唾液斑迹DNA和RNA同时提取的方法技术

本发明专利技术公开了唾液斑迹DNA和RNA同时提取的方法。本发明专利技术提供了一种从现场唾液斑迹中同步提取DNA和RNA的方法，1)将带有载体的现场唾液斑迹浸透在含有DTT和细胞解离缓冲液的反应体系中，孵育反应，得到反应产物；2)去除所述反应产物中的载体，收集去除载体的反应产物，再将所述去除载体的反应产物流经DNA吸附柱，收集吸附有DNA的吸附柱和含有RNA的过柱液体；3)将所述含有RNA的过柱液体和所述吸附有DNA的吸附柱分别纯化，得到RNA和DNA；该方法可用于口腔拭子、烟蒂、水杯擦拭物等常见现场检材的核酸提取，获得的DNA和RNA样本在下游STR分型和荧光定量PCR检测中均获得较为理想的检测结果。

【技术实现步骤摘要】
唾液斑迹DNA和RNA同时提取的方法
本专利技术属于生物
，尤其涉及一种唾液斑迹DNA和RNA同时提取的方法。
技术介绍
唾液斑迹是各类案事件现场最为常见的生物物证种类之一，既包括口腔拭子样本，也包括烟蒂、餐饮具擦拭物、咬痕等等可能粘附有口腔上皮细胞的微量现场检材，其中蕴含着DNA、RNA等核酸信息。随着DNA检验技术的发展，唾液斑迹与脱落细胞等其他生物物证相比，更容易通过DNA分析获得具有比对价值的DNASTR分型，在案件侦办和嫌疑人排查中发挥着不可取代的重要作用。同时，在DNASTR分型检验的基础上，通过RNA分析等技术手段进行唾液斑迹等现场生物检材的组织来源推断，能够为涉案生物物证的全面分析和案发过程重建提供准确信息，进一步提升涉案生物物证的证据价值。然而，在当前的犯罪形式和刑事技术的发展趋势下，现场微量、陈旧性生物物证已经成为法庭科学领域检验和研究的主要对象，并且在办案实践中发挥重要作用。微量、陈旧性生物物证由于核酸含量低、核酸破坏程度高，应用现有技术方法，难以同时提取获得既满足DNASTR检验又符合RNA分析的核酸样本。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从现场唾液斑迹中同步提取DNA和RNA的方法，包括如下步骤：/n1)将带有载体的现场唾液斑迹浸透在含有DTT和细胞解离缓冲液的反应体系中，孵育反应，得到反应产物；/n2)去除所述反应产物中的载体，收集去除载体的反应产物，再将所述去除载体的反应产物过DNA吸附柱，收集吸附有DNA的吸附柱和含有RNA的过柱液体；/n3)将所述含有RNA的过柱液体和所述吸附有DNA的吸附柱分别纯化，得到RNA和DNA；/n所述含有RNA的过柱液体纯化按照包括如下步骤的方法进行：/n3)-1、将所述含有RNA的过柱液体流经RNA吸附柱，得到吸附有RNA的吸附柱；/n3)-2、用RNA洗脱缓冲液流经所述吸附有R...

【技术特征摘要】
1.一种从现场唾液斑迹中同步提取DNA和RNA的方法，包括如下步骤：
1)将带有载体的现场唾液斑迹浸透在含有DTT和细胞解离缓冲液的反应体系中，孵育反应，得到反应产物；
2)去除所述反应产物中的载体，收集去除载体的反应产物，再将所述去除载体的反应产物过DNA吸附柱，收集吸附有DNA的吸附柱和含有RNA的过柱液体；
3)将所述含有RNA的过柱液体和所述吸附有DNA的吸附柱分别纯化，得到RNA和DNA；
所述含有RNA的过柱液体纯化按照包括如下步骤的方法进行：
3)-1、将所述含有RNA的过柱液体流经RNA吸附柱，得到吸附有RNA的吸附柱；
3)-2、用RNA洗脱缓冲液流经所述吸附有RNA的吸附柱，室温静置5-10min，离心收集第一次过柱液，即得到RNA；
所述DNA纯化按照包括如下步骤的方法进行：
3)-a、用DNA洗脱缓冲液流经所述吸附有DNA的吸附柱，60-65℃静置8-15min，离心收集第一次过柱液，即得到DNA。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
所述含有RNA的过柱液体纯化的方法中，在步骤3)-1和3)-2之间还包括如下步骤：洗涤所述吸附有RNA的吸附柱，得到洗涤后吸附有RNA的吸附柱。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：
所述含有RNA的过柱液体纯化的方法中，在步骤3)-1中，在流经RNA吸附柱前，还包括如下步骤：向所述含有RNA的过柱液体中加入等体积的体积百分含量为70％-80％的乙醇水溶液，得到混合液。

【专利技术属性】
技术研发人员：张瑾，杨雪莹，畅晶晶，刘开会，史祺云，张颖，郝金萍，高珊，朱典，徐小玉，张广峰，聂昊，郭柯利，杜猛，
申请(专利权)人：公安部物证鉴定中心，
类型：发明
国别省市：北京;11