一种对甘姜苓术汤进行含量检测的方法技术

本发明专利技术公开了一种对甘姜苓术汤进行含量检测的方法，其特征在于，取甘姜苓术汤供试品溶液进行HPLC检测，HPLC检测的色谱条件包括：采用C18色谱柱，以含有0.1％浓度的磷酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，流速为0.8～1.2mL/min，柱温为25～35℃，检测波长228～232nm。利用本发明专利技术的检测方法可以准确测定甘姜苓术汤物质基准中的成分信息，或成分含量信息，经系统的方法学考察验证，显示该方法专属性强，其耐用性、重复性及准确性均良好，能够准确测定甘姜苓术汤物质基准中成分含量，因而能够客观评估制剂的质量。

【技术实现步骤摘要】
一种对甘姜苓术汤进行含量检测的方法
本专利技术涉及分析化学
，特别涉及一种对甘姜苓术汤进行含量检测的方法。
技术介绍
甘姜苓术汤来源于汉·张仲景的《金匮要略》，处方由干姜、白术、茯苓、甘草组成。干姜为君药温中散寒，茯苓、白术同为臣药健脾化湿，甘草为使药调和诸药，全方共奏温阳散寒祛湿之功效。中药及其制剂均为多组分复杂体系，因此评价其质量应采用与之相适应的方法。中药指纹图谱是一种综合可量化的鉴定手段，主要用于评价中药以及其制剂质量的真实性、优良性与稳定性。能提供丰富鉴别信息的检测方法，建立中药指纹图谱将能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对制剂质量进行整体描述和评价。为了更好地对制剂质量进行控制，保证其临床疗效，建立其成分检测方法全面评价该制剂质量。甘姜苓术汤为复方制剂，化学成分复杂，有效成分包括黄酮类、萜类化合物等。有必要对其中的化学成分进行检测，以更好地实现对复方制剂的质量控制和评价。
技术实现思路
为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：一种对甘姜苓术汤进行含量检测的方法，其特征在于，取甘姜苓术汤供试品溶液进行HPLC检测，HPLC检测的色谱条件包括：采用C18色谱柱，以含有0.1％浓度的磷酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，流速为0.8～1.2mL/min，柱温为25～35℃，检测波长228～232nm。。可选地，所述甘姜苓术汤供试品溶液的制备为，取甘姜苓术汤物质基准粉末约0.3g，精密加50％甲醇加热回流45min，放冷补重，即得。可选地，甘姜苓术汤物质基准粉末制备方法包括：取干姜12g、茯苓12g、白术6g、甘草6g以上四味药材，置于煎液壶中，加纯化水适量煎煮，过滤，滤液冷却至室温，将滤液旋蒸浓缩，将浓缩药液采用程序冷冻干燥，即得甘姜苓术汤物质基准粉末。进一步地，所述色谱条件包括：所述流速为1.0mL/min，所述柱温为30℃，检测波长230nm。具体地，所述C18色谱柱选自AgilentZorbaxSB-C18色谱柱、PhenomenexGeminiC18色谱柱、ThermosyncronisC18色谱柱、Agilent5TC-C18色谱柱、Kromasil100-5-C18色谱柱、WelchXtimateC18色谱柱、WaterssymmetryC18色谱柱或PhenomenexLunaC18色谱柱。进一步地，上述检测方法还包括对照品的检测，所述对照品包括6-姜辣素、甘草苷、甘草酸铵、茯苓酸、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ标准品中的一种或多种。具体地，所述对照品被制备成溶液进行检测的方法：取6-姜辣素、甘草苷、甘草酸铵、茯苓酸、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ标准品，加甲醇制成每1mL含20～100μg的单标或混标溶液。进一步地，所述HPLC检测的色谱条件中的洗脱为梯度洗脱，该梯度洗脱程序可以为：0～9min，流动相为81％A；9～30min，流动相为81％～60％A；30～45min，流动相为60％～15％A。通过建立一种或多种对照品的标准曲线，最终获得甘姜苓术汤物质基准成分信息，或成分含量信息。本专利技术提供了一种对甘姜苓术汤成分含量检测的方法，利用本专利技术的检测方法可以准确测定甘姜苓术汤物质基准中的成分信息，或成分含量信息，经系统的方法学考察验证，显示该方法专属性强，其耐用性、重复性及准确性均良好，能够准确测定甘姜苓术汤物质基准中成分含量，因而能够客观评估制剂的质量。附图说明图1甘草苷、甘草酸铵、6-姜辣素对照品光谱吸收图；图2甘姜苓术汤物质基准成分含量检测不同流动相考察图谱；图3甘姜苓术汤物质基准成分含量检测梯度洗脱程序考察色谱图；图4甘姜苓术汤物质基准成分含量检测方法耐用性考察色谱图；图5甘姜苓术汤物质基准成分含量检测专属性考察色谱图；图6甘姜苓术汤物质基准成分含量检测色谱中甘草苷、甘草酸、6-姜辣素峰纯度报告。