【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】一种Cas蛋白体系分离DNA的方法
本专利技术涉及一种分离DNA的方法，尤其涉及一种采用Cas蛋白从溶液中分离DNA的方法。
技术介绍
通常情况下，绝大多数脱氧核糖核酸(DNA)位于细胞中，但不管是在微生物、植物还是动物的细胞外，也常常存在着DNA的片段，这类核酸被统称为游离DNA。Mandel和Metasis在1948年首次报道了在外周血中发现游离DNA(Mandel P.C R Hebd Seances Acad Sci(Paris),1948,142(3):241-3)。经过半个世纪的研究，科学家发现不论是健康人群还是患病人群，都有小部分DNA游离于细胞外。这类DNA通常存在于血液、血浆、血清和其他体液中。在各个样品中发现的细胞外DNA由于被核酸酶所保护(例如它们以蛋白脂质复合物的形式被分泌出来，常常与蛋白质结合，或被包含在囊泡中)，因此并不容易被降解。在患有疾病，如恶性肿瘤和传染病的人群中，这类细胞外DNA的含量常常比正常人要高很多，因此在疾病筛查、诊断、预后、病程进展监测、甚至是治疗靶标的识别等方面都有很大的应用前景。此外，母体血液中常伴随有相当含量的胎儿DNA，这类DNA可以用于多种检测，例如性别鉴定，染色体异常的测试和评估，同时还能监测妊娠相关的并发症。也正是由于其较强的临床诊断相关性，游离DNA在无创诊断和预后方面有着巨大的应用潜力，可用于例如无创产前基因检测、肿瘤检测、移植医学等许多其他疾病。目前，许多从各种生物液体中提取并分析单链或双链的游离DNA的方法已经被报道，其中包括阴离子交换法(WO201...
【技术保护点】
一种采用Cas蛋白从DNA溶液中分离DNA的方法。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180103 CN 2018100010730一种采用Cas蛋白从DNA溶液中分离DNA的方法。
权利要求1所述的方法，包括步骤a)DNA溶液与Cas蛋白体系混合；c)从Cas蛋白体系与DNA结合的复合物中分离得到DNA。
权利要求1所述的方法，包括步骤a)DNA溶液与Cas蛋白体系混合；b)富集步骤a)中的Cas蛋白体系与DNA结合的复合物；c)从步骤b)富集的复合物中分离得到DNA。
权利要求2所述的方法，其中所述的Cas蛋白体系为偶联了平板状、膜状或柱状的固体支持物的Cas蛋白。
权利要求3所述的方法，其中所述的Cas蛋白体系为偶联了珠形固体支持物的Cas蛋白。
权利要求3所述的方法，其中所述的Cas蛋白体系为Cas蛋白与至少一种连接序列形成的Cas融合蛋白。
权利要求6所述的方法，其中步骤b)在溶液中加入偶联了亲和分子的固体支持物，再通过离心富集或磁性富集。
权利要求6所述的方法，其中在步骤a)中加入偶联了亲和分子的固体支持物，孵育后，再通过步骤b)富集。
权利要求1-8任一项所述的方法，其中所述的DNA是双链DNA。
权利要求4或5所述的方法，其中所述的Cas蛋白体系为Cas蛋白通过化学共价键偶联到固体支持物。
权利要求6所述的方法，其中所述的Cas蛋白体系为Cas融合蛋白与固体支持物上的亲和分子结合而形成的。
权利要求4-11任一项所述的方法，其中所述的固体支持物是能与氨基酸残基形成化学键的固体物质。
权利要求10所述的方法，其中所述的固体支持物选自凝胶材料、磁性材料、纤维素材料、硅胶材料、玻璃材料和人造高分子聚合物制得的固体物质中的至少一种。
权利要求5-13任一项所述的方法，其中所述的珠形的固体支持物为磁珠、凝胶珠和/或硅胶珠。
权利要求6-14任一项所述的方法，其中所述的连接序列和亲和分子选自下组配体和受体组合中的一种：酶与底物、抗原与抗体、生物素与亲和素。
权利要求15所述的方法，其中所述的酶与底物选自谷胱甘肽转移酶与谷胱甘肽。
权利要求15所述的方法，其中所述的抗原-抗体选自下组中的一种：A蛋白或其保留了结合Fc区域功能性的片段与免疫球蛋白或其Fc或Fab片段、G蛋白或其保留了结合Fc区域功能性的片段与免疫球蛋白或其Fc或Fab片段、组氨酸标签与抗组胺酸标签、多组氨酸标签与抗多组氨酸标签和FLAG标签与抗FLAG标签。<...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴尧，王兴兴，李秋实，
申请(专利权)人：苏州克睿基因生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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