人工毛囊种子细胞毛囊隆突区干细胞和毛乳头细胞分离方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种人工毛囊种子细胞毛囊隆突区干细胞和毛乳头细胞分离方法及应用，该分离方法是组织解剖含有小鼠触须毛囊单位的面部组织，胶原酶Ⅴ消化至组织松散膨大，从真皮层一侧拔出保持完好的触须毛囊，外科手术刀切除毛乳头；将毛囊移植到transwell膜上，静置培养；毛乳头用胶原酶Ⅰ消化后，洗涤、离心得到悬液，悬液滴加于transwell膜上，静置培养；胰酶消化收获毛囊隆突区干细胞和毛乳头细胞两种细胞。两种同一成体来源种子细胞可共同培养构成毛囊类器官。本发明专利技术分离方法较现有方法相同时间提高了细胞产量，确保了原代细胞表型维持。毛囊类器官模拟体内相对位置对毛发新生研究具有重要价值，也为毛发新生药物筛选和评价开发了平台。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物学，具体涉及一种人工毛囊种子细胞毛囊隆突区干细胞和毛乳头细胞分离方法及应用。

技术介绍

1、各种环境、疾病、心理、遗传等因素破坏了新生或者循环过程，带来的结果就是日益严重的脱发问题，严重影响当代人的生活质量。毛囊(hair follicle)作为最重要的皮肤附属物，由神经外胚层-中胚层相互作用形成的微小型器官，其发育与生长是具有周期性的动态循环过程。毛囊的形态发生与再生依赖于上皮与间充质的密切合作，也被称之为“上皮-间质互作”(epidermis-mesenchyme interaction，emi)。他是一个复杂的细胞-细胞通讯网络，通过旁分泌途径涉及wnt、hedgehog、notch和bmp等信号通路之间的强列相互作用。emi成为了手囊形态发生和再生的一个先决条件，已经成为毛囊组织再生的理论基础。

2、因此，再生毛囊的策略就是在体外模拟体内的emi，主要采取上皮和真皮细胞结合的方法，其中上皮细胞包括表皮干细胞、角质形成细胞等，真皮细胞包括毛乳头细胞、皮肤前体细胞。当然也存在使用诱导多能干细胞分化成毛囊。目前多选用新生来源本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种人工毛囊种子细胞毛囊隆突区干细胞和毛乳头细胞分离方法，其特征在于：包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的人工毛囊种子细胞毛囊隆突区干细胞和毛乳头细胞分离方法，其特征在于：步骤(2)中，所述的拔出毛囊的方法包括如下步骤：持一把镊子夹住毛干近端稳定毛囊，逆毛干生长方向推动以使真皮一侧毛囊暴露明显，用另一把镊子从真皮层一侧拔出单独的毛囊单位。

3.根据权利要求1所述的人工毛囊种子细胞毛囊隆突区干细胞和毛乳头细胞分离方法，其特征在于：

4.根据权利要求1所述的人工毛囊种子细胞毛囊隆突区干细胞和毛乳头细胞分离方法，其特征在于：>

5.根据权利...

【技术特征摘要】

1.一种人工毛囊种子细胞毛囊隆突区干细胞和毛乳头细胞分离方法，其特征在于：包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的人工毛囊种子细胞毛囊隆突区干细胞和毛乳头细胞分离方法，其特征在于：步骤(2)中，所述的拔出毛囊的方法包括如下步骤：持一把镊子夹住毛干近端稳定毛囊，逆毛干生长方向推动以使真皮一侧毛囊暴露明显，用另一把镊子从真皮层一侧拔出单独的毛囊单位。

3.根据权利要求1所述的人工毛囊种子细胞毛囊隆突区干细胞和毛乳头细胞分离方法，其特征在于：

4.根据权利要求1所述的人工毛囊种子细胞毛囊隆突区干细胞和毛乳头细胞分离方法，其特征在于：

5.根据权利要求1所述的人工毛囊种子细胞毛囊隆突区干细胞和毛乳头细胞分离方法，其特征在于：步骤(1)、(3)、(4)中，所述的清洗使用的洗涤液为添加200units/ml青霉素、200mg/ml链霉素的pbs缓冲液。

6.根据权利要求1所述的人工毛囊种子细胞毛囊隆突区干细胞和毛乳头细胞分离方法，其特征在于：

7.权利要求1-6任一项所述的人工毛...

【专利技术属性】
技术研发人员：李涵泺，金启发，胡康洪，魏艳红，尧晨光，康思妮，刘剑，王雪，
申请(专利权)人：湖北工业大学，
类型：发明
国别省市：