具体实施方式本专利技术公开了一种甘姜苓术汤物质基准成分检测方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。如没有特别指明，本专利技术提供的甘姜苓术汤物质基准成分。仪器与试药MettlerToledoAL204电子分析天平(瑞士梅特勒-托利多公司)MettlerToledoXP6电子分析天平(瑞士梅特勒-托利多公司)KQ-250DB数控超声清洗仪(昆山市超声仪器有限公司)DHG-9070A电热恒温鼓风干燥箱(上海新苗医疗器械制造有限公司)Agilent1260高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公司)Milli-Q(IQ-7000)纯水仪(美国密理博公司)样品：甘姜苓术物质基准粉末(江苏康缘药业股份有限公司，批号：Z181104)，取干姜12g、茯苓12g、白术6g、甘草6g以上四味药材，置于煎液壶中，加纯化水适量煎煮，过滤，滤液冷却至室温，将滤液旋蒸浓缩，将浓缩药液采用程序冷冻干燥，即得甘姜苓术汤物质基准粉末对照品：甘草苷对照品(中国食品药品检定研究院，批号：111610-201106，供含量测定用，纯度93.7％)甘草酸铵对照品(中国食品药品检定研究院，批号：110731-201619，供含量测定用，纯度93.0％)6-姜辣素(中国食品药品鉴定研究院，批号111833-201705，供含量测定用，纯度96.8％)白术内酯Ⅰ：购自中国食品药品检定研究院，批号111975-201501，供含量测定用；含量以99.9％计白术内酯Ⅱ：购自中国食品药品检定研究院，批号111976-201501，供含量测定用；含量以99.9％计白术内酯Ⅲ：购自中国食品药品检定研究院，批号111978-201501，供含量测定用；含量以99.9％计茯苓酸：购自成都曼斯特公司，批号MUST-18072910，供含量测定用；含量以98.1％计试剂：乙腈为色谱纯(美国天地公司)；水为超纯水；其它试剂均为分析纯实施例11色谱条件1.1检测波长的选择通过对6-姜辣素、甘草苷、甘草酸铵对照品溶液进行全波长扫描，综合考量确定6-姜辣素、甘草苷、甘草酸铵含量测定的检测波长可以选择为230nm。结果见附图1。1.2流动相的选择选用乙腈-0.1％磷酸、乙腈-水为洗脱系统，通过乙腈-0.1％磷酸、乙腈-水进行试验，检测6-姜辣素、甘草苷、甘草酸铵。在乙腈-水系统下无法检出甘草酸铵；在乙腈-0.1％磷酸系统下检出6-姜辣素、甘草苷、甘草酸铵，且各色谱峰分离效果良好，故选择乙腈-0.1％本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种对甘姜苓术汤进行含量检测的方法，其特征在于，取甘姜苓术汤供试品溶液进行HPLC检测，HPLC检测的色谱条件包括：/n采用C18色谱柱，以含有0.1％浓度的磷酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，流速为0.8～1.2mL/min，柱温为25～35℃，检测波长228～232nm。/n

【技术特征摘要】
1.一种对甘姜苓术汤进行含量检测的方法，其特征在于，取甘姜苓术汤供试品溶液进行HPLC检测，HPLC检测的色谱条件包括：
采用C18色谱柱，以含有0.1％浓度的磷酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，流速为0.8～1.2mL/min，柱温为25～35℃，检测波长228～232nm。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述甘姜苓术汤供试品溶液的制备为，取甘姜苓术汤物质基准粉末0.3g，精密加50％甲醇加热回流45min，放冷补重，即得。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱条件包括：所述流速为1.0mL/min，所述柱温为30℃，检测波长230nm。


4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述C18色谱柱选自AgilentZorbaxSB-C18色谱柱、PhenomenexGeminiC18色谱柱、ThermosyncronisC18色谱柱、Agilent5TC-C18色...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖伟，王雪宁，胡军华，殷洪梅，付娟，吴云，章晨峰，王振中，
申请(专利权)人：江苏康缘药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32