一种检测甘姜苓术汤指纹图谱的方法技术

本发明专利技术公开了一种检测甘姜苓术汤指纹图谱的方法，其特征在于，取甘姜苓术汤供试品溶液进行HPLC检测，HPLC检测的色谱条件包括：采用C18色谱柱，以乙腈为流动相A，含有0.1％浓度的磷酸水溶液为流动相B，所述HPLC检测的色谱条件中的洗脱为梯度洗脱，该梯度洗脱程序为：0～12min，流动相为93％～73％A；12～34min，流动相为73％～35％A；34～40min，流动相为35％～30％A。利用本发明专利技术方法对所含化学成分的种类与数量进行全面的检测，据此建立甘姜苓术汤物质基准指纹图谱，能全面地反映其中所含化学成分的种类与数量，进而对制剂质量进行整体描述和评价。

【技术实现步骤摘要】
一种检测甘姜苓术汤指纹图谱的方法
本专利技术涉及分析化学
，特别涉及一种检测甘姜苓术汤指纹图谱的方法。
技术介绍
甘姜苓术汤来源于汉·张仲景的《金匮要略》，处方由干姜、白术、茯苓、甘草组成。干姜为君药温中散寒，茯苓、白术同为臣药健脾化湿，甘草为使药调和诸药，全方共奏温阳散寒祛湿之功效。中药及其制剂均为多组分复杂体系，因此评价其质量应采用与之相适应的方法。中药指纹图谱是一种综合可量化的鉴定手段，主要用于评价中药以及其制剂质量的真实性、优良性与稳定性。能提供丰富鉴别信息的检测方法，建立中药指纹图谱将能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对制剂质量进行整体描述和评价。为了更好地对制剂质量进行控制，保证其临床疗效，建立其成分检测方法全面评价该制剂质量。甘姜苓术汤为复方制剂，化学成分复杂，有效成分包括黄酮类、萜类化合物等。有必要对其中的化学成分进行检测，以更好地实现对复方制剂的质量控制和评价。
技术实现思路
为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：一种检测甘姜苓术汤指纹图谱的方法，其特征在于，取甘姜苓术汤供试品溶液进行HPLC检测，HPLC检测的色谱条件包括：采用C18色谱柱，以乙腈为流动相A，含有0.1％浓度的磷酸水溶液为流动相B，所述HPLC检测的色谱条件中的洗脱为梯度洗脱，该梯度洗脱程序为：0～12min，流动相为93％～73％A；12～34min，流动相为73％～35％A；34～40min，流动相为35％～30％A。可选地，所述甘姜苓术汤供试品溶液的制备为，取甘姜苓术汤物质基准粉末0.1g，置25mL容量瓶中，加水溶解定容，即得。可选地，甘姜苓术汤物质基准制备方法包括：取干姜12g、茯苓12g、白术6g、甘草6g以上四味药材，置于煎液壶中，加纯化水煎煮，过滤，滤液冷却至室温，将滤液旋蒸浓缩，将浓缩药液采用程序冷冻干燥，即得甘姜苓术汤物质基准粉末。进一步地，所述色谱条件包括：流速为0.8～1.2mL/min，柱温为25～35℃，检测波长228～232nm。更进一步地，所述色谱条件包括：所述流速为1.0mL/min，所述柱温为30℃，检测波长230nm。具体地，所述C18色谱柱选自AgilentZorbaxSB-C18色谱柱、PhenomenexGeminiC18色谱柱、ThermosyncronisC18色谱柱、Agilent5TC-C18色谱柱、Kromasil100-5-C18色谱柱、WelchXtimateC18色谱柱、WaterssymmetryC18色谱柱或PhenomenexLunaC18色谱柱。进一步地，上述检测方法还包括对照品的检测，所述对照品包括6-姜辣素、甘草苷、甘草酸铵、茯苓酸、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ标准品中的一种或多种。具体地，所述对照品被制备成溶液进行检测的方法：取6-姜辣素、甘草苷、甘草酸铵、茯苓酸、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ标准品，加甲醇制成每1mL含20～100μg的单标或混标溶液。利用上述条件得到的HPLC检测结果，可最终获得甘姜苓术汤基准图谱。建立甘姜苓术汤基准图谱后，按相同的方法测定待测甘姜苓术汤样品的图谱，然后将其与上述图谱比较，相似度不低于0.85，优选不低于0.90。进一步地，上述方法所得图谱可以包括如下峰：进一步地，上述峰的峰面积为：本专利技术提供了一种对甘姜苓术汤物质基准指纹图谱检测的方法，可利用该方法对所含化学成分的种类与数量进行全面的检测，据此建立甘姜苓术汤物质基准指纹图谱，该指纹图谱方法专属性强，各色谱峰分离较好，基线平稳，峰型好，能全面地反映其中所含化学成分的种类与数量，进而对制剂质量进行整体描述和评价。附图说明图1为甘姜苓术汤物质基准在全波长下3D色谱图；图2为指纹图谱流动相考察色谱图；图3为指纹图谱洗脱梯度考察色谱图；图4为指纹图谱供试品制备方法考察色谱图；图5为指纹图谱耐用性考察；图6为指纹图谱方法验证色谱图；图7为甘姜苓术汤物质基准与药材的相关性指纹图谱。