究开发。本专利技术的第二个目的在于提供了一种所述化合物P1在制备抗肿瘤药物中的应用。本专利技术对其进行了初步的生物活性评价，结果显示，该化合物具有明显的抑制肿瘤细胞MCF-7、U87MG、HepG2、BGC823生长的作用。本专利技术的实验证明：乙基苯基二硫代氨基甲酸酯基团的引入增加了5-氟尿嘧啶衍生物的活性，说明乙基苯基二硫代氨基甲酸酯基团对5-氟尿嘧啶的抗癌活性有协同作用。在联合铜离子使用时，化合物P1的抗肿瘤活性明显增强，说明此化合物P1在肿瘤细胞内酶的作用下代谢出乙基苯基二硫代氨基甲酸盐，并与铜离子形成螯合物，进而增强活性。此化合物P1与铜离子联合使用(优选将化合物P1与铜离子按照摩尔比1:1联合使用)时，可抑制肿瘤细胞的增殖活性和转移能力，并且可以造成肿瘤细胞G1期阻滞。所述化合物P1可以采取以下合成工艺路线来制备：与现有技术相比，本专利技术的优点和有益效果在于：1、提供了一种新的、优势突出的药用化合物；2、制备本专利技术新化合物的操作步骤简单、副反应少、原料易得、溶剂绿色环保。附图说明图1为实施例一合成的5-氟尿嘧啶-1乙酸的1HNMR图谱；图2为实施例二合成的5-氟尿嘧啶-1-乙酰氯的1HNMR图谱；图3为实施例三合成的[2-(5′-氟尿嘧啶)乙酸-乙基苯基二硫代氨基甲酸]酐的1HNMR图谱；图4为实施例三合成的[2-(5′-氟尿嘧啶)乙酸-乙基苯基二硫代氨基甲酸]酐的13CNMR图谱；图5为实施例四中MCF-7细胞毒性实验结果图；图6为实施例四中U87MG细胞毒性实验结果图；图7为实施例四中HepG2细胞毒性实验结果图；图8为实施例四中BGC823细胞毒性实验结果图；图9为实施例五中MCF-7细胞凋亡检测实验结果图，其中，*:p<0.05,**:p<0.01；图10为实施例五中U87MG细胞凋亡检测实验结果图，其中，*:p<0.05,**:p<0.01；图11为实施例六中MCF-7细胞克隆形成实验结果图；图12为实施例六中U87MG细胞克隆形成实验结果图；图13为实施例六中HepG2细胞克隆形成实验结果图；图14为实施例六中BGC823细胞克隆形成实验结果图；图11-14中，*:p<0.05,**:p<0.01；图15为实施例七中MCF-7细胞Transwell实验结果图；图16为实施例七中U87MG细胞Transwell实验结果图；图17为实施例七中HepG2细胞Transwell实验结果图；图18为实施例七中BGC823细胞Transwell实验结果图；图15-18中，*:p<0.05,**:p<0.01；图19为实施例八中MCF-7细胞的细胞周期检测实验结果图；图20为实施例八中U87MG细胞的细胞周期检测实验结果图。具体实施方式下面申请人将结合具体的实施例对本专利技术化合物P1的制备过程及应用过程做详细说明，便于本领域技术人员清楚地理解本专利技术。但应该理解，以下实施例不应以任何方式被解释为对本申请权利要求书请求保护范围的限制。实施例一-三是化合物P1的制备实施例，所用试剂均为常见市售商品，纯度级别均为分析纯，浓盐酸浓度为37wt％。实施例一、5-氟尿嘧啶-1-乙酸的合成向三口烧瓶中加入0.2mol氢氧化钾，40ml水，搅拌溶解后，加入0.04mol5-氟尿嘧啶，加热至60℃搅拌30min，缓慢滴加含0.072mol溴乙酸的溴乙酸水溶液，滴加完毕后继续反应至终点(TLC跟踪)，用浓盐酸(37wt％)调pH至5.5，放入4℃冰箱冷却2h，若有沉淀析出，滤除，再用浓盐酸(37wt％)将pH调至2，放冰箱冷藏室冷却12h，过滤，沉淀物用纯水洗涤3次，再用纯水重结晶，烘干得针状晶体5-氟尿嘧啶-1-本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.化合物[2-(5′-氟尿嘧啶)乙酸-乙基苯基二硫代氨基甲酸]酐，其结构式为：/n
【技术特征摘要】
1.化合物[2-(5′-氟尿嘧啶)乙酸-乙基苯基二硫代氨基甲酸]酐，其结构式为：
2.权利要求1所述的化合物[2-(5′-氟尿嘧啶)乙酸-乙基苯基二硫代氨基甲酸]酐在制备抗肿瘤药物中的应用。
3.权利要求1所述的化合物[2-(5′-氟尿嘧啶)乙酸-乙基苯基二硫代氨基甲酸]酐在制备抑制肿瘤细胞MCF-7、U87MG、HepG2或BGC823生长的药物中的应用。
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【专利技术属性】
技术研发人员：刘明星，王友运，刘建，郭惠玲，
申请(专利权)人：湖北工业大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42
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