一种用葛根素核酸适配体提取废水中葛根素的方法技术

技术编号:25171490 阅读:46 留言:0更新日期:2020-08-07 21:02
本发明专利技术提供了一种用葛根素核酸适配体提取废水中葛根素的方法,包括以下步骤:废水预处理,初步浓缩,超声波破除,核酸适配体制备,高亲合度的靶分子结合核酸适配体,一次纯化,二次纯化,成品制备。本发明专利技术的有益之处在于:本发明专利技术提供的一种用葛根素核酸适配体提取废水中葛根素的方法,在常规机械纯化的基础上辅助以具有高特异性的葛根素核酸适配体,利用核酸适配体对葛根素具有高亲和力的特性,实现核酸适配体对葛根素靶标的聚合吸附,以及葛根素的富集,进而加速葛根素从废水中析出,有效提高提取的速度和效率,最终实现对废水中葛根素的高效提取。

【技术实现步骤摘要】
一种用葛根素核酸适配体提取废水中葛根素的方法
本专利技术涉及分离提取
,特别涉及是一种用葛根素核酸适配体提取废水中葛根素的方法。
技术介绍
葛根素亦称葛根黄素。是从中药葛根中分离的具有扩冠作用的异黄酮类衍生物。存在于豆科植物葛的根。具有退热、镇静和使冠状动脉血流量增加的作用,对垂体后叶素引起的急性心肌出血有保护作用,临床上用于冠心病心绞痛、高血压,物化性质为白色值微黄色结晶性粉末。葛根素对冠心病、心绞痛等心脑血管疾病有着良好的疗效,而且提纯物是非常常见的葛根,因而在国内广受现阶段提纯葛根素的提纯方法有水浴回流法、超声波提纯法以及微波提取法,然而现有的葛根素提存方法不管是哪种方法其在提存中,都会进行粉碎和过滤,所产生的滤液中还含有很多葛根素没有提存出去,直接弃用会造成原料浪费,这也是目前葛根素提取过程中纯度和利用率较低的问题,鉴于此,针对上述问题深入研究,本专利技术开发了一种全新的用葛根素核酸适配体提取废水中葛根素的方法。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足,本专利技术提供了一种全新的用葛根素核酸适配体提取废水本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用葛根素核酸适配体提取废水中葛根素的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:/n(1)废水预处理:将生产葛根淀粉的废水进行杂质滤除,具体为向所述废水中加入质量分数1-3%的有机絮凝剂,静置20-30min,捞除漂浮物,之后过筛网进行过滤除杂,得到预处理滤液备用;/n(2)初步浓缩:将所述预处理滤液进行蒸馏,具体为使用蒸馏容器在低压状态下将所述滤液加热至60-70℃,并保温加热30-40min蒸干所述预处理滤液中的水分,得到一号残渣;/n(3)超声波破除:将所述一号残渣放入超声波破除设备中,启动所述超声波破除设备产生超声波破除细胞壁,得到破壁产物,其中所述超声波破除时间为10-20min...

【技术特征摘要】
1.一种用葛根素核酸适配体提取废水中葛根素的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(1)废水预处理:将生产葛根淀粉的废水进行杂质滤除,具体为向所述废水中加入质量分数1-3%的有机絮凝剂,静置20-30min,捞除漂浮物,之后过筛网进行过滤除杂,得到预处理滤液备用;
(2)初步浓缩:将所述预处理滤液进行蒸馏,具体为使用蒸馏容器在低压状态下将所述滤液加热至60-70℃,并保温加热30-40min蒸干所述预处理滤液中的水分,得到一号残渣;
(3)超声波破除:将所述一号残渣放入超声波破除设备中,启动所述超声波破除设备产生超声波破除细胞壁,得到破壁产物,其中所述超声波破除时间为10-20min;之后将所述破壁产物加入到质量系数浓度60-80%的乙醇水溶液中,升温至40-55℃搅拌1-2h,充分浸提后,过滤除去不溶性杂质,得到浸提滤液;之后在低压状态下,将所述浸提滤液加热至60℃蒸干,得到二号残渣;
(4)核酸适配体制备:在真空无菌条件下,构建大容量核酸适配体文库;之后以葛根素作为靶标与所述核酸适配体文库进行相互作用,得到结合分子;之后采用核苷酸分离方法将所述结合分子中的核酸适配体与靶标分离,并利用光电导继电器反应使所述核酸适配体富集;
(5)高亲合度的靶分子结合核酸适配体:多次重复步骤(4)的操作,得到针对葛根素靶标的高亲合度的靶分子结合核酸适配体,并采用TE缓冲液将其配置成质量分数为1-5%的高亲合度的靶分子结合核酸适配体溶液;
(6)一次纯化:在所述高亲合度的靶分子结合核酸适配体溶液中加入固相载体,通过偶联反应将所述高亲合度的靶分子结合核酸适配体固定到所述固相载体上,得到固相载体结合体;在步骤(3)制备得到的所述二号残渣中加入5倍质量的溶解液,使其充分溶解,得到溶液;之后将所述溶液和所述固相载体结合体作用,30-50℃条件下,搅拌20-30min完成反应,分离出反应体系中的缓冲液,得到吸附葛根素固相载体结合体;将所述吸附葛根素固相载体结合体洗涤3次,并将洗涤后的吸附葛根素固相载体加入90-100℃的热水中,摇动5min,得到一号葛根素水溶液和一次解析葛根素固相载体;
(7)二次纯化:将步骤(6)中所述缓冲液再次和所述解析葛根素固相载体作用,30-50℃条件下,搅拌30-50min完成反应,分离出反应体系中的二次缓冲液,得到二次吸附葛根素固相载体结合体,将所述二次吸附葛根素固相载体结合体洗涤3次,并将洗涤后的二次吸附葛根素固相载体加入90-100℃的热水中,摇动5min,得二号葛根素水溶液和二次解析...

【专利技术属性】
技术研发人员:赵秋伶
申请(专利权)人:辽宁科技学院
类型:发明
国别省市:辽宁;21

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