具体实施方式本专利技术公开了一种检测甘姜苓术汤物质基准指纹图谱的方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。如没有特别指明，本专利技术提供的甘姜苓术汤检测方法中所用药品、试剂、仪器均可由市场购得：仪器与试药MettlerToledoAL204电子分析天平(瑞士梅特勒-托利多公司)MettlerToledoXP6电子分析天平(瑞士梅特勒-托利多公司)KQ-250DB数控超声清洗仪(昆山市超声仪器有限公司)DHG-9070A电热恒温鼓风干燥箱(上海新苗医疗器械制造有限公司)Agilent1260高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公司)Milli-Q(IQ-7000)纯水仪(美国密理博公司)样品：甘姜苓术物质基准(江苏康缘药业股份有限公司，批号：Z181104)，取干姜12g、茯苓12g、白术6g、甘草6g以上四味药材，置于煎液壶中，加纯化水适量煎煮，过滤，滤液冷却至室温，将滤液旋蒸浓缩，将浓缩药液采用程序冷冻干燥，即得甘姜苓术汤物质基准粉末对照品：甘草苷对照品(中国食品药品检定研究院，批号：111610-201106，供含量测定用，纯度93.7％)。甘草酸铵对照品(中国食品药品检定研究院，批号：110731-201619，供含量测定用，纯度93.0％)。6-姜辣素(中国食品药品鉴定研究院，批号111833-201705，供含量测定用，纯度96.8％)白术内酯Ⅰ：购自中国食品药品检定研究院，批号111975-201501，供含量测定用；含量以99.9％计白术内酯Ⅱ：购自中国食品药品检定研究院，批号111976-201501，供含量测定用；含量以99.9％计白术内酯Ⅲ：购自中国食品药品检定研究院，批号111978-201501，供含量测定用；含量以99.9％计茯苓酸：购自成都曼斯特公司，批号MUST-18072910，供含量测定用；含量以98.1％计试剂：乙腈为色谱纯(美国天地公司)；水为超纯水；其它试剂均为分析纯实施例11色谱条件选择1.1检测波长的选择取甘姜苓术物质基准粉末约0.1g，置25mL容量瓶中，加水适量振摇溶解后定容，取适量离心后，取上清液进行全波长扫描，经过多个波长的对比分析，最终选择检测波长为230nm。见附图1。1.2流动相的选择参照文献方法及待测成分的结构特点，选用本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测甘姜苓术汤指纹图谱的方法，其特征在于，取甘姜苓术汤供试品溶液进行HPLC检测，HPLC检测的色谱条件包括：/n采用C18色谱柱，以乙腈为流动相A，含有0.1％浓度的磷酸水溶液为流动相B，所述HPLC检测的色谱条件中的洗脱为梯度洗脱，该梯度洗脱程序为：0～12min，流动相为93％～73％A；12～34min，流动相为73％～35％A；34～40min，流动相为35％～30％A。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测甘姜苓术汤指纹图谱的方法，其特征在于，取甘姜苓术汤供试品溶液进行HPLC检测，HPLC检测的色谱条件包括：
采用C18色谱柱，以乙腈为流动相A，含有0.1％浓度的磷酸水溶液为流动相B，所述HPLC检测的色谱条件中的洗脱为梯度洗脱，该梯度洗脱程序为：0～12min，流动相为93％～73％A；12～34min，流动相为73％～35％A；34～40min，流动相为35％～30％A。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述甘姜苓术汤供试品溶液的制备为，取甘姜苓术汤物质基准粉末0.1g，置25mL容量瓶中，加水溶解定容，即得。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱条件包括：流速为0.8～1.2mL/min，柱温为25～35℃，检测波长228～232nm。


4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱条件包括：所述流速为1.0mL/min，所述柱温为30℃，检测波长230nm。


5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述C18色谱柱选自Agilen...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖伟，胡军华，王雪宁，殷洪梅，付娟，吴云，章晨峰，王振中，
申请(专利权)人：江苏康缘药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32